Litterio, María Corina Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica 2015-03-20 Descripción: Se estudiaron los mecanismos antioxidantes y antihipertensivos del flavanol (?)-epicatequina, abundante en la dieta humana.In vitro se demostró que la capacidad de (?)-epicatequina atrapando radical alcoxilo y anión superóxido (mecanismo antioxidante directo)es alta, pero poco relevante comparadacon la deotroscompuestos a las concentraciones habituales en los tejidos. La (?)-epicatequina ejerció un efecto vasodilatador en aorta aislada, pero no significativo a la concentración que el compuesto alcanza en sangre. In vivo, en modelos experimentales de incremento de presión arterial en ratas por administración de L-NAME o por sobrecarga de fructosa, la (?)-epicatequina previno el aumento en presión arterial producido por los tratamientosa través del restablecimiento de la biodisponibilidad de óxido nítrico (NO)en aorta a valores controles asociado a: i) mayor actividad de NOsintasa, sin modificación en expresión de NO sintasa endotelial (con mayor fosforilación de Ser1177 y normalización de caveolina-1, en el modelo de fructosa) y ii) prevención del estrés oxidativo mediado por NADPH-oxidasa, regulando la expresión de p47phox (y de p22phox en el modelo de fructosa). Se concluye que la acción antihipertensiva de la (?)-epicatequina no involucra, al menos exclusivamente, mecanismos antioxidantes directos sino un conjunto de mecanismos antioxidantes indirectos. ...ver más Tipo de documento: tesis doctoral | Formato: PDF (tamaño kb) Pag. 187 p. Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica Ventura, Clara Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica 2014-12-18 Descripción: En los últimos años, ha cobrado importancia el estudio de los contaminantes
ambientales en relación al desarrollo de cáncer, en especial para el cáncer de mama,
debido a que muchos de los plaguicidas de uso corriente pueden actuar como
disruptores endócrinos (DEs), afectando la fisiología de la glándula mamaria.
En este trabajo, demostramos que bajas concentraciones del plaguicida
organofosforado clorpirifos (CPF) inducen la proliferación de la línea celular MCF-7 en
forma dependiente del RE?, mientras que, concentraciones mayores, conducen a una
disminución de la capacidad clonogénica celular mediada por un incremento en los
niveles de ERO y la fosforilación de la proteína ERK1/2.
Asimismo, el CPF modificó la histología de la glándula mamaria de rata
conduciendo a la aparición de lesiones proliferativas como la adenosis y la hiperplasia
ductal, afectó el sistema endócrino modificando los niveles circulantes de las hormonas
esteroideas e hipofisarias y alterando la esteroidogénesis ovárica. Finalmente, evidenciamos un efecto estimulante del CPF sobre la carcinogénesis mamaria mediante estudios en un modelo experimental en rata.
Nuestros resultados aportan nueva información acerca de los mecanismos de
acción del plaguicida CPF en las células mamarias. Además de interferir con el
metabolismo redox, el CPF regula la activación de diferentes vías de señalización,
desregula el sistema endócrino, modifica la histología del tejido mamario y afecta la
carcinogénesis en este tejido. ...ver más Tipo de documento: tesis doctoral | Formato: PDF (tamaño kb) Pag. 266 p. Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica Tallis, Silvina Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica 2014-12-18 Descripción: El término insuficiencia hepática, independientemente de su etiología, se define como
la claudicación en las funciones del hígado que resulta en un amplio espectro de
alteraciones clínicas, bioquímicas y neurofisiológicas. La enfermedad hepática puede
presentarse de forma aguda o crónica. La etapa crónica, y con menor frecuencia la
aguda, tiene como complicaciones de mayor importancia el síndrome de Hipertensión
Portal y la Encefalopatía Hepática.
La Encefalopatía Hepática es un cuadro clínico sobre el cual la ciencia médica ha tenido
menos control que sobre otras patologías que surgen como complicaciones de la
cirrosis hepática. Se define a la Encefalopatía Hepática como un síndrome
potencialmente reversible que se manifiesta por un amplio espectro de alteraciones en
la conciencia, que pueden ir desde sutiles cambios en el comportamiento hasta el
coma profundo y la muerte. Este síndrome neuropsiquiátrico es secundario a una
disfunción hepatocelular, al desarrollo de circuitos porto-sistémicos o a una
combinación de ambos. El cuadro clínico es complejo y puede afectar a cualquier área
cerebral. La alteración es una reacción mental orgánica con un trastorno neurológico y
psiquiátrico. Un hallazgo importante es la variabilidad, especialmente en las formas
crónicas. Los hallazgos dependen de la naturaleza e intensidad de los factores
etiológicos y predisponentes. Actualmente, se considera a la Encefalopatía Hepática un
gran desafío intelectual en los diferentes campos de la medicina debido a su cuadro
clínico variado, a su fisiopatología compleja, a la multiplicidad de factores
precipitantes, a la carencia de un fenómeno causal único, así como también debido a la
falta de estudios complementarios confirmatorios y diagnósticos.
La Encefalopatía Hepática Mínima es un estadio subclínico que presenta un desarrollo
fisiopatológico crónico asociado a un proceso adaptativo cerebral. El estudio
exhaustivo de la Encefalopatía Hepática Mínima es una herramienta de gran utilidad
para identificar las vías que inician o desencadenan los mecanismos fisiopatológicos
que posteriormente se interrelacionan en los estadios avanzados. Una vez disparada esta interrelación se establece una condición muy compleja que dificulta el poder dilucidar cuál ha sido el mecanismo o su vía iniciadora.
La presente Tesis Doctoral tuvo como objetivo principal estudiar las alteraciones
tempranas del Sistema Nervioso Central en un modelo experimental de Hipertensión
Portal Prehepática y caracterizar la Encefalopatía Hepática Mínima inducida por la
Ligadura Parcial de la Vena Porta, a partir de un estudio morfológico y funcional a nivel
neuronal, astrocitario y vascular. Por primera vez, en esta Tesis, en un modelo
experimental de Encefalopatía Hepática Mínima, se describen alteraciones
estructurales y funcionales en el hipocampo y en la corteza cerebral de animales con
de Hipertensión Portal Prehepática y Encefalopatía Hepática Mínima. A los 10 días de
la cirugía, el grupo de animales con Encefalopatía Hepática Mínima inducida por la
Ligadura Parcial de la Vena Porta cumple con las características principales de la
Encefalopatía Hepática de tipo B asociada con derivaciones porto-sistémicas sin
enfermedad hepatocelular intrínseca. Los hallazgos descriptos en esta Tesis Doctoral
sugieren que en la Encefalopatía Hepática Mínima inducida por la Ligadura Parcial de la
Vena Porta, existen alteraciones a nivel del Sistema Nervioso Central que son focales y
diferenciales según la zona afectada y que se encuentran asociadas con la
hiperamonemia moderada, característica principal de la Encefalopatía Hepática.
Comprender la patogénesis de la Encefalopatía Hepática Mínima proporcionaría un
marco teórico que aportaría a la comprensión de la fisiopatología de la Encefalopatía
Hepática con el fin de encontrar un marcador bioquímico precoz. Además aportaría en
gran medida al desarrollo de terapéuticas adecuadas para su diagnóstico y
tratamiento. ...ver más Tipo de documento: tesis doctoral | Formato: PDF (tamaño kb) Pag. 178 p. Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica Cohen, Melina Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica 2015-03-18 Temas: Ciencia de la vida - Virus de Epstein Barr - Linfoma difuso a grandes células B - Pediátricos - Adultos - Microambiente tumoral Descripción: La OMS en el 2008 incluyó una nueva entidad provisoria, el LDGCB EBV+ del adulto mayor, en pacientes mayores de 50 años inmunocompetentes, probablemente por la inmunosenescencia inherente al envejecimiento. Nuestro objetivo fue determinar la participación del virus de EBV en la patogénesis del LDGCB en pacientes pediátricos, adultos menores y mayores de 50 años de nuestro país, y caracterizar ciertos marcadores del microambiente tumoral. Se analizaron 102 casos de LDGCB. Se realizó hibridación in situ para EBERs e inmunohistoquímica para los antígenos virales y marcadores del microambiente tumoral. Se determinó la expresión relativa de transcriptos virales y de citoquinas y quimioquinas por PCR en tiempo real y se compararon los casos EBV+ y ? en los 3 grupos. El LDGCB EBV+ (con ?20% de células tumorales EBERs+) se vio en todos los grupos etarios y prevaleció el perfil de latencia II y III junto con perfil lítico. PD-1 prevaleció en todos los LDGCB, mientras que los casos EBV+ tuvieron un aumento significativo en la población de células citotóxicas GrB+ y una tendencia a una menor sobrevida libre de eventos. El virus cumpliría un rol en la patogénesis del LDGCB EBV+ en todos los grupos etarios. Este hallazgo avala la sugerencia de revisión del criterio de edad definido por la OMS. ...ver más Tipo de documento: tesis doctoral | Formato: PDF (tamaño kb) Pag. 150 p. Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica Yaneff, Agustín Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica 2015-03-03 Descripción: Dentro de las acuaporinas vegetales, las PIPs son una de las principales responsables del
intercambio eficiente de agua a través de la membrana plasmática (MP). Existe un subtipo - PIP1- que si bien se expresan ampliamente, su rol y propiedades restan de ser dilucidados, dado que no llegan a la MP salvo que se co-expresen junto con una PIP2. Nuestro trabajo fue demostrar que una PIP1 específica de fruto (Fragaria x ananassa, FaPIP1;1)- contribuye a modular la permeabilidad al agua de la membrana (Pf). Utilizando un modelo matemático aplicado a resultados de Pf obtenidos experimentalmente co-expresando FaPIP1;1 y FaPIP2;1 o una mutante de FaPIP2;1 en diferentes relaciones de masa se logró dilucidar la contribución individual de cada PIP a la Pf de la MP. Demostramos que: i) FaPIP1;1 tiene alta capacidad de transporte de agua; ii) la Pf de FaPIP2;1 aumenta al interaccionar físicamente con FaPIP1;1; iii) entre FaPIP1;1 y FaPIP2;1 se produce heterotetramerización aleatoria a partir de monómeros. Finalmente, caracterizamos la sensibilidad del gatillado dependiente de pH citosólico para ambas acuaporinas y cómo influye el estado de fosforilación de una Serina específica. Proponemos que existe una interacción entre los diferentes mecanismos de regulación que gobernarían la permeabilidad de una membrana que expresa ambas PIPs. ...ver más Tipo de documento: tesis doctoral | Formato: PDF (tamaño kb) Pag. 174 p. Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica Dominguez, Pía Guadalupe Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica 2014-11-19 Descripción: La familia de genes Asr (ABA, stress, ripening) está implicada en las vías de respuestas generales a estrés y en el control del transporte de hexosas. Para profundizar en el estudio funcional del parálogo ASR1 en Solanáceas, se evaluaron plantas de tabaco y tomate que sobreexpresan y silencian Asr1 desde una perspectiva metabólica, fisiológica y molecular. El estudio de las plantas de tabaco silenciadas mostró que tienen alteraciones en los niveles foliares de glucosa así como disminuciones en los niveles de expresión del transportador de hexosas Ht1. Asimismo, esas mismas plantas muestran modificaciones en los niveles de las hormonas ABA y giberelinas. Por el contrario, el principal efecto metabólico observado en los frutos de tomate es a nivel del metabolismo de los aminoácidos. Los niveles de expresión de los genes asociados a vías de respuesta frente a estrés en los frutos de las líneas silenciadas sugieren que ASR1 reprime esas vías en esos tejidos. Asimismo se encontraron evidencias que indican que ASR1 estaría relacionado con el metabolismo de la pared celular y con la vía de las citoquininas en los frutos de tomate. En conclusión, ASR1 está involucrado en el metabolismo primario, hormonal y en vías de respuesta a estrés en las Solanáceas estudiadas. ...ver más Tipo de documento: tesis doctoral | Formato: PDF (tamaño kb) Pag. 218 p. Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica Roca Acevedo, Gonzalo Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica 2015-04-07 Temas: Ciencia de la vida - Chagas - Triatoma Infestans - Entomotoxicología - Insecticidas - Triatoma Infestans - Insecticide - Toxicological profile - Chagas disease vector Descripción: La enfermedad de Chagas es una zoonosis transmitida al hombre
por Triatoma infestans, un insecto hematófago que se encuentra en
América Central y América del Sur. El control de este insecto depende
principalmente del uso de insecticidas. Sin embargo en lo últimos
años aumentó en Argentina y Bolivia los informes del fracaso de los
rociados con insecticidas asociados a resistencia a insecticidas
piretroides. Si bien existen algunos trabajos sobre expresión y
mecanismos de resistencia en ninfas de T. infestans, existen muy
pocos estudios sobre la expresión de la resistencia en huevos de
poblaciones resistentes, y no existe estudios sobre la expresión de la
resistencia a lo largo del desarrollo embrionario y sus posibles
causas.
El objetivo de este trabajo de tesis fue analizar la expresión de
resistencia a deltametrina en el huevo en desarrollo de dos
poblaciones de campo provenientes de Campo Largo-Argentina, y
Entre Ríos-Bolivia. Además analizar los mecanismos enzimáticos y
moleculares potencialmente asociados con la resistencia a
deltametrina durante el desarrollo embrionario.
Las ninfas de ambas poblaciones de campo mostraron niveles altos
de resistencia a deltametrina comparadas con la población
susceptible de referencia (Entre Ríos: 173x y Campo Largo: 1.108X)
Los grados de resistencia a deltametrina estimados para ambas
poblaciones resistentes en huevos de 4, 7 y 12 días de desarrollo,
indicaron que la resistencia se expresa desde el desarrollo temprano
en huevos de T. infestans, y que a lo largo de todo el desarrollo
embrionario los niveles de resistencia fueron mayores en Campo
Largo que en Entre Ríos (1.144x, 1.193x y 822x para Campo Largo y
21x, 15x y 39x para Entre Ríos).
Tanto para la población de referencia como para las poblaciones de
campo, la efectividad de la deltametrina fue menor en huevos de 12
días respecto a huevos de 4, y 7 días de desarrollo.
La actividad de las enzimas monooxigenasas P-450 no mostró
incremento significativo en las poblaciones resistentes. Este resultado
sugiere que no es un mecanismo contributivo a la resistencia a
deltametrina. O bien que la metodología empleada no permitió
detectar un incremento de alguna fracción de ese complejo
enzimático. La actividad de piretroide-esterasas mostró un
incremento durante el desarrollo embrionario de todas las
poblaciones estudiadas, siendo los valores más altos de actividad los
correspondientes a huevos de 12 días. La actividad promedio se
incrementó de 13,60 a 16,27, y a 22,21 picomoles de 7-
hidroxicumarina/minuto (7-OHC) en huevos de 4-, 7-, y 12 días de la
población de referencia. Los valores medios para las poblaciones
resistentes fueron de 16,17, 21,44 y 26,14 picomoles de 7-
OHC/minuto en el caso de Entre Ríos, y de 16,04, 17,98 y 28,87
picomoles de 7-OHC/minuto para la población Campo Largo en
huevos de 4-, 7- y 12 días respectivamente.
Los estudios moleculares detectaron la presencia de la mutación
kdr (knockdown resistance) L1014F en las dos poblaciones de campo,
indicando que el sitio de acción alterado es un mecanismo de
resistencia a deltametrina en las poblaciones de campo estudiadas.
La mutación kdr L925I descripta en otros hemípteros no fue
detectada en ninguna de las poblaciones estudiadas.
Los resultados de este trabajo de tesis, demuestran que la
resistencia a deltametrina expresada en huevos en desarrollo, se
deben en parte a la mayor actividad de las piretroide-esterasas y a
la modificación del sitio de acción. El avance del conocimiento sobre
los mecanismos de resistencia a insecticidas involucrados, permitirán
optimizar las campañas de control de T. infestans, vector de la
enfermedad de Chagas. ...ver más Tipo de documento: tesis doctoral | Formato: PDF (tamaño kb) Pag. 176 p. Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica Binaghi, María Julieta Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica 2014-12-10 Descripción: Se evaluó el aporte potencial de hierro, calcio y zinc en alimentos y/o dietas destinados a diferentes grupos vulnerables: niños entre 6 meses y 2 años, embarazadas y adultos mayores de contextos socioculturales diversos. Se analizaron dietas caseras, alimentos de planes sociales, alimentos comerciales y regionales y matrices alimentarias no tradicionales. El aporte potencial se calculó en base al contenido total y la dializabilidad mineral, evaluada mediante un método in vitro.
Se estudió el efecto de diversos promotores (ácidos cítrico y ascórbico, Na2EDTA) e inhibidores (fitatos, polifenoles, calcio, proteínas lácteas y oxalatos) y la efectividad de distintas fuentes de hierro (sulfato ferroso, bisglicinato férrico y NaFeEDTA).
El aporte potencial de los alimentos infantiles mostró diferencias significativas, debido a las interacciones en las diversas combinaciones estudiadas y con los promotores o inhibidores presentes. En los alimentos complementarios comerciales sería adecuada una reformulación. Los alimentos regionales aportan cantidades importantes de hierro y moderadas de zinc y calcio.
Las harinas de plátano verde y snacks resultaron pobres aportadores de minerales. En las infusiones de yerba mate la dializabilidad de hierro fue mínima pero el ácido ascórbico podría aumentarla.
Estos resultados aportarían una base apropiada para formular recomendaciones relativas a dietas de grupos vulnerables. ...ver más Tipo de documento: tesis doctoral | Formato: unknown (tamaño kb) Pag. 221 p. Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica Di Gregorio, Sabrina Noelia Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica 2015-03-10 Descripción: Staphylococcus aureus es un patógeno oportunista que causa enfermedad en el hombre y en los animales. Desde 1997 se han reportado a nivel mundial cepas de S. aureus con sensibilidad disminuida a vancomicina (VISA), y cepas con resistencia heterogénea (hVISA). El mecanismo responsable de dicha resistencia aún no ha sido completamente elucidado. Sumado a esto, la detección del fenotipo hVISA es dificultosa en laboratorios clínicos.
Este trabajo describe por primera vez la prevalencia y la caracterización molecular de aislamientos hVISA en un hospital de Argentina y evalúa distintas metodologías para su detección. Adicionalmente, se estudian las bases moleculares posiblemente implicadas en la susceptibilidad disminuida a vancomicina.
No se encontraron aislamientos VISA y el fenotipo hVISA ocurrió en el 3,3% de las bacteriemias por S. aureus estudiadas. Se encontró una asociación entre el fenotipo hVISA y episodios múltiples de bacteriemias, y se propuso la combinación de métodos para alertar de un posible hVISA en aquellos laboratorios en donde no se puede realizar la metodología confirmatoria de rutina.
La modificación en el metabolismo del peptidoglicano en cepas hVISA/VISA hallada en esta tesis podría deberse a diversos cambios genéticos. Asimismo se encontró un aumento de la transposición de IS256 asociado a dicho fenotipo. ...ver más Tipo de documento: tesis doctoral | Formato: PDF (tamaño kb) Pag. 165 p. Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica Scheps, Karen Gabriela 2015-04-29 Descripción: Se analizaron más de 700 muestras de pacientes con fenotipos hematológicos portadores de hemoglobinopatías estructurales, de talasemias menor, mayor y no transfusión dependiente.
Se actualizó la frecuencia de ?-talasemia en 417 familias: 9 mutaciones se describieron por primera vez en Argentina.
Se caracterizaron 5 mutaciones con fenotipo de talasemia dominante: Hb Durham-N.C., y 4 nóveles: Hbs Tavapy(HBB:c.182_187delCTCATG), JC-Paz(HBB:c.34_42delGTTACTGCC), Wilde (HBB:c.270_273delTGAG) y Patagonia(HBB:c.296_297dupGT).
Las deleciones son las mutaciones ?-talasémicas más frecuentes (-?3,7, --MEDI, --CAL/CAMP y ?SEA). Se detectaron 3 deleciones nóveles: --BA, --PA y --LU, esta última en un paciente con retraso mental y rasgos de ATR-16. Se caracterizaron mutaciones puntuales, 3 nóveles: HBA1:c.301-2A>T, HBA1:c.187delG(p.W62fsX66) y HBA1:c.237delC(p.Asn78Lysfs*6).
La Hb S fue la hemoglobinopatía estructural prevalente y en forma esporádica se detectaron hemoglobinas inestables, con afinidad aumentada por el oxígeno y metahemoglobinas.
Se hicieron estudios de asociación genotipo-fenotipo para marcadores asociados a variación de Hb F.
En pacientes con talasemia intermedia, se estudiaron modificadores primarios, secundarios y terciarios. Se detectaron 2 duplicaciones del cluster de ?-globina, una caracterizada por array-CGH, ((arrChr16(16p13.3; 88165- 230724)x3).
Se confeccionaron perfiles genotipo-fenotipo, y algoritmos de trabajo para la caracterización molecular.
Se espera que estos conocimientos sean en beneficio de las familias afectadas. ...ver más Tipo de documento: tesis doctoral | Formato: PDF (tamaño kb) Pag. 295 p. Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica Spiaggi, Alejandro Javier Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica 2014-10-29 Descripción: La Na+/K+-ATPasa es una enzima multimérica integral de la membrana plasmática de células animales. Su función es catalizar el trasporte activo de tres iones Na+ desde el citoplasma hacia el medio extracelular y de dos iones K+ en sentido inverso, empleando la energía proveniente de la hidrólisis de una molécula de ATP. Como consecuencia de su actividad, la Na+/K+ ATPasa juega un papel esencial en la homeostasis celular y diversos procesos de transporte.
Durante su funcionamiento la enzima alterna entre dos conformaciones (E1 y E2) que exponen sitios de unión hacia los lados intracelular y extracelular de la membrana, respectivamente, y que difieren en su afinidad por el Na+ y el K+. El transporte de los iones requiere que en algún momento éstos se encuentren ?ocluidos?, es decir, que sean inaccesibles desde ambos lados de la membrana. La liberación del K+ ocluido en E2 es el paso limitante del ciclo de reacciones, y es acelerada marcadamente por la unión de ATP a un sitio de baja afinidad, sin ser hidrolizado.
La acción moduladora del ATP sobre la desoclusión de K+ ha sido extensamente estudiada, aunque en condiciones experimentales dispares. Por otro lado, se cuenta con información escasa y contradictoria sobre el efecto del nucleótido sobre la reacción inversa, que conduce a la oclusión de K+ a través de la llamada ruta directa, ya que la elevada velocidad de las reacciones involucradas limita el espectro de técnicas aplicables a su estudio. Como consecuencia, no se han propuesto modelos cinéticos detallados que expliquen de forma integral cómo el ATP ejerce sus efectos modulatorios, y que contribuyan a describir los pasos involucrados en el transporte de K+ en presencia del nucleótido.
Con el objeto de resolver esa falencia, en este trabajo nos hemos propuesto caracterizar cinéticamente tanto la desoclusión de Rb+ (uncongénere del K+) comosu oclusión a través de la ruta directa, en un amplio intervalo de concentraciones de Rb+ y de ATP. Para ello se empleó una técnica desarrollada en nuestro laboratorio que permite el estudio de reacciones en el rango de los milisegundos. Los experimentos mencionados se complementaron con el análisis de las modificaciones que el ATP induce en la cantidad de Rb+ ocluido en condiciones de equilibrio.
Los resultados mostraron que el ATP cambia de hiperbólica a sigmoide la curva de Rb+ ocluido en el equilibrio versus , induciendo a su vez una disminución de la afinidad aparente por el catión sin alterar la capacidad de oclusión de la Na+/K+ ATPasa. La cantidad de Rb+ ocluido extrapolada a una concentración infinita del catión correspondió a 2 moles de Rb+ por mol de enzima activa independientemente de la concentración de ATP.
Las curvas de incremento en el tiempo de la cantidad de Rb+ ocluido, tanto en presencia de ATP como en su ausencia, presentaron dos fases mayoritarias y alcanzaron un valor de equilibrio en aproximadamente un minuto. De dichas fases, la más rápida fue la de mayor amplitud, siendo esto más marcado en medios de reacción con ATP, y estuvo asociada a la oclusión de más de un Rb+. El nucleótido produjo una disminución o un aumento de la velocidad inicial de oclusión cuando la concentración de Rb+ fue menor o mayor que 500 ?M, respectivamente. No obstante, en todos los casos la velocidad de la segunda fase de oclusión fue mayor en presencia de ATP.
La desoclusión de Rb+ en ausencia de ATP se produjo a lo largo de curvas bifásicas de amplitudes similares, compatibles con una liberación secuencial y ordenada de los cationes. El ATP hizo que se perdiera esa secuencialidad y que ambos cationes fueran liberados rápidamente, independientemente del sitio de oclusión que ocupaban. Se consiguió una adecuada descripción de la información experimental con un modelo que propone que la oclusión del Rb+ puede ocurrir desde accesos intra o extracelulares. En el primer caso la unión a los sitios ocurre al azar, mientras que en el segundo es secuencial y ordenada existiendo un paso lento entre la unión de ambos cationes. La unión de ATP a la enzima promueve el cambio conformacional E2 ? E1, desfavoreciendo la oclusión y favoreciendo la desoclusión de Rb+. ...ver más Tipo de documento: tesis doctoral | Formato: PDF (tamaño kb) Pag. 234 p. Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica Alechine, Evguenia Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica 2014-12-10 Descripción: El estudio de microdeleciones en la región AZF del cromosoma Y se solicita de rutina a pacientes azoospérmicos u oligozoospérmicos severos, para predecir la recuperación de espermatozoides mediante biopsia testicular. En distintas poblaciones se ha demostrado variación en la prevalencia y efecto de estas microdeleciones. Con el objetivo de estudiar a la población argentina, se analizaron 240 hombres fértiles del haplogrupo Q3, 170 pacientes infértiles y 90 azoospérmicos. A partir de los resultados obtenidos, se descartaron deleciones constitutivas en el haplogrupo Q3, así como la asociación entre deleciones parciales y disminución del recuento espermático. Se observó una prevalencia del 11,1% de microdeleciones completas que se correlacionaron con alteraciones severas del recuento espermático, independientemente del haplogrupo del paciente. Sin embargo, las deleciones parciales se correlacionaron con determinados haplogrupos sin efecto patogénico. Únicamente las deleciones AZFbc y AZFabc presentaron ausencia de espermatozoides a nivel testicular. La existencia de pacientes azoospérmicos sin deleciones indicaría que existen otros factores que afectan la espermatogénesis. Dado que no es posible predecir la recuperación de espermatozoides empleando únicamente los marcadores recomendados, el presente trabajo culminó con el desarrollo de una herramienta para la detección de genes candidatos de la espermatogénesis. La identificación de nuevos marcadores permitirá tomar decisiones clínicas apropiadas y asesorar genéticamente a la pareja infértil. ...ver más Tipo de documento: tesis doctoral | Formato: unknown (tamaño kb) Pag. 202 p. Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica Cutrullis, Romina Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica 2015-10-13 Descripción: La enfermedad de Chagas, causada por el parásito Trypanosoma cruzi, se caracteriza por una intensa miocardiopatía inflamatoria, cuya fisiopatogenia aún no se conoce acabadamente.
Nuestro objetivo fue examinar la contribución de distintos mediadores inflamatorios a la inmunopatogénesis de la miocardiopatía chagásica y evaluar el efecto modulador que el tratamiento etiológico con benznidazol pudiera ejercer sobre estos mediadores y la patología inflamatoria. Estudiamos factores potenciales de patogenia chagásica inexplorados, como la citoquina proinflamatoria MIF, analizando su relevancia biológica en el modelo animal y en pacientes infectados con distinto grado de compromiso cardíaco.
Los resultados obtenidos indican que las citoquinas y quimioquinas proinflamatorias y sus receptores específicos participan en los mecanismos inmunopatogénicos de la miocardiopatía chagásica crónica. Particularmente, destacamos el rol de MIF que, más allá de resultar fundamental para la protección en la etapa aguda de la infección por T. cruzi, mediante su persistente inducción se asocia con la evolución hacia las formas más severas de disfunción cardíaca por enfermedad de Chagas. El potencial inmunomodulador del tratamiento con benznidazol durante la fase crónica podría ayudar a equilibrar los niveles de MIF y la patología inflamatoria en esta etapa de la infección, limitando así el riesgo de daño cardiovascular a largo plazo. ...ver más Tipo de documento: tesis doctoral | Formato: PDF (tamaño kb) Pag. 162 p. Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica Vidueiros, Silvina Mariela Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica 2015-07-14 Descripción: Frente a la posibilidad de que la quinoa (Chenopodium quinoa Willd) vuelva a ser un cultivo de importancia para pequeños agricultores, se propuso realizar la caracterización nutricional del germoplasma nativo de quinoa del Noroeste Argentino y analizar el efecto provocado por el consumo de quinoa sobre el estado nutricional a través del estudio de la composición corporal y ciertos parámetros inmunológicos de utilidad en estudios de nutrición, en modelo experimental, diferenciando el efecto de la quinoa como fuente proteica per se del efecto de la presencia de saponinas en la misma. Las propiedades nutricionales de las diferentes poblaciones nativas de quinoa mostraron un amplio rango de variación y fueron similares, al igual que la calidad proteica, a las de la quinoa cultivada en otros países de Latinoamérica, aportando datos nacionales para las tablas de composición de alimentos. La administración de dieta a base de quinoa con saponinas impactó negativamente en el consumo de dieta, provocó retraso en el crecimiento y alteración de la composición corporal de ratas al destete. Asimismo, tendría efecto sobre la respuesta inflamatoria a nivel intestinal con aumento de células goblets e interleuquina 17 en la vellosidad. La administración de dieta a base de quinoa desaponificada, como única fuente proteica, provocó menor crecimiento de los animales, disminución de los compartimentos corporales y tendencia a menor IgA total en fluidos biológicos respecto a los que recibieron dieta a base de caseína. ...ver más Tipo de documento: tesis doctoral | Formato: unknown (tamaño kb) Pag. 254 p. Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica Romano, Raquel Susana Renée Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica 2013-07-12 Temas: Ciencia de la vida - Vinos - Monovarietal - Flora autóctona - Cromatografía gaseosa - Terroir Descripción: A medida que avanzan los conocimientos y la competencia en el mercado internacional de vinos, aumentan las exigencias en cuanto a la certificación de la calidad de los mismos. En la actualidad, a nivel internacional no solo se exige que el vino sea elaborado exclusivamente a partir del jugo de uva fermentado, sino que se incluye dentro de esta exigencia los conceptos de certificación varietal y certificación del origen geográfico y cobra mayor importancia determinar si el ?Terroir? de los vinos le otorga características especiales que los distinga de otros vinos del mismo cultivar provenientes de otras zonas geográficas. Por estas razones es necesario establecer procedimientos analíticos de clasificación, diferenciación varietal y geográfica, no solo para la defensa de las exportaciones sino también para proteger las transacciones de los productores de uvas ante los elaboradores de vinos. En la presente tesis se logró optimizar un método de extracción, concentración y cuantificación mediante cromatografía gaseosa, de 73 componentes volátiles que forman parte de los aromas del vino. La caracterización analítica del perfil aromático de los vinos permitió determinar no solo componentes volátiles mayoritarios que inciden directamente sobre la percepción de los aromas de los vinos sino aquellos que se encuentran por debajo del umbral de percepción y que inciden en la percepción global de los aromas del vino diferenciándolos no solo en cuanto a su pertenencia varietal, sino también a su procedencia geográfica.
Para obtener un sistema de clasificación varietal y de procedencia geográfica de los vinos blancos se trabajó sobre muestras de vino microvinificados en idénticas condiciones de maceración en frío y fermentación alcohólica de uvas provenientes de cepajes Chardonnay, Sauvignon blanc, Cereza y Torrontés riojano, de las zonas geográficas Mendoza, Valle de Uco, Zona Este, y La Rioja para la construcción del banco de datos de vinos de variedad y origen indudable.
Se contrastaron con 25 muestras comerciales de diferentes variedades y zonas geográficas referidas en sus etiquetas. Mediante análisis estadístico discriminante se logró la clasificación varietal y predicción de muestras de vinos blancos comerciales y su correspondencia con la variedad indicada en sus etiquetas. Las muestras microvinificadas clasificaron el 100 % y de las muestras de vinos comerciales, el 90 % clasificaron correctamente según la variedad declarada en sus etiquetas. Respecto del estudio para establecer la posible clasificación y predicción del origen geográfico, mediante análisis discriminante se comprobó que los vinos pudieron ser diferenciados entre las provincias de Mendoza y La Rioja. Dentro de la Provincia de Mendoza se diferenciaron 3 áreas geográficas (agrupados en Zona Mendoza, Valle de Uco y Zona Este) con el 100 % de vinos de referencia correctamente clasificados. Para demostrar la influencia del ?Terroir?, es decir si los vinos de una zona en particular fueron únicos, e incapaces de ser reproducidos en otro lugar, aun cuando la variedad y técnica de elaboración se repitan con exactitud, se realizaron estudios individuales sobre las variedades (Torrontés riojano, Chardonnay y Sauvignon blanc) implantadas en la provincia de Mendoza (Zona Este, Valle de Uco) y en La Rioja utilizando la misma metodología analítica y estadística, obteniendo como resultado que 19 componentes volátiles, que conforman un ?Terroir?, tienen una influencia determinante en la tipicidad de los vinos, a través de aromas que pueden o no ser percibidos aun cuando la variedad cultivada sea la misma. Mediante este estudio se posibilita la obtención de un sistema analítico y estadístico confiable para la aplicación de la ley de Denominación de Origen, en sus artículos referidos a Indicaciones de Procedencia (IP), Indicaciones Geográficas (IG) y Denominación de Origen Controlada (DOC)
Como consecuencia del estudio anterior, se encontraron en vinos cinco componentes: trans-Anetol, p-Anisaldehído, Timol, Carvacrol y Mentol, que no tienen registradas rutas metabólicas en vinos y se los relacionó con la flora autóctona como fuente externa de procedencia. Los mismos fueron encontrados en las diferentes partes de las jarillas en altas concentraciones superando ampliamente el OAV, es decir, tienen un alto impacto odorífero ambiental. Se pudo comprobar que algunos de los compuestos volátiles que diferenciaron zonas geográficas fueron absorbidos a través de las raíces de las vides con una permanencia disímil durante 4 semanas en las partes verdes de las plantas. Se verificó la existencia en la pruina de las bayas, aunque en diferentes concentraciones, de los 5 compuestos, coincidiendo sus abundancias relativas a la mayor densidad arbustiva de las jarillas. Por medio del estudio de conglomerados se observó una relación jerárquica entre las jarillas, los viñedos, las pruinas y los vinos en cuanto a la composición y concentración de compuestos aromáticos presentes en todos ellos, existiendo además, una fuerte relación entre los compuestos hallados en vinos y pruinas con las hojas, raíces y polen de jarillas llegando a los viñedos a través del polen y sus frutos para ser luego absorbidos por raíces de las vides y también por adsorción sobre las pruinas para llegar finalmente a los vinos. Por lo que se concluye que existe una unidad de ecosistema interactivo por el traslado a través del viento del polen y sus frutos hacia la zona geográfica de influencia.
Finalmente se concluye que el paisaje, entendido en este trabajo como la flora autóctona y específicamente las jarillas, integran un ?Terroir?, mediante interacciones con los viñedos a través de intercambios, contribuyendo junto con el resto de otras variables que definen un ?Terroir?, a la obtención de vinos que sean únicos e irrepetibles aun cuando la variedad de origen sea la misma. ...ver más Tipo de documento: tesis doctoral | Formato: PDF (tamaño kb) Pag. 375 p. Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica Alvarado, Cecilia Viviana Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica 2014-09-09 Descripción: RAC3 es un coactivador de la transcripción de ciertos factores y receptores nucleares que colabora en la actividad biológica de estas moléculas facilitando la expresión génica. Originalmente fue descripto como específico de receptores de hormonas esteroideas, con actividad acetilasa de histonas y la capacidad de remodelar la cromatina facilitando la expresión de genes blanco de estas hormonas. Se lo encontró sobre-expresado en tumores dependientes de las mismas y por esta razón se lo asoció a tumorigénesis hormono-dependiente. Sin embargo, años más tarde, nuestro grupo y otros investigadores hemos demostrado que RAC3 es un coactivador para otros factores de transcripción y tiene además otras funciones a nivel citoplasmático por las cuales contribuye al desarrollo tumoral de una gran variedad de tumores dependientes o no de hormonas, por lo cual hoy día se define como un oncogén. Hemos demostrado previamente que RAC3 es un coactivador de NF-?B, aumentando su actividad transcripcional, así como la expresión de algunos de sus genes blanco. Muchos de estos genes están vinculados a la respuesta inflamatoria, así como al control de ciclo celular, proliferación, expresión de moléculas de adhesión y otros responsables de la supervivencia celular, todos ellos a su vez relacionados con el proceso de tumorigénesis. Estos hallazgos motivaron la búsqueda de niveles elevados de RAC3 en otros tumores no específicamente respondedores a hormonas esteroideas y hoy día se sabe de su alto título en una gran variedad de tumores como el de hígado, páncreas, estómago y la lista crece. También demostramos que su sobre-expresión contribuye al desarrollo tumoral inhibiendo la apoptosis inducida por vía de membrana y mitocondrial, en células tumorales y no tumorales. Su acción protectora de la supervivencia se debía no solo a su actividad remodeladora de la cromatina aumentando la expresión de genes anti-apoptóticos, sino también a acciones citoplasmáticas como la regulación de actividad de kinasas y el transporte de moléculas como AIF desde la mitocondria hasta el núcleo celular, demorando su ingreso a núcleo por asociación con la maquinaria motora de citoesqueleto. A diferencia de otros oncogenes conocidos, en el caso de RAC3, su rol oncogénico no depende de la expresión de variantes por mutación, sino que, la sola sobre-expresión es suficiente. Consecuentemente, su expresión en células normales, no tumorales, es limitante y en ocasiones indetectable por técnicas habituales de determinación de proteínas. Sin embargo, sus altos niveles de expresión en tumores, en la mayoría de los casos no se debe a amplificación génica y los mecanismos que controlan su expresión aún no han sido esclarecidos. En este trabajo de tesis, se investigaron los posibles mecanismos responsables del aumento en los niveles de expresión de RAC3. Demostramos que la respuesta inflamatoria inducida por administración de LPS in vivo en ratones produce el aumento en los niveles de RAC3 en bazo y que ésto ocurre a nivel transcripcional, lo cual, además y como era esperado, fue antagonizado por glucocorticoides, dada su conocida acción anti-inflamatoria. Resultados similares fueron obtenidos in vitro por tratamiento de la línea celular HEK293 con TNF (una de las citoquinas inflamatorias inducidas por LPS in vivo). Se realizó una búsqueda de posibles secuencias regulatorias de la expresión génica de RAC3 en su promotor y encontramos sitios de unión para NF-?B, pero no para GR. Clonamos un fragmento de promotor conteniendo estas secuencias y por ingeniería genética diseñamos un plásmido en el que el promotor de RAC3 fue subclonado río arriba del gen reportero de Luciferasa. A través de estudios in vitro, por ensayos reporteros en células transfectadas con esta construcción, demostramos que TNF o una sobre-expresión de Rel-A (uno de los componentes del dímero de NF-?B) activa el promotor de RAC3. Por ensayos de inmunoprecipitación de la cromatina, confirmamos que los sitios de unión para NF-?B en el promotor de RAC3 son funcionales y que, efectivamente, la activación de la expresión génica de RAC3 inducida por la respuesta inflamatoria ocurre a través de estas secuencias que unen NF-?B. De acuerdo con las evidencias previas de inhibición de la apoptosis por una sobre-expresión de RAC3, se investigó además su posible rol en autofagia, cuyo rol en tumorigénesis es dual. En principio, el proceso opera con el objeto de eliminar desde moléculas mal plegadas hasta organelas dañadas y de este modo preservar la supervivencia celular, sin embargo, cuando ocurre de modo exacerbado puede llevar a la muerte celular. En situaciones de estrés, ayuno o falta de oxígeno a los cuales la vía de señales dependiente de mTOR es sensible, se activa la autofagia con el objeto de obtener energía para la supervivencia celular a partir del reciclado de moléculas propias. Esto es precisamente lo que les ocurre a las células menos expuestas en una masa tumoral. En estos estudios demostramos que RAC3 tiene un rol protector de autofagia inducida tanto por ayuno como por inhibición de la vía mTOR por Rapamicina. Demostramos además, que la hipoxia inhibe la expresión de RAC3 generando un ambiente permisivo para que la autofagia ocurra, permitiendo la supervivencia tumoral. Los resultados obtenidos en este trabajo de tesis, demuestran que la participación de RAC3 como regulador de la autofagia es un mecanismo adicional a los ya descriptos por los cuales promueve tumorigénesis y el microambiente inflamatorio tumoral podría contribuir en la regulación de la expresión de RAC3 y su acción oncogénica. ...ver más Tipo de documento: tesis doctoral | Formato: PDF (tamaño kb) Pag. 236 p. Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica Buendía Rodríguez, Jefferson Antonio Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica 2015-02-24 Descripción: Introducción: Existe escasa evidencia respecto al efecto combinatorio y a largo plazo del polimorfismo en el intrón 3 de la isoforma CYP3A5 6986G>A en la farmacocinética del TAC en pacientes trasplantados hepáticos. El objetivo de este trabajo fue caracterizar distintas variables genéticas y clínicas asociadas a la variabilidad farmacocinética/farmacodinámica del Tacrolimus en pacientes postrasplante hepático en población argentina.
Métodos: Se evaluó la correlación entre el polimorfismo en el intrón 3 de la isoforma CYP3A5 6986G>A y los niveles de TAC y TAC XL en sangre de pacientes 24 adultos trasplantados hepáticos estables y 77 pacientes pediátricos trasplantados hepáticos durante un periodo de 2 años.
Resultados: Se encontró una frecuencia de expresores (CYP3A5*1) entre el 17% al 37% .El genotipo CYP3A5 del receptor juega un papel más importante en la Co/dosis en etapas tempranas, mientras la importancia genotipo del donante se incrementa con el tiempo postrasplante.
Conclusión: El papel que juega cada polimorfismo es distinto según avanzan los días luego del trasplante y deben ser tenidos en cuenta con el fin de optimizar los beneficios del TAC durante la fase de inducción y mantenimiento postrasplante. ...ver más Tipo de documento: tesis doctoral | Formato: PDF (tamaño kb) Pag. 93 p. Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica Boado, Lorena Analía Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica 2014-12-16 Descripción: El virus de influenza, que causa infecciones epidémicas en el hombre y diversas especies de
animales susceptibles, evoluciona continuamente por la acumulación de mutaciones puntuales, así
como por el intercambio de segmentos genómicos entre distintas cepas. Las vacunas antigripales
estacionales en uso actualmente para la prevención son eficaces para neutralizar una infección
con cepas homólogas, pero su capacidad de cobertura heterosubtípica es variable o nula. El
presente trabajo está orientado a desarrollar, por un lado, vacunas antigripales de nueva
generación, a través de la expresión de la proteína inmunodominante hemaglutinina por
tecnología de ADN recombinante, en un sistema de expresión eucariota (baculovirus/ células de
insectos). Por otro lado, se propone la generación de una vacuna ?universal? de amplio espectro
de protección a través de dirigir la respuesta inmune del huésped hacia regiones más conservadas
del virus. En este sentido, se ha buscado en la segunda parte de este trabajo lograr una vacuna de
más amplia cobertura basada en las proteínas internas del virus, en particular en la proteína de
matriz M2 y en la nucleoproteína. Se demuestra que las vacunas experimentales basadas en el
ectodominio de M2 pueden inducir inmunidad humoral o celular capaces de proteger animales
vacunados de una descarga de dosis letal de virus de influenza. ...ver más Tipo de documento: tesis doctoral | Formato: PDF (tamaño kb) Pag. 174 p. Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica Cura, Carolina Inés Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica 2014-09-25 Temas: Ciencia de la vida - Trypanosoma cruzi - Unidades discretas de tipificación - PCR - Enfermedad de Chagas Descripción: La infección por el parásito Trypanosoma cruzi, causante de la enfermedad de Chagas, es un importante problema de salud pública, principalmente en los países endémicos de América. Con una prevalencia estimada de 8 millones de personas infectadas, esta enfermedad muestra un curso clínico variable, desde asintomática hasta fases crónicas con manifestaciones clínicas. Las poblaciones naturales de T. cruzi están compuestas por clones múltiples, distribuidos en seis unidades discretas de tipificación (UDTs TcI-TcVI), de diferente distribución geográfica y circulación en los ciclos de transmisión. La relación entre las UDTs y los diferentes patrones de infectividad y patogenicidad, susceptibilidad a agentes quimioterapéuticos y manifestaciones clínicas, es actualmente sujeto de estudio. Se han desarrollado numerosos esquemas de tipificación de UDTs, con mayor o menor grado de complejidad y sensibilidad analítica, aunque no se ha definido aún un método certero de referencia. Con el objetivo de desarrollar un esquema sencillo de tipificación molecular, que involucre el menor número posible de reacciones de PCR secuenciales, en este trabajo de Tesis se han desarrollado y validado estrategias de PCR en tiempo real multiplex con sondas TaqMan, basadas en la detección de genes polimórficos nucleares y mitocondriales del parásito, que permitieron la caracterización de las seis UDTs de T. cruzi de manera altamente específica. El método desarrollado evidenció una sensibilidad analítica comparable a la del algoritmo de tipificación por PCR convencional utilizado en nuestro laboratorio, siendo capaz de caracterizar correctamente al 100% de las cepas de referencia de T. cruzi y a un elevado porcentaje de las muestras biológicas analizadas. El esquema de PCR TaqMan identificó más eficientemente a las UDTs presentes en muestras con elevada carga parasitaria, derivadas de triatominos, reservorios, pacientes con infección aguda o congénita, o con reactivación de la enfermedad de Chagas, mientras que evidenció limitaciones en la tipificación de muestras provenientes de pacientes crónicos. Una de las estrategias del nuevo algoritmo fue adaptada para la cuantificación de ADN genómico o carga parasitaria en forma específica de UDT. Por otro lado, se ha diseñado y validado una metodología de PCR en tiempo real dúplex para el diagnóstico diferencial de T. cruzi y T. rangeli, potencialmente aplicable en las regiones co-endémicas para ambos tripanosomátidos. Las nuevas metodologías de PCR en tiempo real, como así también las estrategias tradicionales de PCR convencional, fueron aplicadas en la caracterización de las UDTs de T. cruzi y en el diagnóstico diferencial con T. rangeli en distintos escenarios eco-epidemiológicos y clínicos de las regiones endémicas.
Por otra parte, se realizó un estudio sobre la diversidad genética dentro de las Udas TcI y TcIII. En este sentido, y en base a estudios previos realizados en Colombia utilizando la secuencia intergénica del miniexón (SL-IR), se extendió la caracterización de los genotipos de TcI a muestras procedentes de trece países del continente americano. El aporte principal del trabajo consistió en la identificación de un nuevo grupo de genotipos, no descripto hasta el momento, TcIe, y la realización de un análisis detallado de la distribución de los grupos TcIa-TcIe en los diferentes ciclos de transmisión y regiones geográficas. El estudio de aislamientos y clones de TcIII confirmó la variabilidad de secuencia en el gen multicopia SL-IR dentro del genoma de T. cruzi. ...ver más Tipo de documento: tesis doctoral | Formato: PDF (tamaño kb) Pag. 240 p. Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica Pérez, Sebastián Ezequiel Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica 2015-10-22 Descripción: El silenciamiento de genes por interferencia con ARN (iRNA) es un mecanismo específico que puede ser mediado por la administración de pequeños ARN de interferencia (siRNA) sintéticos. El objetivo del presente trabajo fue tomar como ventajas la biocompatibilidad y propiedades fisicoquímicas de la fosfatidilcolina (PC) y las sales biliares para el desarrollo, optimización, caracterización y evaluación in vitro de nanotransportadores basados en PC para la vehiculización de siRNA en células MCF-7 de cáncer de mama y células normales MDCK.
Lipoplexos formulados en distintas condiciones fueron capaces de unir siRNA y vehiculizarlo eficientemente a las células, sin presentar signos de citotoxicidad. Su caracterización fisicoquímica exhibió partículas de tamaño nanométrico y morfología pH-dependiente, aunque de escasa estabilidad física. Se optimizaron, entonces, sistemas mixtos compuestos por PC y sales biliares, obteniéndose vehículos de baja citotoxicidad, alta capacidad de unión de siRNA y eficiencia de transfección / silenciamiento. Se observaron partículas menores a 150 nm que mediante evaluaciones fisicoquímicas se describieron como pequeñas vesículas unilamelares o sistemas micelares mixtos, dependiendo de la composición del vehículo y el medio de formulación, lo que las haría adecuadas para posteriores evaluaciones in vivo. Ensayos preliminares también sugieren su uso promisorio para vehiculización de DNA plasmídico.
...ver más Tipo de documento: tesis doctoral | Formato: PDF (tamaño kb) Pag. 236 p. Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica Pellegrino, Néstor Raúl Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica 2015-03-30 Temas: Ciencia de la vida - Alimentos - Fortificación - Tercera edad - Vitaminas A, D, E - Ácidos grasos esenciales - Adultos mayores Descripción: Se diseñó y elaboró un alimento para individuos de mayor edad, teniendo en cuenta el aporte, de energía y el incremento de proteínas, ácidos grasos esenciales y vitaminas A, D y E. Se evaluó el impacto biológico del producto elaborado en modelos experimentales y sus características sensoriales y aceptabilidad
Materiales y métodos: Se elaboró un budín, utilizando harinas de trigo, lino y soja semi desengrasadas, aceites de maíz y oliva, mantequilla, ovoalbúmina, azúcar y una mezcla de vitaminas A, D y E. Se determinó: composición centesimal (AOAC), ácidos grasos (CG), vitaminas A y E (HPLC). La evaluación biológica en relación a proteínas, vitaminas A, D y E se realizó en modelos experimentales en ratas. Ensayos sensoriales: Análisis Descriptivo Cuantitativo (QDA) y Aceptabilidad por parte de los consumidores. Resultados: una porción de 120 g aporta 24 % de los requerimientos energéticos, 9.4 g de PUFA (4.5% de las calorías totales, relación ?3/?6 de 1/7), 38 % de los requerimientos de proteínas, 75 % de la IR de vitamina A y 100 % y de vitaminas D y E. El modelo experimental comprobó la eficiencia biológica de la fortificación con las 3 vitaminas. Los descriptores significativos del QDA y los datos de aceptabilidad por los consumidores fueron satisfactorios. Conclusiones: el alimento incrementó el aporte de proteínas, fibra, ácidos grasos esenciales, vitaminas A, D y E, resultando sensorialmente aceptable. ...ver más Tipo de documento: tesis doctoral | Formato: PDF (tamaño kb) Pag. 204 p. Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica Fabian, Lucas Emanuel 2015-05-05 Descripción: Las quinoxalinas constituyen un sistema heterocíclico presente en numerosos compuestos con demostrada y variada actividad biológica.
Con el fin de contribuir al diseño de nuevos compuestos con potencial actividad anti-HIV y/o antichagásica, ya sea a través su acción inhibitoria sobre la transcriptasa reversa del virus de la inmunodeficiencia humana o su inhibición de la cruzipaína, enzima esencial para el desarrollo del ciclo de vida del Trypanosoma cruzi, en este trabajo de Tesis Doctoral de han empleado varias estrategias de diseño de fármacos asistido por computadora para diseñar posibles inhibidores de los mencionados sistemas enzimáticos con estructura quinoxalínica.
A partir de los resultados alcanzados mediante el diseño de novo o a través del cribado virtual se propusieron un total de 25 compuestos quinoxalínicos que podrían resultar inhibidores de la transcripsa reversa y/o de la cruzipaína. Estos compuestos fueron sintetizados empleando algunas metodologías habituales para la síntesis de quinoxalinas a las cuales se les introdujeron modificaciones que permitieran su optimización, tales como el empleo de radiación microondas como fuente de energía. De esta manera se aporta una ruta sintética lineal, sencilla y eficiente para la obtención de 29 compuestos quinoxalínicos, muchos de ellos no descriptos previamente en la bibliografía.
Se iniciaron los estudios de la potencial actividad antichagásica de los compuestos diseñados y sintetizados dejando planteada la posibilidad de que ensayos posteriores contribuyan a demostrar la actividad de los mismos y la utilidad de los métodos computacionales en el diseño de nuevos compuestos quinoxalínicos activos. ...ver más Tipo de documento: tesis doctoral | Formato: PDF (tamaño kb) Pag. 172 p. Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica Losinno, Antonella Denise Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica 2015-03-30 Temas: Ciencia de la vida - Roedores - Animales - Testículos - Células mioides peritubulares - Células MP - Fisiología Descripción: Las células mioides peritubulares (células MP) se encuentran en la pared del túbulo
seminífero (TS) y participan en su contracción. Poseen un citoesqueleto particular, organizado en
dos capas independientes: una capa interna y otra externa con miofilamentos perpendiculares y
paralelos al eje del TS, respectivamente. Esto difiere de la malla ortogonal de filamentos
propuesta anteriormente para las células MP. Por ello, en animales adultos se evaluó además de la
organización del citoesqueleto, la distribución de otras estructuras y proteínas implicadas en la
contracción. Se analizaron los efectos del estímulo con endotelina-1 sobre el TS, especialmente en
la célula MP. En el desarrollo testicular postnatal, se evaluó la maduración de este citoesqueleto y
el inicio de la respuesta contráctil. Por diferentes microscopios se observó que la célula MP a
pesar de ser plana dispone de una maquinaria altamente organizada, con estructuras como caveolas
y receptores de endotelina-1 orientadas según las dos capas de miofilamentos que coexisten en la
misma célula y que le permite contraerse en dos direcciones. En el desarrollo la organización de
los filamentos cambia según progresa la espermatogénesis. Las dos capas no aparecen
simultáneamente. Aún con una capa la célula MP se contrae pero de una manera diferente ...ver más Tipo de documento: tesis doctoral | Formato: unknown (tamaño kb) Pag. 121 p. Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica Denoya, Gabriela Inés Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica 2015-07-07 Temas: Ciencia de la vida - Altas presiones hidrostáticas - Durazno - Procesamiento mínimo - Vida útil - Textura - Enzimas Descripción: Los consumidores demandan frutas mínimamente procesadas libres de aditivos y con apariencia fresca. Sin embargo, el daño provocado por el procesamiento a los tejidos acorta su vida útil. El presente trabajo se realizó con la finalidad de estudiar el efecto de las Altas Presiones Hidrostáticas (APH) para preservar duraznos mínimamente procesados. Cubos/cilindros de durazno fueron procesados combinando inmersión en solución de ácidos orgánicos, envasado al vacío y tratamiento por APH a temperatura ambiente. Se optimizaron las condiciones del tratamiento, determinándose que con 600MPa-5min se lograba la mayor inactivación de enzimas, con la mínima alteración de la textura y el color. También se estudió la importancia de seleccionar como materia prima variedades con baja actividad de la polifenoloxidasa, para controlar el pardeamiento enzimático del producto. Se encontró que en los duraznos presurizados se mantienen activos ciertos procesos bioquímicos (expresión y actividad de enzimas) y aunque se modifican algunas características de los tejidos vivos, el producto final mantiene la apariencia, textura y flavor de la fruta fresca. Finalmente, se determinó que la temperatura óptima de conservación es de 4°C, pudiendo mantenerse el producto sin deterioro microbiológico ni sensorial por 42 días. Notablemente, a 20°C el producto podría ser conservado con calidad comercial adecuada. ...ver más Tipo de documento: tesis doctoral | Formato: PDF (tamaño kb) Pag. 222 p. Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica Amaya, Celina Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica 2014-05-27 Descripción: Deshidroleucodina (DhL) es una lactona sesquiterpénica aislada de las hojas de la planta Artemisia douglasiana Besser, que crece en Argentina. Previamente, nuestro laboratorio ha demostrado que DhL inhibe la proliferación de células tumorales en cultivo y el crecimiento de tumores en ratones. Con el fin de demostrar que DhL posee potencial para el desarrollo de fármacos antitumorales, en esta tesis analizamos las propiedades antimigratorias de DhL en células tumorales. Como modelo de estudio utilizamos células en cultivo, arrestadas en la fase G1/S del ciclo celular. En las células tratadas con DhL fueron analizadas las propiedades de adhesión, invasión y migración. Como resultado, observamos que DhL no indujo apoptosis ni senescencia y no afectó la viabilidad celular. Luego, en una superficie recubierta con fibronectina, comprobamos que DhL inhibió la adhesión y la formación de adhesiones focales. Posteriormente, observamos que DhL inhibió la invasión del matrigel por las células tumorales y la migración celular. Además, DhL inhibió la protrusión de la membrana en el frente de avance, por la alteración de la organización del citoesqueleto de actina y la actividad de proteínas señaladotas como Rac1, ERK y p38. Estos resultados indican que DhL, a través de la inhibición de la señalización de ERK, afecta la adhesión, invasión y migración de las células tumorales en cultivo, confirmando la hipótesis que esta lactona sesquiterpénica tiene un gran potencial farmacológico como agente antimetastásico. ...ver más Tipo de documento: tesis doctoral | Formato: PDF (tamaño kb) Pag. 172 p. Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica Meroño, Tomás Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica 2015-03-17 Descripción: La sobrecarga y la deficiencia de hierro fueron asociadas a mayor riesgo de enfermedad cardiovascular (ECV). Sin embargo, los mecanismos involucrados y su impacto clínico resultan poco conocidos. Asimismo, aún no ha sido evaluado el potencial terapéutico del mantenimiento de la homeostasis del hierro sobre los factores de riesgo de ECV. El objetivo de la tesis fue evaluar el rol de los niveles de hierro sobre la inflamación, la disfunción endotelial y la aterosclerosis a través del estudio de sus bioindicadores en pacientes con sobrecarga y deficiencia de hierro en comparación con controles sanos, y estudiar el impacto de sus respectivos tratamientos. Se evaluó el metabolismo de los glúcidos y los lípidos, la actividad de enzimas asociadas a lipoproteínas, la composición química y funcionalidad de las lipoproteínas aisladas, y bioindicadores de inflamación y aterosclerosis. En ambos trastornos del metabolismo del hierro, se observaron: alteraciones en el perfil lipoproteico, presencia de lipoproteínas modificadas y disfuncionales, y un estado proinflamatorio caracterizado por una mayor actividad de fosfolipasa-A2 asociada a lipoproteínas. Estas alteraciones revirtieron en respuesta a los tratamientos respectivos de cada condición. En conclusión, las alteraciones del metabolismo del hierro se asocian a procesos proinflamatorios capaces de promover el desarrollo de ECV. ...ver más Tipo de documento: tesis doctoral | Formato: PDF (tamaño kb) Pag. 172 p. Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica Micucci, Horacio Alejandro Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica 2015-12-23 Temas: Ciencia de la vida - Atención Primaria de Salud - Sistemas de Información - Salud - Primer Nivel de Atención - Sistemas de Salud Descripción: Las deficiencias o la inexistencia de sistemas de información en salud es una problemática internacional. En esta tesis se plantea la pérdida de información de gran parte del sector privado y de obras sociales en la atención sanitaria argentina.
Se busca esbozar una solución al problema de la notificación privada al sistema de vigilancia en salud. Para ello se fundamentan los diseños y se evalúan los resultados de dos experiencias de notificación por parte un sector de bioquímicos privados, demostrando la factibilidad de repetirlas y extenderlas.
Este diseño de la notificación bioquímica privada permitiría, de extenderse, utilizar personal científico capacitado, contribuir a hacer más accesible el acto de salud y ampliar la información apta para la vigilancia epidemiológica de un amplio sector cuyos datos se pierden, a condición de que el Estado asuma un rol central en la estructura sanitaria más allá de los cambios de gobierno.
Los resultados de la tesis y el análisis de las principales fortalezas, oportunidades, debilidades y amenazas en las experiencias presentadas permiten afirmar que los agentes de salud privados de pequeña envergadura pueden integrarse en un sistema nacional de salud e información, de directriz estatal, y que su capacidad instalada no debe desecharse. ...ver más Tipo de documento: tesis doctoral | Formato: PDF (tamaño kb) Pag. 126 p. Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica Cerón Cucchi, María Esperanza Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica 2014-12-17 Descripción: La llama (Lama glama) es un herbívoro que posee un sistema digestivo conformado por 3 compartimentos. El primer compartimento (C1), similar al rumen en los rumiantes, posee un ecosistema microbiano complejo que incluye bacterias, protozoos, arqueas y hongos, y es donde ocurre la fermentación del forraje consumido, un proceso fundamental para la nutrición del animal. El C1 de la llama se encuentra pobremente caracterizado debido a las dificultades que involucra trabajar con los microorganismos que lo habitan. El objetivo de este trabajo fue contribuir al conocimiento de los microorganismos presentes en el C1 de la llama procedentes de dos zonas geográficas distintas (Buenos Aires y Jujuy). Se cuantificaron parámetros tales como pH, amoníaco y ácidos grasos volátiles. Se pudo revelar a las principales bacterias y arqueas metanogénicas que habitan el C1. Se detectaron potenciales nuevas especies bacterianas, además se logró la cuantificación y detección de géneros y especies de protozoos. Este es el primer trabajo en proveer información sobre la cuantificación, detección y diversidad genética de microorganismos anaerobios presentes en el C1 de la llama. Este estudio provee una visión del ecosistema bacteriano del C1 de la llama y sienta las bases para futuros estudios. ...ver más Tipo de documento: tesis doctoral | Formato: unknown (tamaño kb) Pag. 181 p. Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica Varani, Andrés Pablo Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica 2015-08-28 Descripción: La nicotina es el principal componente activo del tabaco y juega un papel importante en la adicción al mismo. En roedores, la administración aguda de nicotina modifica la locomoción, ansiedad y nocicepción; mientras que administraciones repetidas producen respuestas conductuales relacionadas con sus propiedades adictivas, como el efecto reforzante y la dependencia física. En nuestro estudio, se utilizó un abordaje genético y farmacológico para evaluar la hipótesis de que los receptores GABAB modulan las propiedades adictivas de la nicotina. Con este fin, respuestas conductuales agudas (hipolocomoción, antinocicepción y conductas relacionadas con la ansiedad), efecto reforzante y síndrome de abstinencia (manifestaciones somáticas y motivacionales) de la nicotina se investigaron en ratones pretratados con baclofen (agonista GABAB) o 2-OH-saclofen (antagonista GABAB) (abordaje farmacológico) y en ratones deficientes de la subunidad GABAB1 (GABAB1 knockout) (abordaje genético). En estos animales, exploramos posibles alteraciones neuroquímicas (concentraciones de dopamina, noradrenalina y serotonina) y moleculares (expresión de c-Fos y receptores nicotínicos). En resumen, observamos que alteraciones conductuales, neuroquímicas y moleculares inducidas por las propiedades adictivas de la nicotina fueron modificadas por la estimulación (baclofen), el bloqueo (2-OH-saclofen) o la falta (ratones GABAB1 knockout) de receptores de GABAB. En conclusión, estos resultados sugieren que los receptores GABAB juegan un papel en las propiedades adictivas de la nicotina y apoyan la hipótesis de que agonistas de los receptores GABAB podrían ofrecer ventajas terapéuticas para el tratamiento de la dependencia al tabaco. ...ver más Tipo de documento: tesis doctoral | Formato: PDF (tamaño kb) Pag. 187 p. Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica Zubrzycki, Jeremías Enrique Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica 2015-03-12 Temas: Ciencia de la vida - Sclerotinia sclerotiorum - Podredumbre húmeda del capítulo - Girasol - Mapeo de QTL - SNPs - Genes candidatos - Sclerotinia sclerotorium - Sclerotinia Head Rot - Sunflower - QTL mapping - SNPs - Candidate genes Descripción: La podredumbre húmeda del capítulo (PHC), causada por Sclerotinia sclerotiorum, es una de las limitante más importantes para el cultivo del girasol. Este trabajo tuvo como objetivo identificar las regiones del genoma de girasol asociadas a resistencia a PHC a partir de una estrategia de mapeo de QTL sobre una población de líneas recombinantes endocriadas. Se construyó un nuevo mapa genético incorporando marcadores de tipo SNP sobre un mapa existente, se caracterizó el comportamiento fenotípico de la población utilizando infecciones asistidas del patógeno durante cuatro campañas. Se registraron los datos de incidencia, severidad, intensidad y período de incubación. El mapa resultante posee 2823,8 cM y una densidad media de 4,57 cM por loci. Se identificaron 36 QTLs distribuidos en 13 grupos de ligamiento, destacándose dos regiones sobre los GL10 y 15, por su expresión consistente en las diferentes campañas. Los marcadores asociados a estas regiones podrán ser usados por los programas de mejoramiento en el desarrollo de genotipos con mejor desempeño ante el PHC. Asimismo, estos QTL se presentan como candidatos a ser estudiados en profundidad para caracterizar los componentes funcionales responsables de la expresión del fenotipo de interés. ...ver más Tipo de documento: tesis doctoral | Formato: PDF (tamaño kb) Pag. 204 p. Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica Conde, Pamela Andrea Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica 2015-04-09 Descripción: El objetivo general de esta Tesis Doctoral consistió en evaluar el efecto de eritropoyetina (EPO) y kit ligando (KITL), durante la maduración in vitro (MIV) de ovocitos.
Se utilizaron dos modelos, bovino y murino. En bovinos se estudió el efecto de EPO y KITL en el medio de MIV, en presencia de suero fetal bovino (FCS) o seroalbúmina bovina (BSA), sobre la maduración nuclear y citoplasmática del ovocito, la producción de especies reactivas del oxígeno (ROS) en ovocitos y embriones y la presencia de células apoptóticas en el cumulus. En murinos se evaluó la acción de ambos factores durante la MIV de ovocitos obtenidos a partir del cultivo in vitro de folículos.
En presencia de EPO o KITL, el porcentaje de embriones bovinos clivados y de blastocistos se incrementó o tendió a incrementarse respecto al control con BSA, respectivamente. No se observaron diferencias significativas en la maduración nuclear. El número de blastómeras por embrión de 48 hs. fue mayor, se observó un aumento en la producción de ROS por embrión y disminuyó significativamente el porcentaje de apoptosis en las células cumulus respecto al control con BSA.
En ratón, la presencia de KITL durante la MIV de ovocitos obtenidos a partir del cultivo in vitro de folículos preantrales aumentó el porcentaje de blastocistos. EPO no mostró diferencias significativas.
En conclusión, EPO y KITL no tendrían impacto en la maduración nuclear de los ovocitos bovinos o murinos, sin embargo podrían ejercer un efecto positivo sobre la maduración citoplasmática en las condiciones estudiadas. ...ver más Tipo de documento: tesis doctoral | Formato: PDF (tamaño kb) Pag. 114 p. Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica Carozzo, Alejandro Enrique Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica 2015-09-16 Descripción: Los adenocarcinomas ductales pancreáticos (PDAC), el subtipo histológico más frecuente de cáncer de páncreas, es uno de los tipos de tumores más letales, representando la cuarta causa de muerte relacionada con cáncer en los países desarrollados. Distintos componentes de la cascada del AMPc se encuentran frecuentemente alterados en este tipo de neoplasias e incluso en sus lesiones previas. La falta de terapias efectivas para su tratamiento hace necesaria la búsqueda y validación de nuevos blancos terapéuticos y biomarcadores para su detección temprana.
En este trabajo de tesis demostramos que la exclusión de AMPc mediada por MRP4 cumple un papel crítico en el proceso de proliferación de células de PDAC, producto de la participación de este nucleótido cíclico en un circuito mitogénico al interactuar con receptores específicos en la membrana plasmática. Asimismo, los resultados obtenidos indican que el AMPc regula la transcripción de MRP4 a través de un mecanismo dual, en el cual, el balance entre los niveles intra- y extracelulares de este segundo mensajero, juega un papel clave en la regulación de la expresión del transportador. Por lo tanto, los resultados experimentales descriptos en este trabajo de tesis, junto a los reportes bibliográficos analizados, permiten postular al proceso de exclusión de AMPc mediado por MRP4 como un blanco validado para futuras intervenciones terapéuticas en PDAC. ...ver más Tipo de documento: tesis doctoral | Formato: PDF (tamaño kb) Pag. 170 p. Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica Ferri, Cristian Alberto Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica 2015-03-16 Descripción: En la Leucemia Mieloide Crónica la resistencia al tratamiento puede deberse, entre otras causas, a mutaciones en el BCR-ABL1, a la sobreexpresión de Src kinasas o subexpresión de genes oncosupresores. La presencia del BCR-ABL1 en la Leucemia Linfoblástica Aguda (LLA) confiere mal pronóstico, por ello se han desarrollado protocolos más agresivos que incluyen inhibidores de tirosina kinasa (ITK).
La hipótesis de este trabajo fue determinar si la detección temprana de las mutaciones en BCR-ABL1 y la expresión de los genes LYN y PTEN estarían involucradas en la resistencia al tratamiento.
Mediante high resolution melting y ARMS-qPCR se incrementó la detección de mutaciones en un 16% respecto de la secuenciación directa. Se analizó la dinámica del clon mutado y de los transcriptos BCR-ABL1, permitiendo definir el rol de la mutación en la resistencia, seleccionar el ITK adecuado y evaluar respuesta al tratamiento.
El análisis de la expresión LYN/PTEN en pacientes resistentes a imatinib o nilotinib y sin mutaciones, permitió asociar la falta de respuesta al tratamiento con la expresión alterada de estos genes.
La cuantificación de BCR-ABL1P190 en LLA demostró ser una herramienta importante para evaluar la respuesta al tratamiento y definir enfermedad mínima residual, previo al trasplante de médula ósea. ...ver más Tipo de documento: tesis doctoral | Formato: unknown (tamaño kb) Pag. 151 p. Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica Bastón, Juan Ignacio Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica 2015-03-25 Descripción: La endometriosis se caracteriza por la presencia de tejido endometrial fuera de la cavidad uterina formando lesiones que se desarrollan y vascularizan en sitios ectópicos. Galectina-1 (Gal-1) es una lectina endógena que desempeña importantes funciones pro-angiogénicas e inmunomoduladoras en la biología tumoral. El objetivo principal de esta tesis fue estudiar el rol de Gal-1 en la etiopatogenia de la endometriosis.
Demostramos que Gal-1 se expresa en las células estromales y endoteliales pero no en las células epiteliales endometriales eutópicas y ectópicas. Además, los niveles de Gal-1 son mayores en las lesiones que en el endometrio eutópico de las pacientes con endometriosis grado I/II, lo cual podría indicar que Gal-1 juega un papel primordial en los estadios tempranos del establecimiento de esta patología. Observamos también que Gal-1 juega un papel significativo en la fisiopatología de la endometriosis, dado que promueve la proliferación in vitro de las células estromales endometriales, además del desarrollo vascular y el crecimiento de las lesiones endometriósicas in vivo. También se demostró que el bloqueo específico a nivel peritoneal de esta lectina limita el crecimiento de las lesiones, lo cual lleva a sugerir que Gal-1 podría convertirse un blanco terapéutico potencial para combatir la progresión de esta enfermedad. ...ver más Tipo de documento: tesis doctoral | Formato: PDF (tamaño kb) Pag. 147 p. Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica Tuttolomondo, María Victoría Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica 2014-12-09 Descripción: El impacto de los residuos generados por la actividad del ser humano sobre el ecosistema ha sido motivo en los últimos años de innumerables esfuerzos en busca de soluciones. En este sentido, una de las áreas que más crecimiento experimentó es el desarrollo de nuevos biosorbentes para ser utilizados como sorbentes en remediación ambiental para la remoción de metales y/o contaminantes orgánicos, tanto en aguas naturales como en efluentes industriales.
Existen más de 100.000 tipos de colorantes que se utilizan comercialmente en industrias, implicando esto el uso de más de 700.000 toneladas al año de los mismos. Pequeñas cantidades (1ppm) en agua de algunos colorantes ya modifican el color de la misma y la hacen no consumible. Muchos de ellos resultan poseer estructuras químicas estables térmicamente y resistentes a la biodigestión aeróbica. En particular, los azo colorantes son los colorantes más utilizados por la industria en la actualidad. Su estructura química particular los convierte en ideales para mantener el color de telas, alimentos, medicamentos, etc., inalterados por mucho tiempo. Se los conoce como colorantes recalcitrantes, es decir que permanecen en el ecosistema mucho más tiempo que colorantes con otra estructura. Es muy difícil que sean degradados por la luz o por los procesos estándares de las plantas de tratamientos de efluentes. Las aguas coloreadas llevan a un cambio total de la flora y la fauna, llegando en casos a la eutroficación. La remoción de azo colorantes de los cursos de agua es de primordial atención.
El presente plan de tesis se dirige hacia promover el avance y la aplicación de la investigación científica relacionada con el manejo de contaminantes del medio ambiente, como también la formación de recursos humanos en el área de química ambiental y consolidar la inserción de esta temática de alta incumbencia social para el bienestar humano y ecológico.
Los resultados obtenidos en el primer capítulo están referidos a la inmovilización de biomoléculas en nanopartículas magnéticas de silicio obtenidas mediante microemulsión inversa por la técnica sol gel. Ellos nos muestran que el material obtenido es monodisperso, con nanopartículas core/shell donde el interior posee el ferrofluido magnético y el exterior puede ser modificado sin perder las propiedades magnéticas. La enzima (ureasas como modelo) inmovilizada en la superficie de las nanoesferas mantiene su actividad en un largo período de tiempo. Por otro lado, el costo de las enzimas necesarias para decolorar azo colorantes y la necesidad de formar una cadena de reacción para que la decoloración vaya acompañada de una detoxificación mostraron ser económicamente inviables.
El segundo capítulo trata de la inmovilización de microorganismos (Pseudomonas sp.) capaces de decolorar azo colorantes (negro de Remazol, naranja de metilo y naranja de bencilo) en una matriz de sílica obtenida por la técnica sol-gel. Los resultados obtenidos muestran que las células son capaces de mantener la viabilidad dentro del material polimérico, que el gel no impide la entrada de nutrientes ni la salida de enzimas y productos de desecho y que las bacterias mantienen la viabilidad por largos períodos de tiempo. Puede observarse también que la capacidad de decolorar los colorantes azoicos ensayados se acompaña también de la detoxificación de los mismos, dado que el ensayo realizado con semillas de lechuga mostró mejoras en la germinación de dichas semillas luego del tratamiento con el residuo decolorado.
El tercer capítulo trata de la utilización de un biopolímero abundante, biodegradable y de muy bajo costo para la adsorción de azo colorantes reactivos (Remazol black) en solución acuosa. En el capítulo se muestra la excelente capacidad de adsorción del hidrogel de colágeno tipo I para este tipo de colorantes, el estudio de las interacciones entre sorbente y sorbato y la comparación entre diferentes azo colorantes con otras estructuras químicas (rojo Congo y marrón de Bismarck). Asimismo se muestra el efecto del agregado de nanopartículas de silicio obtenidas por la técnica sol-gel en las propiedades mecánicas del hidrogel de colágeno y como repercute este agregado en la adsorción de azo colorantes reactivos.
En definitiva, el presente trabajo de tesis permitió, por un lado, abordar aspectos básicos relacionados con la técnica sol-gel y describir una nueva forma de obtener nanopartículas magnética huecas, por otro lado trabajar sobre la inmovilización de biomoléculas en superficie e inmovilización de microorganismos por atrapamiento y finalmente describir el uso de un biopolímero de muy bajo costo y muy abundante para abordar el tema de remediación de los azo colorantes en los cursos de agua. Cada capítulo incluye el análisis de costo de fabricación de cada material para realizar la comparación final entre ellos desde el punto de vista económico. ...ver más Tipo de documento: tesis doctoral | Formato: PDF (tamaño kb) Pag. 170 p. Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica Gándola, Yamila Belén Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica 2015-03-17 Descripción: El objetivo general de esta Tesis fue estudiar el comportamiento de sistemas nanométricos basados en lecitina, para ser utilizados como vectores de oligonucleótidos en el tratamiento del cáncer de mama. Los sistemas propuestos fueron Nanopartículas de Fosfatidilcolina (NPCs) y Nanopartículas Mixtas de fosfatidilcolina y colato de sodio (NMs). Se estudiaron sus características fisicoquímicas, y se demostró su capacidad de carga de siRNA. Las NPCs no resultaron citotóxicas, y lograron promover la internalización celular de oligonucleótidos, pero no mediaron el silenciamiento post-transcripcional de un gen blanco (PTGS) eficientemente. Las NMs también fueron capaces de vehiculizar oligonucleótidos al interior celular e incluso evidenciaron mediar PTGS, pero presentaron citotoxicidad dependiente de su concentración. Los resultados mostraron características promisorias, por lo que estos sistemas podrían optimizarse y proponerse como base tecnológica para su uso en terapia génica.
Por otro lado, se estudiaron los efectos biológicos de los sistemas nanopartículados. Se evidenciaron distintos efectos sobre la activación de vías de señalización intracelular y viabilidad celular dependiendo de la composición y características fisicoquímicas de la nanopartículas. Esta novedosa caracterización en cuanto a su actividad biológica, demostró la importancia de evaluar sus acciones sobre sistemas vivos, aún cuando el material de origen sea considerado inerte y/o biocompatible. ...ver más Tipo de documento: tesis doctoral | Formato: PDF (tamaño kb) Pag. 163 p. Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica Bitrian, Mariana Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica 2013-07-05 Temas: Ciencia de la vida - Acinetobacter - Fotorreceptores - Virulencia - Quorum sensing - Twitching motility Descripción: El género Acinetobacter está integrado por bacterias Gram-negativas no fermentativas de la clase Gammaproteobacteria y comprende tanto bacterias ambientales como patógenas oportunistas. El complejo A. calcoaceticus - A. baumannii (Acb) ha adquirido gran importancia debido a su persistencia en infecciones intrahospitalarias y su perfil de multirresistencia a los agentes antimicrobianos convencionales. Con la finalidad de proveer nuevas herramientas que puedan emplearse en el tratamiento de la infección, se propone el estudio de marcadores fenotípicos, genes de densidad poblacional (QS), y de dominios fotorreceptores con el objeto de evaluar su relación con la respuesta de virulencia en Acinetobacter.
Nueve cepas clinicamente relevantes del género Acinetobacter fueron analizadas en cuanto a marcadores fenotípicos relacionados con virulencia. Si bien, ninguna de ellas mostró secreción de proteasas, ni síntesis de acil homoserino lactonas (AHL) de cadena corta, otros marcadores como la secreción de lipasa, la formación de biofilm, la motilidad celular, la resistencia antibiótica y la actividad hemolítica mostraron gran variabilidad. Por otra parte, la producción de sideróforos de tipo catecol fue significativamente mayor en las cepas aisladas de pacientes, por lo que podría ser considerado un marcador de virulencia en Acinetobacter. Todos los miembros del complejo Acb produjeron AHL de cadena mediana o larga y presentaron inhibición de la motilidad tipo twitching por luz azul. El análisis filogenético de las familias LuxI y LuxR demostró que las proteínas del sistema de QS poseen un origen ancestral dentro de la clase Gammaproteobacteria y se reforzó la hipótesis de la adquisición de genes reguladores de QS por transferencia horizontal.
Muchos organismos han desarrollado fotorreceptores capaces de absorber la luz a través de sus cromóforos. Las proteínas BLUF mostraron una distribución predominante en la clase Gammaproteobacteria y bacterias quimitróficas, siendo la arquitectura BLUF corta la más frecuente. Mientras A. baumannii posee una única secuencia codificante para proteína BLUF, A. baylyi ADP1 presenta cuatro secuencias putativas para proteínas BLUF, reflejando la importancia de su conservación.
La formación de biofilm en A. baylyi ADP1, a diferencia a lo descripto para A. baumannii, no mostró regulación por luz ni temperatura. Además, en A. baylyi la luz inhibió la producción de sideróforos de tipo catecol, la frecuencia de transformación y la motilidad tipo twitching. El análisis de la participación de las cuatro proteínas BLUF en la inhibición de la motilidad en A. baylyi ADP1 se realizó por noqueo de sus genes codificantes y posterior complementación, revelando que las proteínas codificadas por los genes ACIAD1499, ACIAD2125 y ACIAD2129 son activas y necesarias para la regulación de la motilidad tipo twitching y pueden complementarse unas a otras en su función, mientras que ACIAD2110 no participa en la regulación de este fenotipo. Esta conclusión fue también confirmada por el análisis de mutantes noqueadas en multiples genes (ACIAD1499, ACIAD2125 y ACIAD2129). Los cuatro genes se expresaron tanto en luz como en oscuridad. Sin embargo, los niveles de expresión de ACIAD1499, ACIAD2125 y ACIAD2129 fueron menores bajo la incidencia de luz azul, lo que explica la necesidad de que los tres genes sean expresados para alcanzar la cantidad de fotorreceptor requerida para provocar la inhibición de la motilidad.
Este trabajo de tesis mostró la variabilidad que presentan los miembros del género Acinetobacter en cuanto a los marcadores fenotípicos relacionados con virulencia, el sistema de QS y las proteínas BLUF, reflejando la gran dificultad para controlar las infecciones generadas por este patógeno oportunista. La regulación de la motilidad tipo twitching mediada por proteínas BLUF en A. baylyi ADP1 revela una redundancia genética poco común en bacterias y constituye el primer ejemplo de acción conjunta de tres fotorreceptores en un organismo procariota. ...ver más Tipo de documento: tesis doctoral | Formato: PDF (tamaño kb) Pag. 171 p. Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica Dupraz, Hernán Carlos 2015-10-09 Descripción: La transición nutricional está caracterizada por la obesidad epidémica y deficiencia de micronutrientes como Ca. Ambos estarían inversamente relacionados, especialmente durante el crecimiento.
Objetivos: Diagnosticar prevalencia de exceso de peso e insuficiencia cálcica, mediante IMC y relación Ca/crea (orina basal), en escolares sanos de 5 a 10 años. Analizar las interacciones entre ellos y sus efectos sobre la salud ósea.
Materiales y métodos: Se estudiaron 695 escolares municipales de Vicente López. Puntos de corte del IMC: percentilo 85 para sobrepeso (SP) y 95 para obesidad (Ob). Ingesta calcica deficiente para Ca/Crea <0,07; adecuada 0,07?0,15; elevada >0,15. Se evaluó alfa-alfa CTX (?CTX) y beta-beta CTX (? CTX) y QUI.
Resultados: Existió alta prevalencia de exceso de peso y deficiencia de Ca (24,9 % y 54%, respectivamente) sin diferencias por sexo. El IMC elevado y deficiencia de Ca no se asociaron.
El ?CTX descendió con la edad, sin diferencias por sexo. El QUI no mostró diferencias por sexo ni edad. El análisis factorial asoció inversamente QUI con ?CTX y ?CT e IMC y directamente con Ca/crea
Conclusiones: Es imprescindible fomentar hábitos alimentarios, para prevenir el sobrepeso y deficiencia de Ca que afectan los huesos, beneficiando la Salud Pública nacional. ...ver más Tipo de documento: tesis doctoral | Formato: unknown (tamaño kb) Pag. 126 p. Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica Ferrero, Maximiliano Rubén Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica 2014-12-19 Temas: Ciencia de la vida - Trypanosoma cruzi - Sulfatación - Infección e inmunomodulación - Cruzipaina - PAPS - Chagas Descripción: Trypanosoma cruzi, agente causal de la enfermedad de Chagas, es un protozoario hemoflagelado que posee una cisteína proteinasa mayoritaria denominada cruzipaina (Cz). Esta enzima además de un dominio catalítico, presenta un dominio C-terminal (C-T) de relevancia inmunológica. Nuestro grupo ha descripto previamente en este dominio, una O-glicosilación constituida por N-acetil glucosamina y una N-glicosilación compuesta por oligosacáridos de alta manosa, y un grupo sulfato constituyendo el primer reporte de glicoproteínas sulfatadas en Trypanosomátidos. Además, encontramos que los sulfatos presentes en la Cz presentan una marcada antigenicidad en pacientes con enfermedad de Chagas y también en modelos de infección murino donde además estarían directamente relacionados con el daño del tejido cardíaco. A pesar de la relevancia que muestran los motivos sulfatados del parásito nada se sabe del mecanismo de sulfatación ni acerca de su rol en el metabolismo del mismo.
La sulfatación, modificación crítica en muchas instancias de reconocimiento biológico, es catalizada por enzimas denominadas sulfotransferasas las cuales dependen para llevar a cabo su función de una molécula denominada PAPS (3'- fosfoadenosina-5' fosfosulfato). En este trabajo, estudiamos el efecto del clorato de sodio, un reconocido inhibidor de la síntesis de PAPS. En epimastigotes tratados con dicho inhibidor, observamos tanto una disminución de la sulfatación de la Cz por western blot como un desplazamiento hacia puntos isoeléctricos más altos en electroforesis bi-dimensional. Además vimos un marcado descenso de sulfoglicoesfingolípidos en cromatografía de placa delgada, confirmado mediante el análisis por espectrometría de masa (UV-MALDI-TOF). Estos parásitos mostraron anormalidades estructurales en imágenes de microscopía electrónica, y cuando se utilizó el tratamiento sobre trypomastigotes, obtuvimos una disminución marcada en la capacidad infectiva de los mismos. Mediante ensayos de citometría de flujo vimos una fuerte presencia de los epitopes sulfatados de la Cz expuestos en la superficie de trypomastigotes y en ensayos de infección posteriores pudimos demostrar la participación de estos epitopes presentes en el dominio C-T de la Cz en dicho proceso.
Las siglecs (sialic acid recognizing Ig-superfamily lectins), son un grupo de lectinas de reconocimiento a ácido siálico, expresadas en células del sistema inmune e involucradas en la regulación negativa de la activación de las mismas. Se ha demostrado que la señalización por vía de las Siglecs muchas veces depende del contexto glicosídico en el cual se encuentre el ácido siálico y que T. cruzi es reconocido por estas lectinas.
Nuestros resultados con Siglec-E de ratón, ortóloga de la Siglec-9 humana, mostraron que los ligandos de esta lectina en el parásito están específicamente expuestos en proteínas de membrana. Además, existe un reconocimiento de esta lectina a Cz tanto lisosomal de epimastigotes como de Cz liberada al medio por trypomastigotes metacíclicos. La participación de los sulfatos de la Cz promoviendo esta interacción fue demostrada en ensayos de ELISA directo en los cuales Cz y C-T tuvieron un reconocimiento significativamente mayor al de Czd y C-Td. Estos resultados fueron confirmados en ensayos de ELISA de competencia entre Cz y Czd. Por último mediante tratamientos con clorato de sodio, demostramos que la presencia de sulfatos en la superficie del parásito incrementa el reconocimiento de Siglec-E por los mismos utilizando citometría de flujo. En conjunto nuestros resultados sugieren que las glicoproteínas silalidadas del parásito, que contienen grupos sulfatos como la Cz, interaccionan con Siglec-E modulando la respuesta inmune del hospedador, favoreciendo la parasitemia y la persistencia del parásito.
Finalmente considerando los antecedentes detallados sobre la relevancia de la sulfatación tanto en el metabolismo del parásito como en el desarrollo de la enfermedad de Chagas; sumado a la ausencia de secuencias genómicas que podamos identificar como posibles sulfotransferasas del parásito, sostenemos firmemente que esta vía es un blanco potencial terapéutico de relevancia.
...ver más Tipo de documento: tesis doctoral | Formato: PDF (tamaño kb) Pag. 182 p. Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica Marchini, Timoteo Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica 2015-03-30 Temas: Ciencia de la vida - Contaminación ambiental - Material particulado - Corazón - Inflamación - Estrés oxidativo Descripción: La exposición a partículas de contaminación ambiental (MP) se encuentra asociada a incrementos en la morbilidad y mortalidad cardiovascular. El estrés oxidativo y la respuesta inflamatoria han sido señalados como partícipes fundamentales en este contexto, aunque los mecanismos subyacentes no se conocen en detalle. El objetivo de este trabajo fue evaluar dicha hipótesis en modelos de exposición aguda in vivo e in vitro, utilizando MP derivado de la combustión del petróleo (ROFA). Se observó una alteración del metabolismo oxidativo y energético cardíaco, junto con una disminución de la reserva contráctil y diastólica. Estos cambios se acompañaron de incrementos en marcadores plasmáticos de estrés oxidativo e inflamación. La reacción inflamatoria producida por ROFA indujo la extravasación de leucocitos, por activación de células endoteliales y mieloides dependiente de TNF-?. Los monocitos circulantes parecerían desempeñar un rol central en los efectos observados, dado que su depleción previene la aparición de marcadores de inflamación local y sistémica. Asimismo, el bloqueo de TNF-? in vivo previno los efectos de ROFA a nivel cardíaco. Estos resultados indican que el estrés oxidativo y la respuesta inflamatoria se encuentran asociados a la exposición a MP, y podrían explicar los efectos adversos reportados sobre el sistema cardiovascular. ...ver más Tipo de documento: tesis doctoral | Formato: PDF (tamaño kb) Pag. 188 p. Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica Rodriguez Peña, Marcelo Javier Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica 2014-09-11 Descripción: La exocitosis acrosomal (EA) es un proceso secretorio dependiente de Ca2+ fundamental para que el espermatozoide fecunde el ovocito. Durante este trabajo de tesis describimos la presencia y localización de MARCKS en espermatozoides humanos.
En un modelo de espermatozoides permeabilizado, anticuerpos que reconocen diferentes dominios de MARCKS inhibieron la EA. A su vez se demostró que el dominio efector (ED) de MARCKS es capaz de inhibir la EA y que el estado de fosforilación del ED regula su participación durante la EA. Asimismo la adición de PIP2 o adenofostina, un potente agonista de los receptores de IP3 revirtió el efecto inhibitorio del ED de MARCKS sobre la EA, sugiriendo que MARCKS regula la disponibilidad de PIP2 durante la EA.
Además se demostró que un péptido que posee la secuencia del ED de MARCKS es permeable a la membrana plasmática y es capaz de inhibir los movimientos de Ca2+ que ocurren durante la EA.
En esta tesis demostramos que una vez que se estimula la EA se produce la fosforilación y translocación de MARCKS desde las membranas al citosol celular. Estos resultados nos permiten plantear que MARCKS es un componente importante en las vías de transducción de señales durante la exocitosis acrosomal.
...ver más Tipo de documento: tesis doctoral | Formato: PDF (tamaño kb) Pag. 149 p. Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica Rincón Cruz, Giovanna Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica 2015-03-26 Temas: Ciencia de la vida - qnrB - aac(6´)-Ib-cr - qepA - oqxAB - PMQR - Resistencia plasmídica a quinolonas - qnrB - aac(6´)-Ib-cr - qepA - oqxAB - PMQR - Plasmid-mediated quinolone resistance Descripción: Si bien desde 1998 se conocieron los primeros marcadores de resistencia a quinolonas de codificación plasmídica (PMQR), y sumado a la elevada resistencia a quinolonas reportada, son escasos los estudios epidemiológicos acerca de los PMQR. Dentro de estos determinantes se describieron las proteínas tipo Qnr, la variante de la enzima acetiltransferasa (Aac(6´)-Ib-cr), y las bombas de eflujo (QepA y OqxAB).
El objetivo de este estudio fue investigar la frecuencia de los determinantes de resistencia a quinolonas mediados por plásmidos (PMQR) en tres colecciones de Enterobacteriaceae resistentes a cefalosporinas de tercera generación (RCTG) aisladas de especímenes clínicos de Argentina (A), Perú (P) y Colombia (C). Se incluyó, además, otra colección de aislamientos de Colombia sensible a estos antibióticos.
Los mecanismos más frecuentemente encontrados fueron aac(6´)-Ib-cr (A= 38,6 %, P= 55,5 %, C-resistente= 71,4 % y C-sensible= 18,7 %) y qnrB (A= 36,8 %, P= 25,9 %,C- resistente 52,4 % y C-sensible 3,1 %). Un aislamiento por país mostró el gen qepA, de los cuales dos fueron qepA1 y el tercero un nuevo alelo con 99 % de identidad con qepA1 y qepA2.
Los genes oqxAB se encontraron en tres aislamientos de E. coli de Perú asociados a secuencias de inserción de la familia IS6 en plásmidos de 90 a 100 Kb.
El trabajo muestra la importante asociación de la resistencia a fluoroquinolonas (y de las PMQR) en aislamientos RCTG, y su mayor prevalencia que en la colección sensible a oxiiminocefalosporinas. Este trabajo es la primera descripción de la prevalencia de genes de tipo PMQR en aislamiento RCTG en poblaciones de Argentina, Perú y Colombia, así como la primera descripción y caracterización de qepA y oqxAB en aislamientos clínicos de sus países de origen. ...ver más Tipo de documento: tesis doctoral | Formato: unknown (tamaño kb) Pag. 192 p. Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica Leal Denis, María Florencia Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica 2015-03-16 Descripción: Los eritrocitos humanos (RBC) liberan ATP frente a diferentes estímulos. In vitro, la
exposición a diferentes agentes farmacológicos desencadena eventos intracelulares
que activan la liberación de ATP.
En esta tesis se analizaron los factores que controlan la evolución temporal de la
concentración de ATP extracelular (ATPe). Las células fueron expuestas a dos
estímulos que inducen liberación de ATP: 3V y mastoparán 7 (MST7). Ambos
estímulos inducen aumentos de la concentración de cAMP.
La exposición a 3V produjo un aumento de cAMP, que se tradujo en una liberación
aguda de ATP. Cuando las células fueron tratadas con CBX (bloqueante de
panexina 1), la liberación de ATP fue completamente bloqueada concluyendo que la
salida de ATP ocurriría sólo a través de la panexina 1.
La exposición a MST7 indujo pequeños aumentos de cAMP que llevaron a una gran
salida de ATP. El CBX bloqueó parcialmente la liberación de ATP, sugiriendo la
existencia de dos vías para la liberación del mismo. Además se estudió el papel del
volumen y la adhesión celular en la cinética de ATPe. En las células no adheridas,
MST7 no indujo respuesta mientras que en células adheridas, las concentraciones
ATPe aumentaron y se observó un aumento de volumen celular. ...ver más Tipo de documento: tesis doctoral | Formato: PDF (tamaño kb) Pag. 184 p. Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica Lopez Mingorance, Fabiana Norma Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica 2015-10-09 Descripción: El síndrome metabólico(SM), definido según la ATP III, afecta a más del 20% de la población mundial. Se considera a la insulino resistencia (IR) el componente patogénico fundamental. Interviene un desbalance del Sistema Nervioso Autónomo, afectado por factores ambientales y cambios del estilo de vida. El páncreas, a través del eje endocrino-exocrino, actúa en el proceso digestivo de todos los nutrientes, y regula la homeostasis de la glucosa.
Se estudió, en pacientes con SM, la importancia de la PTOG ampliada, como herramienta para su diagnostico y tratamiento.
La alteración exocrina producida en la IR, a consecuencia de la interacción del eje endocrino-exocrino, se evaluó con la Prueba del Pancreolauryl.
Se estudió en un modelo animal de SM, que la esplacnicectomia (interrupción del circuito vago-central-esplácnico) mejora la IR característica.
Postulamos que la esplacnicectomia, corta un freno modulador del tono colinérgico hepático; incrementa la liberación del Hepatic Insulin Sensitizing Substance (HISS), potencial hormona que actúa sinergicamente con la insulina en músculo esquelético, corazón y riñones, aumentando la disponibilidad de glucosa en el tejido. Mejora la respuesta fisiopatológica del páncreas endocrino y exocrino. Puede llegar a ser una herramienta terapéutica útil para el tratamiento de estas patologías en humanos. ...ver más Tipo de documento: tesis doctoral | Formato: PDF (tamaño kb) Pag. 102 p. Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica Furmento, Verónica Alejandra Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica 2015-03-19 Temas: Ciencia de la vida - Factor estimulante de colonias de granulocitos - Células trofoblásticas - Transducción de señales Descripción: Con el propósito de dilucidar las acciones biológicas desencadenadas por la interacción G-CSF:G-CSFR en células trofoblásticas y determinar las vías de transducción de señales que median esas funciones, se utilizó una línea de trofoblastos (Swan 71) derivados de una placenta humana del primer trimestre. Luego de detectar la presencia de receptores para G-CSF en estas células, se determinó que la citoquina no resultó un estímulo proliferativo ni promovió la sobrevida de las células Swan 71. Sin embargo, el G-CSF incrementó los niveles de expresión de la metaloproteinasa-2 (MMP-2), del factor de crecimiento del endotelio vascular (VEGF), de la integrina ?1, y favoreció la aparición de un fenotipo migratorio. Por otra parte, se comprobó que el G-CSF activó las cascadas de transducción de señales de MAPKs ERK1/2 y p38, de PI3K/Akt y de NF-?B/I?B. Mediante el uso de inhibidores farmacológicos específicos y de mutantes dominantes negativas se determinó que esas vías median algunos de los efectos del G-CSF en las células Swan 71. Además, se observó que las vías MAPK ERK1/2 y PI3K/Akt contribuyen a la activación del factor nuclear ?B, y que PI3K participa como un estímulo ?upstream? en la fosforilación de las MAPKs ERK1/2 y p38.
En su conjunto, los resultados obtenidos no sólo permitieron dilucidar el mecanismo de acción del G-CSF en células trofoblásticas, sino también, refuerzan la hipótesis de que el G-CSF, a través de la promoción de la adquisición de un fenotipo trofoblástico migratorio, estaría participando, junto con otros factores de la interfase materno-fetal, en la implantación embrionaria y en el desarrollo placentario. ...ver más Tipo de documento: tesis doctoral | Formato: unknown (tamaño kb) Pag. 168 p. Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica Barcia, Roberto Alfredo Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica 2014-12-17 Descripción: Con el objeto de mejorar el conocimiento acerca de los mecanismos que modulan la inhibición del crecimiento durante el estrés abiótico se estudió en trigo el efecto del cadmio, cobre, metilviológeno (un generador de anión superóxido), peróxido de hidrógeno y polietilienglicol (agente reductor del potencial agua) durante la etapa postgerminativa, estadio en el cual la planta se encuentra en metabolismo quimoheterotrófico. De los resultados se concluyó que las condiciones ambientales adversas afectaron los procesos de proliferación/expansión involucrados en el crecimiento radicular de manera diferencial. Los metales afectaron el equilibrio redox lo cual tuvo consecuencias en el nivel de carbonilación de proteínas consideradas claves para el ciclo celular, bloqueando su progresión y restringiendo el proceso de proliferación celular, bloqueando el ciclo celular en el momento en que podrían ocurrir errores en la replicación o ruptura del ADN (transición G1/S), y de esta forma la célula podría reparar el daño previniendo la propagación de errores. Durante el déficit hídrico, el crecimiento se afectó a través de alteraciones la expansión celular. El ajuste osmótico y el mantenimiento del equilibrio redox en la raíz pueden ser los puntos clave para superar el déficit hídrico moderado y continuar creciendo, aunque a baja velocidad, durante el crecimiento temprano del trigo. ...ver más Tipo de documento: tesis doctoral | Formato: PDF (tamaño kb) Pag. 175 p. Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica Knott, María Elena Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica 2015-12-17 Temas: |