Descripción: Los ganglios de la base (GB) son núcleos subcorticales involucrados en el control voluntario del movimiento y en procesos mnésicos, atencionales y motivacionales. En los animales adultos, la actividad de estos núcleos depende fuertemente de la dopamina, que regula el flujo de información cortical hacia el estriado, que es el núcleo de "entrada" de los GB. Sin embargo, el conocimiento de la maduración funcional de estos circuitos en el pasaje de la infancia a la adultez y si las vías dopaminérgicas ejercen un rol sobre este proceso, es escaso. Algunas alteraciones conductuales de condiciones neuropsiquiátricas asociadas al desarrollo, como el síndrome de Gilles de la Tourette, el Déficit de Atención con Hiperactividad (ADHD) o el Trastorno Obsesivo Compulsivo, han sido explicadas por alteraciones de la función dopaminérgica y de los circuitros frontoestriatales. Por lo tanto resulta de interés comprender los procesos madurativos normales y patológicos de estos circuitos en relación a las vías dopaminérgicas. La hipótesis general en la que se enmarca esta tesis es que los circuitos córticoestriatales son inmaduros al momento del nacimiento y que durante la infancia y adolescencia ocurren cambios sustanciales en el conexionado anatómico y funcional que les confieren las características del sistema adulto. En estos procesos madurativos la dopamina jugaría un papel central y la conectividad adquirida durante el desarrollo y moldeada por la experiencia condicionaría las conductas mediadas por los GB. Un corolario de esta hipótesis es que alteraciones postnatales que afecten la conectividad córticoestriatal podrían ser el sustrato de alteraciones conductuales asociadas a patologías de los GB que podrían manifestarse en distintas etapas de la vida. Para evalular esta hipótesis trabajamos con un modelo animal de lesión de neuronas dopaminérgicas neonatal y estudiamos las propiedades electrofisiológicas del sistema córticoestriatal en el pasaje de la infancia hacia la adultez. Los resultados obtenidos indican que, comparado con los ratones juveniles, en los ratones adultos la densidad de neuronas estriatales espontáneamente activas decae, la conectividad funcional córticoestriatal aumenta, la probabilidad de respuesta estriatal a estímulos focales en la corteza disminuye y la capacidad de sufrir depresión sináptica córticoestriatal disminuye. Encontramos que algunos de estos procesos madurativos parecen ser facilitados por las vías dopaminérgicas (densidad de sitios activos y resistencia a la LTD), mientras que otros, en apariencia, maduran normalmente en los ratones con lesión neonatal. Estos resultados apoyan la hipótesis de trabajo y sugieren que perturbaciones sobre la neurotransmisión dopaminérgica en etapas tempranas del desarrollo pueden producir efectos duraderos sobre algunas capacidades de los circuitos córticoestriatales mientras que otras pueden madurar gracias a mecanismos compensatorios.

Descripción: KSHV es un oncovirus implicado en Sarcoma de Kaposi (KS) y otros cánceres asociados a SIDA. KS es un neoplasma caracterizado por la proliferación de células ahusadas y la intensa angiogénesis. Los mecanismos a través de los cuales KSHV causa la respuesta angioproliferativa de KS se desconocen y la reproducción de todos los aspectos de KS mediante infección experimental por KSHV aún no ha podido ser demostrada. El receptor acoplado a proteína-G (vGPCR) de KSHV puede estimular cascadas de señalización que inducen angiogénesis y transformación celular. Identificar estas cascadas puede tener significancia terapéutica. Ciclooxigenasa-2 (COX-2) es un medidor involucrado en angiogénesis tumoral que puede ser regulada por antinflamatorios (AINEs). En la primera parte de este trabajo demostramos que vGPCR regula la actividad y la expresión de COX-2 vía ERK-1/2. Encontramos que la inhibición de COX-2 impide la angiogénesis inducida por vGPCR y que la administración del AINE Celecoxib retarda el crecimiento tumoral con disminución en la vascularata y producción de VEGF. Así, COX-2 sería uno de los componentes moleculares del cambio angiogénico de vGPCR y un posible blanco terapéutico. En la segunda parte mostramos que la transfección con KSHV clonado en un Cromosoma Artificial Bacteriano (KSHVBac36) en preparaciones de médula ósea murinas enriquecida en precursores de células endoteliales (mEC) es suficiente para inducir tumorigénesis y llevar al cambio fenotípico angiogénico. Las células mEC transfectadas con KSHVBac36 (mECK36) estaban infectadas con KSHV, secretaban VEGF, eran angiogénicas in vivo e indujeron en ratones inmunodeficientes la formación de sarcomas de células ahusadas vascularizados que expresaban LANA y marcadores característicos de KS. La inhibición de la expresión de vGPCR en las mECK36 utilizando siRNA condujo a la inhibición de su angiogenicidad y tumorigenicidad. Estos resultados definen un modelo animal para estudiar la patogénesis de KS mediada por KSHV y señalan a vGPCR como uno de sus principales oncogenes angiogénicos.

Descripción: Los modelos animales son una herramienta fundamental dentro de las cienciasbiomédicas en general y para las neurociencias en particular. Sin embargo su utilizaciónpara el estudio de alteraciones psiquiátricas humanas genera cierta controversia dentrode la misma comunidad científica. Con el objetivo de comprender e intentar caracterizaresta problemática, en el presente trabajo analizamos y discutimos epistemológicamentedesde la Filosofía de las Neurociencias los problemas, límites y desafíos de lautilización de animales de laboratorio como modelos para el estudio de alteracionespsiquiátricas humanas. Para realizar esto desarrollamos una estructura de análisis quenos permitiera estudiar el proceso de modelización animal de estas psicopatologíasa partir de las relaciones y supuestos metodológicos, epistemológicos y semánticosque sostienen cada paso de la modelización. Finalmente, para poner a prueba lautilidad epistémica de nuestra herramienta la aplicamos al análisis de cada paso de lamodelización animal de la esquizofrenia en particular y, en general, a otras cuatro delas psicopatologías más prevalentes en la población. De este análisis concluimos que,tanto la clínica como la investigación neurocientífica, no conceptualizan de igual formaa las alteraciones psiquiátricas, y por tanto los modelos animales para su estudio norepresentan las características fundamentales y definitorias de ellas. Esto lleva a que lasconclusiones y conocimientos que se extraen de dichos modelos resulten cuestionablesepistemológicamente y planteen dudas sobre su utilidad clínica. En función de estoproponemos que debería hacerse una revisión de la metodología de modelización de lasalteraciones psiquiátricas poniendo el foco aquella fenomenología definitoria de cadauna de las psicopatologías estudiada teniendo en cuenta los avances en el conocimientocon los que hoy cuentan las neurociencias.

Descripción: Los ganglios de la base (BG) son núcleos subcorticales interconectados con la corteza cerebral que estáninvolucrados en el control motor voluntario y distintos aspectos de la conducta y el aprendizaje. Ladopamina es un regulador clave del flujo de información desde la corteza al estriado, el principal núcleode entrada de los BG. Algunas de las alteraciones conductuales observadas en desórdenesneuropsiquiátricos tales como el síndrome de Tourette, el trastorno de déficit de atención conhiperactividad y el desorden obsesivo compulsivo, son atribuidas a alteraciones madurativas de loscircuitos córticoestriatales y su modulación dopaminérgica. Sin embargo, poco se sabe acerca deldesarrollo funcional de estos circuitos y del rol de la dopamina en este proceso. El objetivo general de esta tesis es estudiar los mecanismos postnatales de la maduración del sistemacórticoestriatal y su conexión con la adquisición de conductas normales y patológicas. Nuestra hipótesises que las neuronas dopaminérgicas son importantes durante el desarrollo postnatal para el desarrollofuncional y anatómico de la conectividad córticoestriatal, y que alteraciones en este proceso dan lugar acondiciones neuropsiquiátricas. En este trabajo encontramos que la lesión neonatal de neuronas dopaminérgicas ocasiona déficitsduraderos en el balance entre la búsqueda de recursos, tanto nutricionales como sociales, y elaprovechamiento de los mismos. Estos déficits emergen temprano en el desarrollo y empeoran en lavida adulta, en particular aquellos relacionados a la exploración global de ambientes complejos. Por otrolado, estudios electrofisiológicos in vivo y reconstrucciones morfológicas de las neuronas de proyecciónestriatales revelaron alteraciones córticoestriatales asociadas al fenotipo comportamental. Másespecíficamente, en los animales con lesión neonatal de neuronas dopaminérgicas se observó unareducción de la conectividad funcional córticoestriatal que afecta las entradas provenientes de lacorteza prelímbica más marcadamente que las provenientes de las corteza cingular y motora. Laatenuación en la conectividad observada para los inputs prelímbicos es más marcada en el adultolesionado respecto del juvenil, se relaciona con una mayor susceptibilidad por sufrir procesos dedepresión sináptica córticoestriatal, y se asocia a una contracción del árbol dendrítico de las neuronasde proyección estriatales, sin cambios en la densidad de espinas dendríticas. En conjunto, estos resultados son consistentes con la idea de que las neuronas dopaminérgicas sonesenciales durante el desarrollo postnatal para la maduración funcional y estructural del sistemacórticoestriatal. Desde una perspectiva bottom-up, nuestros hallazgos sugieren que condicionesneuropsiquiátricas presumiblemente relacionadas a alteraciones dopaminérgicas tempranas podríanpresentar alteraciones en el reclutamiento de los circuitos córticoestriatales durante tareas deexploración y sociales.