Activación e inactivación de la tita hemolisina perfringens

Institución otorgante:

Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales

Fecha:

1944

Tipo de documento: 

info:eu-repo/semantics/doctoralThesis
 

Formato:

application/pdf

Idioma:

spa

Descripción:

La toxina perfringens contenida en los cultivos de Clostridium welchii, tipo A., hemolisa los glóbulos rojos, y como demostró Todd (1941), es lábil al oxígeno y está relacionada conla streptolisina 0, con la cual posee comunidad antigénica. Eneste trabajo nos propusimos demostrar las condiciones ofactores que favorecen o inhiben la acción del oxígeno. Además,como al parecer se trata ds un sistema de óxido reducción, intentamosllegar experimentalmente a determinar de que tipo erael referido sistema, es decir, que sustancia o grupo de sustancias,rigen por cambios sucesivos esta clase de fenómenos. Elprimer punto que debimos resolver fué el siguiente: encontraruna sustancia reductora tal que, al ser adicionada a latoxina, no permita la oxidación de ésta. Así se puede mantenerel material con poder hemolítico lo suficientemente elevado,como para medir sus fluctuaciones, cuando se somete la toxinaa otros procesos. Ademas,la toxina entera, es decir, el filtrado de loscultivos de Clostridium welchii, tipo A, posee una composiciónextremadamente compleja. Las sustancias inertes que acompañan alprincipio hemolítico, producen muchas veces reacciones que interfierena las de la hemolisina propiamente dicha. Por esta razón,el segundo punto que tratamos de resolver fué el siguiente:separar y purificar el principio hemolítico. Para elloutilizamos los métodos clásicos de precipitación de la fracciónproteica por acción del sulfato de amonio a saturación, y luegopurificación posterior de esta por el método de diálisis. Así seobtuvieron varias fracciones, que al ser tratadas por agentesreactivantes, tales como el hidrosulfito de sodio o elácido tioglicólico, nos condujeron a resultados - en base a los cualespodemos sugerir - la existencia de una sustancia particular,presente en las toxinas enteras, que permite la acción reactivadoradel ácido tioglicólico, ya que al desaparecer esasustancia, la acción es nula o contraria a la reactivación. Lasexperiencias de oxidación por otros agentes, talescomo el iodo, o el ferricianuro de potasio, nos llevaron ademostrar que en estos casos, la inactivación de la toxina se llevaa cabo en forma irreversible, es decir al ser tratadanuevamente con hidrosulfito de sodio o con ácido tioglicólico no regenerarsu capacidad hemolítica. Estas experiencias se hicieronen base a las que ya habían efectuado C.V.Smythe y T.H. Harris (1940), con un determinado grupo de estreptococos hemolíticos. La interpretación de los resultados de estas experienciasde oxidación, así como la individualización de lassustancias cuya existencia fué anteriormente sugerida, se hacen muy dificultosasdebido a que, como todavia el Clostridiumwelchii, se cultiva en medios de composición compleja, las conclusionesde las experiencias efectuadas con esta clase de filtradospueden ser, a veces, erroneas o dispares. Por eso creemos,que el estudio racional de estos sistemas podrá ser encarado conmayores perspectivas de éxito cuando se llegue a cultivar el Clostridium welchii, en medios sintéticos. Sepuede atribuir además, a esa extrema complejidad enla composición de los flltrados, la inconstancia en los datosobtenidos cuando se trató de investigar la presencia de glutationy citocromo.

Identificador:

https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n0373_Crivelli