Litterio, María Corina
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2015-03-20

Descripción: Se estudiaron los mecanismos antioxidantes y antihipertensivos del flavanol (?)-epicatequina, abundante en la dieta humana.In vitro se demostró que la capacidad de (?)-epicatequina atrapando radical alcoxilo y anión superóxido (mecanismo antioxidante directo)es alta, pero poco relevante comparadacon la deotroscompuestos a las concentraciones habituales en los tejidos. La (?)-epicatequina ejerció un efecto vasodilatador en aorta aislada, pero no significativo a la concentración que el compuesto alcanza en sangre. In vivo, en modelos experimentales de incremento de presión arterial en ratas por administración de L-NAME o por sobrecarga de fructosa, la (?)-epicatequina previno el aumento en presión arterial producido por los tratamientosa través del restablecimiento de la biodisponibilidad de óxido nítrico (NO)en aorta a valores controles asociado a: i) mayor actividad de NOsintasa, sin modificación en expresión de NO sintasa endotelial (con mayor fosforilación de Ser1177 y normalización de caveolina-1, en el modelo de fructosa) y ii) prevención del estrés oxidativo mediado por NADPH-oxidasa, regulando la expresión de p47phox (y de p22phox en el modelo de fructosa). Se concluye que la acción antihipertensiva de la (?)-epicatequina no involucra, al menos exclusivamente, mecanismos antioxidantes directos sino un conjunto de mecanismos antioxidantes indirectos.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 187 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Ventura, Clara
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2014-12-18

Descripción: En los últimos años, ha cobrado importancia el estudio de los contaminantes ambientales en relación al desarrollo de cáncer, en especial para el cáncer de mama, debido a que muchos de los plaguicidas de uso corriente pueden actuar como disruptores endócrinos (DEs), afectando la fisiología de la glándula mamaria. En este trabajo, demostramos que bajas concentraciones del plaguicida organofosforado clorpirifos (CPF) inducen la proliferación de la línea celular MCF-7 en forma dependiente del RE?, mientras que, concentraciones mayores, conducen a una disminución de la capacidad clonogénica celular mediada por un incremento en los niveles de ERO y la fosforilación de la proteína ERK1/2. Asimismo, el CPF modificó la histología de la glándula mamaria de rata conduciendo a la aparición de lesiones proliferativas como la adenosis y la hiperplasia ductal, afectó el sistema endócrino modificando los niveles circulantes de las hormonas esteroideas e hipofisarias y alterando la esteroidogénesis ovárica. Finalmente, evidenciamos un efecto estimulante del CPF sobre la carcinogénesis mamaria mediante estudios en un modelo experimental en rata. Nuestros resultados aportan nueva información acerca de los mecanismos de acción del plaguicida CPF en las células mamarias. Además de interferir con el metabolismo redox, el CPF regula la activación de diferentes vías de señalización, desregula el sistema endócrino, modifica la histología del tejido mamario y afecta la carcinogénesis en este tejido.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 266 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Visintini Jaime, María Florencia
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2015-03-27

Temas:   Ciencia de la vida   -  Poliovirus   -  Euparina   -  Plantas medicinales   -  Argentina   -  Asteraceae

Descripción: La búsqueda de nuevos antivirales es una necesidad actual y constante. Una estrategia para la identificación de nuevos compuestos bioactivos es el estudio de los metabolitos secundarios presentes en la flora mundial. El objetivo principal de este trabajo de tesis fue la búsqueda de nuevos compuestos con actividad antiviral en diferentes plantas medicinales argentinas frente a diversos virus de interés clínico, como ser poliovirus y herpes simplex virus. Para ello, se realizó un screening de actividad antiviral en dos extractos diferentes, un extracto orgánico (EO) y un extracto acuoso (EA), de siete especies argentinas de la familia Asteraceae: Baccharis gaudichaudiana, B. spicata, Bidens subalternans, Eupatorium buniifolium, Pluchea sagittalis, Tagetes minuta y Tessaria absinthioides. La concentración efectiva 50 (CE50) del EO de B. gaudichaudiana y E. buniifolium frente a PV-2 fueron de 14,8 ± 1,5 ?g/ml y 9,5 ± 3,5 ?g/ml; respectivamente, valores que justificaron su fraccionamiento bioguiado frente a PV para la identificación de el/los compuesto/s responsables de la actividad antiviral observada. A partir del EO de B. gaudichaudiana, fue posible el aislamiento e identificación de un flavonoide conocido, la apigenina, previamente ya reportado en esta especie. La actividad antiviral de este compuesto fue de CE50= 12,2 ± 3,3 ?M. A partir de E. buniifolium se aisló un benzofurano, la euparina, cuya CE50 frente a PV-2 fue de 0,6 ± 0,2 ?M. Del estudio del mecanismo de acción de la euparina, se pudo demostrar que su mecanismo de acción era la interferencia en la etapa de penetración y/o desnudamiento del virus y el blanco de acción fue el sitio hidrofóbico conocido como pocket hidrofóbico en la cápside viral, localizado por debajo de la región del canyon. La selección de mutantes resistentes y dependientes a la euparina, y su caracterización biológica permitió demostrar las mutaciones asociadas a cada fenotipo localizadas en las diferentes proteínas de la cápside viral. Los resultados obtenidos en este trabajo de tesis, aportan al conocimiento de las especies medicinales estudiadas respecto a su potencial antiviral e identifica a la euparina como un inhibidor de cápside, altamente selectivo para los tres tipos de poliovirus humano.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 182 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Dotto, Cristian M.
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2017-08-11

Descripción: S. aureus coloniza asintomáticamente a más del 20% de la población sana y es el agente causal de un amplio espectro de infecciones, tanto intrahospitalarias como adquiridas en la comunidad. Tal versatilidad se debe a la adaptación de S. aureus a vivir en un entorno dinámico donde varía la disponibilidad de nutrientes y la presencia de varias moléculas. Frente a condiciones hostiles S. aureus puede formar biopelículas lo que hace refractarias al tratamiento a las infecciones con estas características. La matriz extracelular que encierra a la comunidad bacteriana está constituida por el polisacárido intercelular de adhesión (PIA), proteínas de superficie y el ADN extracelular liberado por la autolisis. La formación de biopelícula por S. aureus está sujeta a una regulación compleja y aún no dilucidada en su totalidad. En este trabajo se propuso estudiar el efecto de señales del microambiente, como el ácido salicílico (SAL) y concentraciones subinhibitorias (Csub) de vancomicina (VAN) o ciprofloxacina (CIP), sobre los principales factores y reguladores de S. aureus involucrados en la formación de biopelícula y su implicancia como estrategia adaptativa hacia la persistencia de la bacteria en el hospedador. Al respecto, la disminución de la biodisponibilidad de hierro por acción del SAL contribuyó al incremento de la síntesis del exopolisacárido PIA, debido al descenso de la actividad del ciclo de los ácidos tricarboxílicos (TCA) y al direccionamiento del metabolismo hacia la ruta fermentativa del lactato. Asimismo, el SAL provocó la disminución transcripcional de codY (regulador negativo de los genes que codifican para formar el PIA) y de los genes del sistema agr (regulador positivo de moléculas encargadas del desensamble de la biopelícula). Por medio de estos mecanismos, el SAL indujo el aumento de la biomasa de las biopelículas formadas por cepas de S. aureus relacionadas a los linajes genéticos USA100 y USA300 independientemente de la sensibilidad a la meticilina. Por lo cual, si bien el SAL aumentó la biomasa de las biopelículas de S. aureus, evita la dispersión de las bacterias que la conforman y por ende la posible generación de nuevos focos de infección. Además, la presencia del SAL propició el aumento de la colonización de este patógeno en narinas murinas debido a la generación de un fenotipo bacteriano más adherente. Por su parte, la VAN y la CIP en bajas concentraciones afectaron la formación de biopelícula de un modo cepa-dependiente. La inducción de la biomasa de la biopelícula por acción de Csub de ambos antibióticos, ocurrió por mecanismos que involucran principalmente el incremento de adhesinas. Al respecto, ambos antibióticos incrementaron la transcripción de sae, el cual regula positivamente la expresión de diversas adhesinas. Además, la VAN afectó negativamente al regulador MgrA el cual reprime la expresión de adhesinas. S. aureus responde a la acción de éstas señales adoptando una forma de vida sésil más robusta, al adaptar el metabolismo, la expresión de factores de virulencia y la red regulatoria de forma dinámica. Dicha respuesta podría modificar el curso de las infecciones causadas por S. aureus y conducir a la persistencia o cronicidad. A través de este trabajo se comprenden los mecanismos por los cuales S. aureus incrementa la biopelícula, aportando una pieza de conocimiento importante para ulteriores investigaciones basadas en el diseño de compuestos o estrategias que bloqueen o interfieran con el/los principal/es actor/es que participan en la formación de la biopelícula.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 125 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Moretton, Juan Agustín
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
1986-11-18

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: unknown  (tamaño kb)  Pag. 166 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Elguero, María Eugenia
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2015-03-19

Descripción: Las hormonas tiroideas (TH) coordinan muchas respuestas fisiológicas y procesos madurativos durante el desarrollo; sin embargo, todavía no se conocen claramente los mecanismos por los cuales su deficiencia conduce a alteraciones en el mismo. Las mitocondrias juegan un papel esencial en la fisiología celular como productoras de energía y actuando como organelas de señalización, y su actividad y estructura se ve altamente regulada por la acción de TH. En trabajos previos en nuestro laboratorio, observamos que el hipotiroidismo condujo a un confinamiento de la enzima óxido nítrico sintasa neuronal en mitocondrias y que el aumento del óxido nítrico (NO) mitocondrial se asocia a la disminución del metabolismo basal observado en el hipotiroidismo. Además de los cambios metabólicos producidos por el NO, el aumento matrical del mismo en mitocondria conduce a un aumento en los niveles de oxidantes y la activación de vías de señalización asociadas a proliferación, diferenciación o muerte celular. La hipótesis de este trabajo se basa en que la modulación positiva de la mtNOS en el desarrollo de la rata hipotiroidea y el concomitante aumento de NO mitocondrial podrían estar ligados a las alteraciones en el crecimiento observadas frente a la deficiencia de hormonas tiroideas durante el periodo perinatal, que en humanos, resulta en el retardo físico y mental, conocido como cretinismo. En esta tesis nos propusimos analizar la utilización mitocondrial de NO como causa de alteraciones moleculares y fenotípicas definitivas en el hipotiroidismo neonatal. Nuestros estudios en hígado y cerebro de rata confirmaron que el hipotiroidismo congénito conduce a una modificación del patrón de expresión de la enzima óxido nítrico sintasa neuronal (nNOS) y su confinamiento mitocondrial respecto al desarrollo normal. Demostramos que en el hígado de rata, el hipotiroidismo alteró el metabolismo oxidativo a través del incremento de NO mitocondrial y estimuló la transcripción temprana de mitofusina 2 y tardía de Drp1, proteínas involucradas en la dinámica mitocondrial pero no afectó su localización mitocondrial. En este órgano la respuesta que ejerce el NO sobre la actividad de los complejos de la cadena respiratoria y la producción de oxidantes parece estar más relacionada a un efecto metabólico generado por la deficiencia de HT. Comprobamos que en el desarrollo perinatal del cerebro de rata, el incremento de NO mitocondrial se efectúa de forma temprana, y a través de la producción de ROS, aumenta la expresión de la proteína de fisión mitocondrial Drp1, la activación de JNK en la etapa perinatal tardía y la liberación de citocromo c al citosol que iniciaría la apoptosis por la vía mitocondrial. Estos resultados nos condujeron al análisis de apoptosis y proliferación hipocampales mediante las técnicas histológicas de BrdU y TUNEL donde se comprobó que el hipotiroidismo congénito generó una modificación del patrón apoptótico/proliferativo en el hipocampo de cerebro consecuente temporalmente con la liberación de ciotcromo c. En los días 5 y 30 perinatales los animales hipotiroideos presentaron aumento en la apoptosis hipocampal respecto al desarrollo eutiroideo. Comprobamos que el tratamiento de los mismos con el inhibidor de la producción de NO fue capaz de revertir tanto la apoptosis observada a nivel mitocondrial como la muerte de células de hipocampo. Finalmente, ensayando la expresión de genes de estrés involucrados en el establecimiento de la memoria y aprendizaje comprobamos que se ven modificados por el hipotiroidismo en forma NO dependiente, y que finalmente algunos de los trastornos conductuales del hipotiroidismo como ansiedad y memoria espacial pueden ser regulados por el NO y revertidos por el tratamiento con inhibidor. Estos hallazgos nos permiten establecer nuevos mecanismos de acción para el NO mitocondrial en vías de señalización específicas durante el desarrollo perinatal en el hipotiroidismo congénito.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 181 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Tallis, Silvina
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2014-12-18

Descripción: El término insuficiencia hepática, independientemente de su etiología, se define como la claudicación en las funciones del hígado que resulta en un amplio espectro de alteraciones clínicas, bioquímicas y neurofisiológicas. La enfermedad hepática puede presentarse de forma aguda o crónica. La etapa crónica, y con menor frecuencia la aguda, tiene como complicaciones de mayor importancia el síndrome de Hipertensión Portal y la Encefalopatía Hepática. La Encefalopatía Hepática es un cuadro clínico sobre el cual la ciencia médica ha tenido menos control que sobre otras patologías que surgen como complicaciones de la cirrosis hepática. Se define a la Encefalopatía Hepática como un síndrome potencialmente reversible que se manifiesta por un amplio espectro de alteraciones en la conciencia, que pueden ir desde sutiles cambios en el comportamiento hasta el coma profundo y la muerte. Este síndrome neuropsiquiátrico es secundario a una disfunción hepatocelular, al desarrollo de circuitos porto-sistémicos o a una combinación de ambos. El cuadro clínico es complejo y puede afectar a cualquier área cerebral. La alteración es una reacción mental orgánica con un trastorno neurológico y psiquiátrico. Un hallazgo importante es la variabilidad, especialmente en las formas crónicas. Los hallazgos dependen de la naturaleza e intensidad de los factores etiológicos y predisponentes. Actualmente, se considera a la Encefalopatía Hepática un gran desafío intelectual en los diferentes campos de la medicina debido a su cuadro clínico variado, a su fisiopatología compleja, a la multiplicidad de factores precipitantes, a la carencia de un fenómeno causal único, así como también debido a la falta de estudios complementarios confirmatorios y diagnósticos. La Encefalopatía Hepática Mínima es un estadio subclínico que presenta un desarrollo fisiopatológico crónico asociado a un proceso adaptativo cerebral. El estudio exhaustivo de la Encefalopatía Hepática Mínima es una herramienta de gran utilidad para identificar las vías que inician o desencadenan los mecanismos fisiopatológicos que posteriormente se interrelacionan en los estadios avanzados. Una vez disparada esta interrelación se establece una condición muy compleja que dificulta el poder dilucidar cuál ha sido el mecanismo o su vía iniciadora. La presente Tesis Doctoral tuvo como objetivo principal estudiar las alteraciones tempranas del Sistema Nervioso Central en un modelo experimental de Hipertensión Portal Prehepática y caracterizar la Encefalopatía Hepática Mínima inducida por la Ligadura Parcial de la Vena Porta, a partir de un estudio morfológico y funcional a nivel neuronal, astrocitario y vascular. Por primera vez, en esta Tesis, en un modelo experimental de Encefalopatía Hepática Mínima, se describen alteraciones estructurales y funcionales en el hipocampo y en la corteza cerebral de animales con de Hipertensión Portal Prehepática y Encefalopatía Hepática Mínima. A los 10 días de la cirugía, el grupo de animales con Encefalopatía Hepática Mínima inducida por la Ligadura Parcial de la Vena Porta cumple con las características principales de la Encefalopatía Hepática de tipo B asociada con derivaciones porto-sistémicas sin enfermedad hepatocelular intrínseca. Los hallazgos descriptos en esta Tesis Doctoral sugieren que en la Encefalopatía Hepática Mínima inducida por la Ligadura Parcial de la Vena Porta, existen alteraciones a nivel del Sistema Nervioso Central que son focales y diferenciales según la zona afectada y que se encuentran asociadas con la hiperamonemia moderada, característica principal de la Encefalopatía Hepática. Comprender la patogénesis de la Encefalopatía Hepática Mínima proporcionaría un marco teórico que aportaría a la comprensión de la fisiopatología de la Encefalopatía Hepática con el fin de encontrar un marcador bioquímico precoz. Además aportaría en gran medida al desarrollo de terapéuticas adecuadas para su diagnóstico y tratamiento.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 178 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Sequeira, Gonzalo Ricardo
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2015-03-25

Descripción: El objetivo de este estudio fue evaluar el efecto de terapias combinadas de nanoquimoterapéuticos con mifepristona (MFP) utilizando modelos experimentales que expresan distintas relaciones de isoformas A y B del receptor de progesterona (RP). Demostramos utilizando el modelo de carcinomas mamarios murinos inducidos por MPA y xenoinjertos de las líneas celulares T47D modificadas para expresar sólo RPA o RPB, que MFP mejora los efectos terapéuticos de liposomas pegilados de doxorubicina (DOX) o de paclitaxel (PAX) unido a albúmina, sólo en los tumores con niveles mayores de la isoforma A (RPA) que de la isoforma B del RP (RPB). En estos tumores MFP incrementa la remodelación tisular y el número de vasos funcionales favoreciendo la acumulación de drogas en el tumor. En estudios preliminares utilizando cultivos tisulares de cáncer de mama humano con distinta relación RPA/RPB no se observaron efectos aditivos de MFP y DOX corroborando los resultados obtenidos con los modelos in vivo. Se observó asimismo que los tumores con niveles de expresión de RPA ? RPB serían más sensibles a DOX que los de proporción opuesta quienes son más sensibles al PAX. Postulamos que MFP podría ser utilizada junto con nanoquimioterápicos en carcinomas mamarios con RPA?RPB.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 135 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Cerny, Natacha
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2016-03-28

Descripción: Los agentes quimioterapéuticos empleados en el tratamiento de la enfermedad de Chagas luego del período agudo son poco efectivos y con graves efectos secundarios por lo que es prioritario el desarrollo de nuevas estrategias terapéuticas para controlar la infección. En este trabajo de tesis evaluamos la inmunoterapia con el ADN de Cruzipaína (Cz) para controlar una infección en ratones infectados con T. cruzi. Se evaluaron tratamientos con plásmido desnudo (d) por vía intramuscular, y por vía oral usando Salmonella (S) como sistema de transporte de los antígenos; tanto en etapas tempranas como tardías de la infección. La coadministración de Cz+GM-CSF, por ambas vías logró reducir la parasitemia, aumentando la sobrevida con incremento de la respuesta humoral y celular, esencial para la protección del daño en tejidos musculares. Ambas vacunas dCz+dGM-CSF y SCz+SGM-CSF, al ser aplicadas durante la etapa crónica de la infección desencadenaron una fuerte respuesta celular y una mejora en el estado general de los tejidos musculares, respecto a los controles que presentaban daños característicos de la patología chagásica. Incorporamos Chagasina (Chg), inhibidor fisiológico de Cz, en la inmunoterapia combinada SCz+SChg+SGM-CSF, logrando mejorar la eficacia protectora de Cz+SGM-CSF, presentando menores niveles de parásitos en sangre y un mejor estado de cortes histológicos de tejidos musculares, con una menor actividad de enzimas séricas marcadoras de daño tisular. La vacuna terapéutica multicomponente SCz+SChg+SGM-CSF, aplicada durante la fase crónica de la infección, previene la patología tisular. Nuestros resultados indican que la inmunoterapia de la infección por T. cruzi con el ADN codificante para Cz, Chg y GM-CSF, tanto al ser administrado en etapas tempranas como tardías de la infección, estimula la respuesta inmune, reduce la carga parasitaria y disminuye la inflamación tisular característica de la enfermedad. El empleo de SCz+SChg+SGM-CSF podría ser una promisoria alternativa para el tratamiento de la enfermedad de Chagas.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 114 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Cohen, Melina
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2015-03-18

Descripción: La OMS en el 2008 incluyó una nueva entidad provisoria, el LDGCB EBV+ del adulto mayor, en pacientes mayores de 50 años inmunocompetentes, probablemente por la inmunosenescencia inherente al envejecimiento. Nuestro objetivo fue determinar la participación del virus de EBV en la patogénesis del LDGCB en pacientes pediátricos, adultos menores y mayores de 50 años de nuestro país, y caracterizar ciertos marcadores del microambiente tumoral. Se analizaron 102 casos de LDGCB. Se realizó hibridación in situ para EBERs e inmunohistoquímica para los antígenos virales y marcadores del microambiente tumoral. Se determinó la expresión relativa de transcriptos virales y de citoquinas y quimioquinas por PCR en tiempo real y se compararon los casos EBV+ y ? en los 3 grupos. El LDGCB EBV+ (con ?20% de células tumorales EBERs+) se vio en todos los grupos etarios y prevaleció el perfil de latencia II y III junto con perfil lítico. PD-1 prevaleció en todos los LDGCB, mientras que los casos EBV+ tuvieron un aumento significativo en la población de células citotóxicas GrB+ y una tendencia a una menor sobrevida libre de eventos. El virus cumpliría un rol en la patogénesis del LDGCB EBV+ en todos los grupos etarios. Este hallazgo avala la sugerencia de revisión del criterio de edad definido por la OMS.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 150 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Jordá, Graciela Beatriz
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2016-10-14

Temas:   Ciencia de la vida   -  BACOVA   -  Vaginosis   -  Vaginitis   -  Tracto genital inferior   -  Virología   -  Fisiología

Descripción: La complejidad de la vagina humana hace que su microbioma cambie en periodos cortos de tiempo. El riesgo de infección y de contraer enfermedades en una mujer puede modificarse a lo largo de los años. El balance del contenido vaginal o BACOVA es el estudio morfológico integral del contenido vaginal y contribuye al control, seguimiento clínico y terapéutico de las disfunciones vaginales en laboratorios de todo tipo de complejidad. Se invitó a participar del proyecto a las mujeres en edad fértil de Posadas (Misiones), que concurrieron entre los años 2011 y 2013 al laboratorio del Instituto de Previsión Social-Misiones con el objetivo de caracterizar los estados vaginales básicos (EVBs), identificar y determinar la frecuencia de Levaduras, Trichomonas vaginalis, Neisseria gonorrhoeae, Chlamydia trachomatis y Virus Papiloma Humano (VPH), analizar posibles asociaciones y la utilidad del BACOVA frente a estos agentes. Se estudiaron 505 muestras de mujeres que aceptaron participar, 265 correspondieron a mujeres sintomáticas incorporadas de manera consecutiva y 240 fueron asintomáticas. Ciento seis (20,99%) estaban embarazadas, y de éstas 57 presentaron síntomas. El 45,42% de las mujeres que no refirieron síntomas presentaron disfunciones vaginales. La distribución de los EVBs en mujeres sintomáticas y asintomáticas respectivamente fue: EVB I (microbiota normal) 20,75% y 54,58%; EVB II (microbiota normal con respuesta inflamatoria) 20,37% y 10,41%; EVB III (microbiota intermedia) 6,79% y 10,83%; EVB IV (vaginosis bacteriana) 26,41% y 15,83%; y EVB V (vaginitis microbiana inespecífica) 25,66% y 8,33%. El porcentaje de agentes infecciosos en mujeres sintomáticas y asintomáticas respectivamente fue: HPV 29,4% y 32,1%; Levaduras 12,5% y 4,6%; C. trachomatis 11,3% y 5,4%; y T. vaginalis 4,5% y 0,8%. En este estudio no se obtuvo desarrollo de N. gonorrhoeae en ninguna de las muestras estudiadas. La detección de levaduras se observó con mayor frecuencia en mujeres sintomáticas comparado con las asintomáticas, tanto en toda la población de estudio (p=0,002) como en las embarazadas (p=0,019). Se observó una mayor frecuencia de infección por T. vaginalis y C. trachomatis en mujeres sintomáticas y en mujeres con EVB V. La infección por HPV se asoció a mujeres con mayor número de parejas sexuales. Al genotipificar los HPV, predominaron los genotipos de alto riesgo y el más frecuente fue el HPV16 (35,13%). Los resultados de valores predictivos y de razones de verosimilitud indican la escasa utilidad del manejo sindrómico en la consulta médica para predecir correctamente la VB. Los VPP resultaron bajos para infección por T. vaginalis (6,58%), C. trachomatis (11,97%) y HPV (31,66). El VPN resultó 99,11% en la infección por T. vaginalis indicando que en presencia de EVB sin RIV la probabilidad de padecer esta infección es muy baja. Del análisis de los parámetros de exactitud de la prueba de RIV en mujeres sintomáticas y asintomáticas se observó que la mayor fuerza de esta prueba como poder discriminante, correspondió a los valores obtenidos para predecir infecciones por T. vaginalis respecto a infección por C. trachomatis o HPV. Los resultados obtenidos en el estudio de la distribución de los EVBs en muestras de mujeres atendidas en la mayor obra social de la Provincia de Misiones mostraron, una frecuencia elevada de disfunciones vaginales con predominio de vaginosis bacteriana y vaginitis microbiana inespecífica. El EVB V mostró una fuerte asociación con la infección por T. vaginalis (p<0,001, OR=19,70 IC95%=5,30-72,30) y en menor grado con C. trachomatis (p<0,001,OR=3,21 IC95%=1,64-6,25) y con levaduras (p=0,036,OR=2,15 IC95%=1,07-4,31) El BACOVA permitió una diferenciación eficaz de vaginosis y vaginitis independientemente de la presencia de síntomas clínicos en el grupo de estudio. El conocimiento epidemiológico de las disfunciones vaginales en las mujeres estudiadas contribuirá a la optimización de medidas de prevención y control de las infecciones transmitidas sexualmente y a la protección de la salud sexual y reproductiva en las mujeres afiliadas al Instituto de Previsión Social de Misiones El hallazgo de un porcentaje elevado de disfunciones vaginales sin etiología demostrada, mediante BACOVA, promueve la búsqueda de agentes de transmisión sexual. Del mismo modo sería importante avanzar en la implementación de métodos más sensibles en la investigación de T. vaginalis y en la investigación de genotipos de C. trachomatis circulantes en la región.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 150 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Roisman, Alejandro
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2017-03-09

Temas:   Ciencia de la vida   -  Línfomas   -  No-Hodgkin   -  RNA   -  Fisiología   -  Genética

Descripción: El reciente hallazgo de transcriptos primarios carentes de capacidad para codificar proteínas provee una nueva perspectiva acerca de la centralidad funcional del RNA en la regulación génica. Estructuralmente, los RNAs no codificantes (ncRNA) se subdividen en dos grandes categorías: los ncRNAs pequeños (sncRNA) y ncRNAs largos (lncRNAs). Los microRNAs (miRNAs) constituyen la categoría de mayor representación dentro de los sncRNAs pudiendo regular la expresión génica y participando en diversos procesos como proliferación, apoptosis, desarrollo, diferenciación y metabolismo celular entre otros. Por otra parte, los lncRNAs, constituyen una clase novel de moléculas reguladoras ampliamente distribuidas y escasamente caracterizadas en nuestro genoma. Los mismos representan la mayor parte de nuestro transcriptoma, constituyendo importantes modificadores de la expresión génica, involucrados en numerosos procesos de nuestra economía celular. Numerosas evidencias han establecido una coordinada relación entre la expresión aberrante de miRNAs y lncRNAs en el desarrollo de numerosos tipos de cáncer. Paralelamente, el clúster SOXC constituido por SOX4, SOX11 y SOX12 integran un grupo de 20 factores de transcripción de la superfamilia HMG. SOX11 y SOX12 poseen importantes funciones en el desarrollo del sistema nervioso central, participando en el control de la proliferación celular, diferenciación y mantenimiento de la identidad celular durante la embriogénesis. Ambos genes no se expresan en tejido linfoide normales, pero se ha visto que SOX11 muestra expresión aberrante en diversos tipos de cáncer. SOX4 es el único miembro de la familia con función definida y de relevancia durante el desarrollo y diferenciación de células B. En el presente trabajo se realizó el análisis de expresión génica de los genes SOXC y del clúster miR17-92 en 70 pacientes con Linfoma de Células del Manto (LCM). En paralelo se analizó el perfil transcripcional del set completo de los 481 Transcribed Ultraconserved Regions (T-UCRs) en 85 pacientes con Leucemia Linfocítica Crónica (LLC) tratadas (T) y no tratadas (NT) in vitro con agonistas de TLRs (Toll like receptors) oligo CpG ODN2006. Asimismo se realizó una indagación exhaustiva de los perfiles transcripcionales de lncRNAs y genes codificantes en 76 pacientes con Linfoma Folicular (LF). El análisis de los clústeres SOXC y miR17-92 permitió evidenciar dos grupos de pacientes: con sobreexpresión de SOX11/SOX12/miR19b/miR92a (Clúster A) y con aumento de los niveles de SOX4/mir17/miR18a (Clúster B). La correlación con características clínicas mostró diferencias significativas en la localización ganglionar, niveles de proliferación, morfología blastoide y sobrevida más corta, con peor pronóstico para el Clúster A respecto del Clúster B, permitiendo distinguir por primera vez en LCM, pacientes asociados a un perfil de expresión de genes codificantes y no codificantes específico. El análisis transcripcional de T-UCRs en pacientes con LLC T y NT con ODN2006 permitió identificar que la expresión del lncRNA uc.70 estratifica de manera más precisa la progresión de los pacientes con LLC, tanto en individuos asociados a buen pronóstico, como aquellos asociados a una enfermedad agresiva. En relación a los patrones transcripcionales de lncRNAs y genes codificantes descubiertos en pacientes con LF, se seleccionaron lncRNAs candidatos potencialmente involucrados con vías y caminos de señalización relacionados a la agresividad y heterogeneidad de la patología, haciendo foco en lncRNAs diferencialmente expresados (DE) que pudieran ser reguladores putativos de genes codificantes DE basándose en la coexpresión de los mismos. Los hallazgos encontrados en el presente trabajo apuntan a una íntima relación entre los perfiles de expresion de ncRNAs y las patologías analizadas, sugiriendo a este nuevo estrato transcripcional del genoma como potenciales nuevos targets en cáncer. Estos resultados constituyen un aporte original al conocimiento de las características biológicas de las entidades en estudio permitiendo así, evidenciar con mayor especificidad la diversidad y heterogeneidad de procesos involucrados en su desarrollo.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 207 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Grenón, Sandra Liliana
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2015-07-13

Descripción: El presente trabajo describe aspectos de la epidemiología de las meningitis agudas pediátricas, en el departamento Capital de la provincia de Misiones, dirigido a sus principales agentes etiológicos. Para ello se diseñó un estudio descriptivo, transversal para el período 1994-2009, que incluyó todos los casos atendidos en el Hospital Provincial de Pediatría. Se utilizó la definición de meningitis aséptica y bacteriana, según criterios internacionales propuesto por la OMS, investigándose por diversas técnicas los agentes etiológicos. Para el almacenamiento y análisis de datos se utilizó el programa Epi Info 6; y la prueba de Chi2 (error de estimación de 0,05%) para determinar asociación significativa entre las variables. El análisis factorial de correspondencias múltiples (AFCM) se realizó utilizando el paquete estadístico SPAD-N V 4.01 1987-1999 (CISIA CERESTA) del programa PRESTA (Programme de Recherche et D´Esignement en Statistique Apliquee). En este período se detectaron 1.073 casos de meningitis de etiologías infecciosas en pacientes pediátricos. La distribución de los mismos y las tasas de incidencia no siguieron un patrón uniforme denotándose picos; mientras las meningitis bacterianas (MB) variaron entre 77,8 (1995) y 14,8 (2009) casos/105 niños, con una tendencia en disminución, las meningitis asépticas (MA) lo hicieron entre 153,1 (2005) y 13,7 (1998) casos/ 105 chicos con una tendencia en ascenso. Ambos afectaron más a los varones que a las niñas con una razón de género de 2,4 en MB y 1,6 en MA niños por cada chica. La morbilidad media para ambos tipos de meningitis fue superior entre los niños < 1 año y su incidencia respecto a cualquier grupo fue significativamente mayor. Las tasas de MB corregidas por edad, fueron más elevadas que las asépticas salvo para los niños > 4 años. De los 581 episodios de MB se documentó agente etiológico en el 73%. Los patógenos detectados fueron Streptococcus pneumoniae (Spn) en 167 (39%) episodios, Neisseria meningitidis (Nme) 22% (95), Haemophilus influenzae (Hin) 19% (80) y 86 (20%) microorganismos diferentes a los capsulados. Todos mostraron una tendencia en disminución, con variaciones importantes en las frecuencias anuales. La incidencia de meningitis por Spn cada 105 niños varió entre 19,2 (1997) y 4,3 (2009), con una media de 10,6. El grupo más afectado fue el de niños entre 1 y 11 meses (94/167, 56 %). El 30,7 % de los aislamientos (46/150) fueron resistentes a penicilina y el 16,7 % (25/150) no sensibles a cefotaxima. Se detectaron 19 serotipos, predominó el 14 (32%; 40/125). El 84,8% de los aislamientos quedaron circunscritos a nueve serotipo: 14, 5, 1, 7F, 18C, 6B, 9N, 9V y 4. La resistencia a penicilina estuvo reducida a 8 (14, 6B, 6A, 9V, 4, 23B, 1 y 19A), y la no sensibilidad a cefotaxima a 3 (14, 9V y 1), el más importante fue en ambos casos el serotipo 14. La incidencia por Nme varió entre 23,7 (1996) y 1,7 (2009)/105 niños, con una media de 5,6. Afecto especialmente a los niños > 2 años (62,1%; 59/95), aunque las tasas más elevadas se observaron en niños < 1 año. Durante 1996 se detectó un brote por Nme C que comprometió a niños de todas las edades, aunque los más perjudicados fueron los > 4 años. Circularon 4 serogrupos: C (50%; 47/94), B (33%; 31/94), W135 (15%; 14/94) y en el 2% Y (2), con variaciones temporales. La tasa por Hin varió entre 17,5 (1995) y 0,87 (2009)/105 niños, con una media de 5,6. Los más afectados, con tasas más elevadas, fueron los niños < 1 año (59/80, 73%). Observamos una reducción de la incidencia, superior al 90%, en todos los grupos una década después de la implementación de la vacuna. Todos los aislamientos fueron seroagrupados como H.influenzae b, no detectándose ningún otro tipo capsular o aislamientos no tipables. La tasa para los otros agentes etiológicos varió entre 10,1 (1995) y 0,8 (2009)/105 niños. La mediana de edad fue de 2 años y 3 meses y el 78% (57/73) de los aislamientos se efectuaron en niños < 1 año. La tasa de meningitis tuberculosa varió entre 2,19 (1995)/105 niños y 0,87 (2009), con una media de 0,81 y una tendencia leve al descenso. Comprometió a 1,16 varones por cada niña implicada, con una mediana de edad de 4 años y 4 meses. El mayor número de aislamientos se obtuvo en los niños de más de 4 años de edad (7/13, 54%). En el 42% (207/492) de las MA se logró arribar a un diagnóstico etiológico. Los enterovirus (EV) constituyeron un importante agente etiológico de estas meningitis en el departamento Capital al detectar 62 episodios (73%) en el período 2005-2009 y confirmar un brote epidémico, que comprometió a 143 niños, entre agosto y diciembre de 2005. El mismo, provocado por EV Echo 4, elevó la tasa a 136 casos /105 niños. El 79,8% de los niños afectados fueron > 4 años y el 55,2% varones, con una mediana de edad de 8 años. Durante el resto del período la tasa varió entre 22,3(2008) y 5,3 (2006) casos/105 niños, con una media de 13,9 y una tendencia en ascenso. La mediana fue de 6 años y 7 meses; el 62% de los niños tenían más de 4 años y el 56,8% eran varones (razón V:M = 2,1:1). La tasa más elevada se registró para < 1 año (69,6) grupo responsable del incremento observado. El presente trabajo constituye un aporte a la epidemiología de la región, y contribuye a mejorar la situación de la salud en la provincia, brindando herramientas para la toma de decisiones en cuanto a prevención y el establecimiento de normas para tratamiento empírico adecuado.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: unknown  (tamaño kb)  Pag. 264 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Yaneff, Agustín
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2015-03-03

Temas:   Ciencia de la vida   -  Acuaporina   -  PIP

Descripción: Dentro de las acuaporinas vegetales, las PIPs son una de las principales responsables del intercambio eficiente de agua a través de la membrana plasmática (MP). Existe un subtipo - PIP1- que si bien se expresan ampliamente, su rol y propiedades restan de ser dilucidados, dado que no llegan a la MP salvo que se co-expresen junto con una PIP2. Nuestro trabajo fue demostrar que una PIP1 específica de fruto (Fragaria x ananassa, FaPIP1;1)- contribuye a modular la permeabilidad al agua de la membrana (Pf). Utilizando un modelo matemático aplicado a resultados de Pf obtenidos experimentalmente co-expresando FaPIP1;1 y FaPIP2;1 o una mutante de FaPIP2;1 en diferentes relaciones de masa se logró dilucidar la contribución individual de cada PIP a la Pf de la MP. Demostramos que: i) FaPIP1;1 tiene alta capacidad de transporte de agua; ii) la Pf de FaPIP2;1 aumenta al interaccionar físicamente con FaPIP1;1; iii) entre FaPIP1;1 y FaPIP2;1 se produce heterotetramerización aleatoria a partir de monómeros. Finalmente, caracterizamos la sensibilidad del gatillado dependiente de pH citosólico para ambas acuaporinas y cómo influye el estado de fosforilación de una Serina específica. Proponemos que existe una interacción entre los diferentes mecanismos de regulación que gobernarían la permeabilidad de una membrana que expresa ambas PIPs.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 174 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Dominguez, Pía Guadalupe
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2014-11-19

Temas:   Ciencia de la vida   -  ASR   -  Azúcar   -  Estrés   -  Solanáceas   -  Hormonas

Descripción: La familia de genes Asr (ABA, stress, ripening) está implicada en las vías de respuestas generales a estrés y en el control del transporte de hexosas. Para profundizar en el estudio funcional del parálogo ASR1 en Solanáceas, se evaluaron plantas de tabaco y tomate que sobreexpresan y silencian Asr1 desde una perspectiva metabólica, fisiológica y molecular. El estudio de las plantas de tabaco silenciadas mostró que tienen alteraciones en los niveles foliares de glucosa así como disminuciones en los niveles de expresión del transportador de hexosas Ht1. Asimismo, esas mismas plantas muestran modificaciones en los niveles de las hormonas ABA y giberelinas. Por el contrario, el principal efecto metabólico observado en los frutos de tomate es a nivel del metabolismo de los aminoácidos. Los niveles de expresión de los genes asociados a vías de respuesta frente a estrés en los frutos de las líneas silenciadas sugieren que ASR1 reprime esas vías en esos tejidos. Asimismo se encontraron evidencias que indican que ASR1 estaría relacionado con el metabolismo de la pared celular y con la vía de las citoquininas en los frutos de tomate. En conclusión, ASR1 está involucrado en el metabolismo primario, hormonal y en vías de respuesta a estrés en las Solanáceas estudiadas.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 218 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Ruggiero, Melina
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2016-03-23

Descripción: PER-2 fue históricamente la segunda ß-lactamasa de espectro extendido plasmídica más frecuente en aislamientos clínicos de enterobacterias en Argentina. Si bien no se han reportado variantes mutacionales de PER-2, debido a las constantes presiones selectivas ejercidas por el uso masivo de antibióticos e inhibidores, y a los antecedentes de evolución en otras enzimas, nos planteamos si la misma puede evolucionar y modificar sus aptitudes hidrolíticas y/o ser menos susceptible a la inhibición. Por modelados computacionales se pudo apreciar que Arg220 de PER-2 ocupa estructuralmente un espacio equivalente a Arg244 en TEM-1/SHV-1. Ya que en enzimas resistentes a inhibidores derivadas de TEM/SHV la sustitución en Arg244 es suficiente para conferir el fenotipo resistente, se postula que modificaciones en Arg220 de PER-2 podrían tener un efecto similar. También postulamos que Thr237, cercana a Arg220 según nuestros modelos, tendría un potencial papel en la estructura-función de PER-2. En el presente trabajo se realizó la caracterización bioquímica de variantes mutacionales en posiciones 220 y 237 obtenidas in vitro determinando la participación de estos residuos en la hidrólisis e inhibición, la resolución de la estructura cristalográfica de PER-2 y la caracterización preliminar de un plásmido portador del gen blaPER-2.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 182 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Roca Acevedo, Gonzalo
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2015-04-07

Descripción: La enfermedad de Chagas es una zoonosis transmitida al hombre por Triatoma infestans, un insecto hematófago que se encuentra en América Central y América del Sur. El control de este insecto depende principalmente del uso de insecticidas. Sin embargo en lo últimos años aumentó en Argentina y Bolivia los informes del fracaso de los rociados con insecticidas asociados a resistencia a insecticidas piretroides. Si bien existen algunos trabajos sobre expresión y mecanismos de resistencia en ninfas de T. infestans, existen muy pocos estudios sobre la expresión de la resistencia en huevos de poblaciones resistentes, y no existe estudios sobre la expresión de la resistencia a lo largo del desarrollo embrionario y sus posibles causas. El objetivo de este trabajo de tesis fue analizar la expresión de resistencia a deltametrina en el huevo en desarrollo de dos poblaciones de campo provenientes de Campo Largo-Argentina, y Entre Ríos-Bolivia. Además analizar los mecanismos enzimáticos y moleculares potencialmente asociados con la resistencia a deltametrina durante el desarrollo embrionario. Las ninfas de ambas poblaciones de campo mostraron niveles altos de resistencia a deltametrina comparadas con la población susceptible de referencia (Entre Ríos: 173x y Campo Largo: 1.108X) Los grados de resistencia a deltametrina estimados para ambas poblaciones resistentes en huevos de 4, 7 y 12 días de desarrollo, indicaron que la resistencia se expresa desde el desarrollo temprano en huevos de T. infestans, y que a lo largo de todo el desarrollo embrionario los niveles de resistencia fueron mayores en Campo Largo que en Entre Ríos (1.144x, 1.193x y 822x para Campo Largo y 21x, 15x y 39x para Entre Ríos). Tanto para la población de referencia como para las poblaciones de campo, la efectividad de la deltametrina fue menor en huevos de 12 días respecto a huevos de 4, y 7 días de desarrollo. La actividad de las enzimas monooxigenasas P-450 no mostró incremento significativo en las poblaciones resistentes. Este resultado sugiere que no es un mecanismo contributivo a la resistencia a deltametrina. O bien que la metodología empleada no permitió detectar un incremento de alguna fracción de ese complejo enzimático. La actividad de piretroide-esterasas mostró un incremento durante el desarrollo embrionario de todas las poblaciones estudiadas, siendo los valores más altos de actividad los correspondientes a huevos de 12 días. La actividad promedio se incrementó de 13,60 a 16,27, y a 22,21 picomoles de 7- hidroxicumarina/minuto (7-OHC) en huevos de 4-, 7-, y 12 días de la población de referencia. Los valores medios para las poblaciones resistentes fueron de 16,17, 21,44 y 26,14 picomoles de 7- OHC/minuto en el caso de Entre Ríos, y de 16,04, 17,98 y 28,87 picomoles de 7-OHC/minuto para la población Campo Largo en huevos de 4-, 7- y 12 días respectivamente. Los estudios moleculares detectaron la presencia de la mutación kdr (knockdown resistance) L1014F en las dos poblaciones de campo, indicando que el sitio de acción alterado es un mecanismo de resistencia a deltametrina en las poblaciones de campo estudiadas. La mutación kdr L925I descripta en otros hemípteros no fue detectada en ninguna de las poblaciones estudiadas. Los resultados de este trabajo de tesis, demuestran que la resistencia a deltametrina expresada en huevos en desarrollo, se deben en parte a la mayor actividad de las piretroide-esterasas y a la modificación del sitio de acción. El avance del conocimiento sobre los mecanismos de resistencia a insecticidas involucrados, permitirán optimizar las campañas de control de T. infestans, vector de la enfermedad de Chagas.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 176 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Dellafiore, María Andrea
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2017-11-02

Descripción: Los oligonucleótidos cuya función se encuentra asociada a procesos catalíticos o de reconocimiento molecular se los conoce como oligonucleótidos funcionales (ribozimas, DNAzimas, aptámeros) y sus aplicaciones abarcan el silenciamiento génico, el desarrollo de herramientas de diagnóstico y sensores, la biocatálisis y la nanotecnología. En este trabajo se estudió cómo optimizar el uso de estos oligonucleótidos mediante la incorporación de modificaciones químicas. Inicialmente, se estudió el efecto modulador de 2?-desoxi-2?-C-metilpirimidín nucleósidos sobre: la actividad hidrolítica y estabilidad en medios biológicos de la DNAzima 8-17 al ser incorporados en distintas posiciones de su núcleo catalítico; la potencia silenciadora y la especificidad de siRNAs al ser incorporados en distintas posiciones de las cadenas antisentido y sentido; la estabilidad termodinámica de oligonucleótidos de ADN formadores de dúplex e i-motif. Por último, se amplió el estudio a la DNAzima peroxidasa utilizando el oligonucleótido modificado en su totalidad con L-nucleótidos y el oligonucleótido inmovilizado, empleando un amplio repertorio de sustratos, entre ellos sulfuros y paracetamol.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 273 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Binaghi, María Julieta
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2014-12-10

Temas:   Ciencia de la vida   -  Método InVitro   -  Hierro   -  Zinc   -  Calcio   -  Grupos Vulnerables

Descripción: Se evaluó el aporte potencial de hierro, calcio y zinc en alimentos y/o dietas destinados a diferentes grupos vulnerables: niños entre 6 meses y 2 años, embarazadas y adultos mayores de contextos socioculturales diversos. Se analizaron dietas caseras, alimentos de planes sociales, alimentos comerciales y regionales y matrices alimentarias no tradicionales. El aporte potencial se calculó en base al contenido total y la dializabilidad mineral, evaluada mediante un método in vitro. Se estudió el efecto de diversos promotores (ácidos cítrico y ascórbico, Na2EDTA) e inhibidores (fitatos, polifenoles, calcio, proteínas lácteas y oxalatos) y la efectividad de distintas fuentes de hierro (sulfato ferroso, bisglicinato férrico y NaFeEDTA). El aporte potencial de los alimentos infantiles mostró diferencias significativas, debido a las interacciones en las diversas combinaciones estudiadas y con los promotores o inhibidores presentes. En los alimentos complementarios comerciales sería adecuada una reformulación. Los alimentos regionales aportan cantidades importantes de hierro y moderadas de zinc y calcio. Las harinas de plátano verde y snacks resultaron pobres aportadores de minerales. En las infusiones de yerba mate la dializabilidad de hierro fue mínima pero el ácido ascórbico podría aumentarla. Estos resultados aportarían una base apropiada para formular recomendaciones relativas a dietas de grupos vulnerables.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: unknown  (tamaño kb)  Pag. 221 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Hasenauer, Flavia Carolina
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2017-03-23

Temas:   Ciencia de la vida   -  Bovinos   -  SLC11A1   -  Resistencia   -  Polimorfismo

Descripción: La resistencia natural (R) a ciertas enfermedades se refiere a la capacidad inherente del animal de resistir la enfermedad cuando queda expuesto al patógeno que la origina. Se sabe que un componente significativo del carácter R es heredable y, si bien la R es poligénica, se ha observado que hay genes individuales que tienen un efecto mayor sobre este carácter. El gen SLC11A1, Solute Carrier Protein 1 of 11 (inicialmente denominado NRAMP1 -Natural Resistance Associated Macrophage Protein 1-) es el mejor candidato en estudios de resistencia natural a infecciones por patógenos intracelulares. En las especies pecuarias, los polimorfismos mayormente estudiados se encuentran en la región 3´ no codificante (3´ UTR) del gen SLC11A1 y están determinados por la existencia de dos microsatélites, cuyos alelos se definen por la cantidad de repeticiones cortas en tándem de un dinucleótido (guanina-timina), quedando los diferentes alelos establecidos por las longitudes de los microsatélites. En esas especies, los polimorfismos de la región 3´ UTR del gen SLC11A1 se han asociado con R a Brucella abortus en bovinos y en bubalinos, a Brucella melitensis en caprinos, a Mycobacterium avium subsp paratuberculosis en bovinos y caprinos, y a M. bovis en bovinos. En la región 3´UTR del gen SLC11A1 bovino se han identificado dos microsatélites, llamados en el transcurso de este trabajo Ms1 (microsatélite 1, el más próximo a la región codificante) y Ms2 (microsatélite 2, el más lejano a la región codificante). El objetivo general de este trabajo fue evaluar el grado de asociación de los polimorfismos en los microsatélites de la región 3? UTR del gen SLC11A1 con la R a las infecciones bacterianas intracelulares que afectan a los bovinos. En primera instancia, se analizó la frecuencia de distribución de los polimorfismos en los microsatélites de la región 3´ UTR del gen SLC11A1 en diversas razas puras de ganado bovino de las especies Bos taurus (razas Criolla, Angus, Hereford y Holando Argentina), Bos indicus (razas Brahman y Nelore) y razas cruzas B. taurus X B. indicus (Braford y Brangus). Se encontró una diferencia significativa en la distribución de los polimorfismos de la región 3´ UTR del gen SLC11A1 entre las especies bovinas y entre las razas índicas, las razas cruzas y las europeas. Coincidentemente, para ambos microsatélites, se encontró la mayor variabilidad alélica en las razas bovinas pertenecientes a la especie Bos indicus, una variabilidad intermedia en las razas resultantes de cruzas, y la menor variabilidad se detectó en las razas Bos taurus. Como dato relevante de esta investigación, se detectaron dos nuevos alelos para el Ms1 de la región 3´ UTR del gen SLC11A1: los alelos 161 y 163, y una nueva variante para el Ms2 en Holando: el alelo 177. Posteriormente, se evaluó el grado de asociación entre los polimorfismos en los microsatélites de la región 3´ UTR del gen SLC11A1 y la ausencia o presencia de infección natural (como indicadores del carácter de resistencia o susceptibilidad, respectivamente). Se llevaron a cabo estudios casos-controles en rodeos Bos taurus con alto riesgo de infección natural por brucelosis y tuberculosis. Los resultados indicaron falta de asociación (p>0,05) entre las variantes de ambos microsatélites de la región 3´ UTR del gen SLC11A1 y la ausencia o presencia de infección natural por Brucella abortus y Mycobacterium bovis en los bovinos Bos taurus analizados. Como la capacidad de los fagocitos de restringir el crecimiento intracelular de B. abortus está relacionada con la resistencia a la infección, se planteó corroborar los resultados previos mediante un estudio in vitro. Lamentablemente, la homogeneidad genotípica encontrada en los rodeos Bos taurus evaluados (la gran mayoría de los animales presentaban los genotipos 159/159 -Ms1, 100%- y 175/175 -Ms2, 96%-), impidió seleccionar animales portadores de distintos polimorfismos para la región 3? UTR del gen SLC11A1 y poder comparar la capacidad brucelicida natural de sus fagocitos mononucleares. Ante la imposibilidad de continuar con el objetivo original, el trabajo se enfocó en evaluar la influencia de los parámetros sexo, edad y vacunación con Brucella abortus S19 sobre la capacidad brucelicida natural de los fagocitos mononucleares en bovinos Bos taurus portadores de un mismo genotipo (159/159 - 175/175) para la región 3´ UTR del gen SLC11A1. Los resultados obtenidos indicaron que las hembras adultas presentaron la menor capacidad para restringir el crecimiento intracelular de B. abortus, resultando las más susceptibles al desafío in vitro con este patógeno. Además, se observó que la capacidad natural de los macrófagos para restringir el crecimiento intracelular de B. abortus, estuvo influenciada por el sexo y la madurez sexual de los animales estudiados. Como conclusión, los resultados de este trabajo no muestran asociación entre los polimorfismos en los microsatélites de la región 3? UTR del gen SLC11A1 con la resistencia natural a la infección por B. abortus y M. bovis en el ganado bovino Bos taurus.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: unknown  (tamaño kb)  Pag. 107 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Di Gregorio, Sabrina Noelia
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2015-03-10

Temas:   Ciencia de la vida   -  S Aurus   -  Varcomicina   -  Heterorresistencia

Descripción: Staphylococcus aureus es un patógeno oportunista que causa enfermedad en el hombre y en los animales. Desde 1997 se han reportado a nivel mundial cepas de S. aureus con sensibilidad disminuida a vancomicina (VISA), y cepas con resistencia heterogénea (hVISA). El mecanismo responsable de dicha resistencia aún no ha sido completamente elucidado. Sumado a esto, la detección del fenotipo hVISA es dificultosa en laboratorios clínicos. Este trabajo describe por primera vez la prevalencia y la caracterización molecular de aislamientos hVISA en un hospital de Argentina y evalúa distintas metodologías para su detección. Adicionalmente, se estudian las bases moleculares posiblemente implicadas en la susceptibilidad disminuida a vancomicina. No se encontraron aislamientos VISA y el fenotipo hVISA ocurrió en el 3,3% de las bacteriemias por S. aureus estudiadas. Se encontró una asociación entre el fenotipo hVISA y episodios múltiples de bacteriemias, y se propuso la combinación de métodos para alertar de un posible hVISA en aquellos laboratorios en donde no se puede realizar la metodología confirmatoria de rutina. La modificación en el metabolismo del peptidoglicano en cepas hVISA/VISA hallada en esta tesis podría deberse a diversos cambios genéticos. Asimismo se encontró un aumento de la transposición de IS256 asociado a dicho fenotipo.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 165 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Papalia, Mariana Andrea
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2015-12-22

Descripción: Microorganismos poco frecuentes tales como Achromobacter spp., Pseudomonas putida y Sphingobacterium spp. son recuperados cada vez con mayor frecuencia de muestras clínicas de diversos tipos de pacientes, tanto inmunocompetentes como inmunosuprimidos. Esto se debe probablemente a un incremento en la sobrevida de los pacientes, a la mejora de las técnicas de aislamiento e identificación bacteriana en el laboratorio así como a la presión ejercida por la exposición repetida a la terapia antibiótica. Achromobacter, particularmente A. xylosoxidans puede asociarse a neumonía, bacteriemia e incluso meningitis. Generalmente se presenta en pacientes inmunodeprimidos, pero también se ha descripto en pacientes inmunocompetentes. Los pacientes con fibrosis quística tienen una mayor predisposición de padecer infección por este microorganismo. La identificación certera de las especies del género Achromobacter resulta difícil y generalmente los aislamientos clínicos de dicho género son referidos como A. xylosoxidans. Asimismo, otras especies del género, diferentes a A. xylosoxidans, son habitualmente consideradas microorganismos ambientales y en escasas ocasiones fueron asociadas a infecciones en humanos. Esta dificultad en la identificación determina que no sea posible evaluar la prevalencia real y el impacto clínico de las diferentes especies, siendo necesario contar con métodos confiables y específicos para identificar de manera certera las especies de Achromobacter. Uno de los objetivos del presente estudio fue contribuir a la identificación de estas especies a través de técnicas rápidas y sencillas que permitan un rápido diagnóstico y la implementación de terapias adecuadas. Hemos evaluado la eficiencia de diferentes técnicas feno y genotípicas empleadas en la identificación de aislamientos de Achromobacter spp. Las técnicas basadas en la secuenciación de múltiples alelos (MLST) y la secuenciación de nrdA resultaron las más apropiadas para arribar a la correcta identificación de las especies de Achromobacter. Asimismo, como parte de este trabajo, hemos descripto la presencia de nuevos genes blaOXA, ubicuos y específicos de A. ruhlandii, A. insuavis y A. dolens, que resultaron útiles en la identificación, constituyendo marcadores especie específicos. La correcta identificación de las especies de Achromobacter ha permitido reportar el hallazgo de especies diferentes a A. xylosoxidans en muestras clínicas, tales como A. ruhlandii, A. dolens, A. spiritinus, A. marplatensis, A. insolitus, A. spanius, A. pulmonis. Achromobacter spp. presenta naturalmente multirresistencia a antibióticos como muchos ?-lactámicos de amplio espectro, fluoroquinolonas, aminoglucósidos y trimetoprima-sulfametoxazol. En este trabajo se reporta la emergencia de aislamientos que presentaron resistencia a carbapenemes, cuyos mecanismos fueron parte del estudio. Distintos ensayos indicaron la presencia de una enzima con actividad de carbapenemasa. Se caracterizó una de las enzimas identificadas en el estudio, OXA-258a, la cual no sería responsable de dicha resistencia. Asimismo se identificó una nueva enzima de tipo AmpC, la cual se pretende caracterizar. Si bien son poco frecuentes, en este estudio hemos caracterizado dos brotes debidos a aislamientos de Achromobacter genogrupo 20, identificando en uno de ellos el posible nexo epidemiológico. Cabe señalar la importancia de contar con herramientas que permitan un rápido análisis de estas situaciones con el fin de instaurar medidas tendientes a evitar la diseminación de este microorganismo. Las especies del género Sphingobacterium son bacilos gram negativos no fermentadores ubicuos en la naturaleza, y que rara vez producen infecciones en humanos. Los carbapenemes resultan activos frente a aislamientos de este género si bien hemos detectado en este estudio la emergencia de cepas con resistencia disociada (resistentes a imipenem y sensibilidad a meropenem). Se evidenció que esta resistencia podría deberse a la pérdida o disminución de la expresión de una proteína de membrana externa (OMP) de aproximadamente 50 kDa, la cual se intentó identificar por distintas metodologías. La proteína fue digerida y los péptidos resultantes se analizaron mediante MALDI-TOF. Aún no se ha podido dilucidar la secuencia completa de la proteína dado que hasta el momento en la base de datos empleada no existe ninguna proteína que comparta cierto grado de identidad. Pseudomonas putida es un bacilo gram negativo no fermentador que se encuentra con frecuencia en el medio ambiente. Sin embargo, durante las últimas tres décadas, se ha reportado como agente causal de diferentes infecciones asociadas al cuidado de la salud. La resistencia a carbapenemes es infrecuente en esta especie y no se ha reportado previamente la resistencia disociada a estos agentes. Se estudiaron 3 aislamientos de P. putida, recuperados de pacientes internados que presentaron resistencia a meropenem y sensibilidad a imipenem. Se estudió fenotípicamente la expresión de bombas de eflujo empleando inhibidores y se evaluó el nivel de expresión de la bomba de eflujo ArpABC por RT-PCR. Se determinó que la sobreexpresión de la misma podría contribuir a la resistencia a meropenem en aquellos aislamientos de P. putida que presentan resistencia disociada a carbapenemes, similar a lo observado para los sistemas de eflujo en Pseudomonas aeruginosa.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: unknown  (tamaño kb)  Pag. 264 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Scheps, Karen Gabriela
2015-04-29

Temas:   Ciencia de la vida   -  Hemoglobinopatías   -  Talasemia   -  Genética

Descripción: Se analizaron más de 700 muestras de pacientes con fenotipos hematológicos portadores de hemoglobinopatías estructurales, de talasemias menor, mayor y no transfusión dependiente.nSe actualizó la frecuencia de ?-talasemia en 417 familias: 9 mutaciones se describieron por primera vez en Argentina.nSe caracterizaron 5 mutaciones con fenotipo de talasemia dominante: Hb Durham-N.C., y 4 nóveles: Hbs Tavapy(HBB:c.182_187delCTCATG), JC-Paz(HBB:c.34_42delGTTACTGCC), Wilde (HBB:c.270_273delTGAG) y Patagonia(HBB:c.296_297dupGT).nLas deleciones son las mutaciones ?-talasémicas más frecuentes (-?3,7, --MEDI, --CAL/CAMP y ?SEA). Se detectaron 3 deleciones nóveles: --BA, --PA y --LU, esta última en un paciente con retraso mental y rasgos de ATR-16. Se caracterizaron mutaciones puntuales, 3 nóveles: HBA1:c.301-2A>T, HBA1:c.187delG(p.W62fsX66) y HBA1:c.237delC(p.Asn78Lysfs*6).nLa Hb S fue la hemoglobinopatía estructural prevalente y en forma esporádica se detectaron hemoglobinas inestables, con afinidad aumentada por el oxígeno y metahemoglobinas.nSe hicieron estudios de asociación genotipo-fenotipo para marcadores asociados a variación de Hb F.nEn pacientes con talasemia intermedia, se estudiaron modificadores primarios, secundarios y terciarios. Se detectaron 2 duplicaciones del cluster de ?-globina, una caracterizada por array-CGH, ((arrChr16(16p13.3; 88165- 230724)x3).nSe confeccionaron perfiles genotipo-fenotipo, y algoritmos de trabajo para la caracterización molecular.nSe espera que estos conocimientos sean en beneficio de las familias afectadas.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 295 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Vitali, Victoria Andrea
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2017-05-11

Temas:   Ciencia de la vida   -  Estrés salino   -  Biofísica   -  Plantas   -  Potencial Hídrico   -  Interruptor

Descripción: El flujo de agua en la raíz se describe como un circuito hidráulico donde la vía celular es poco conductora que no evidencia las propiedades de las membranas biológicas (selectividad y especificidad). En esta tesis, se caracterizaron las propiedades hidráulicas de la raíz de Beta vulgaris en la respuesta a corto plazo desencadenada ante el incremento de salinidad del suelo. El órgano raíz, presentó una estrategia hidráulica en forma bimodal, supeditada a un sistema tipo interruptor (switch) mediado por el gradiente de potencial hídrico (??????? ????? ). En cambio, a nivel celular la capacidad de transporte de agua de la raíz estaría acoplada a un transporte de solutos que resultó independiente de ??????? ?????. Estos resultados sugieren una vía celular activa en la raíz que puede sostener el flujo de agua hacia a la parte aérea, mediante un reducido apoplasto radial y el acoplamiento de flujo de agua a un mecanismo de transporte activo. De esta manera, la dirección del flujo de agua no se encuentra simplemente sujeta al gradiente de potencial hídrico y da cuenta de la existencia de mecanismos sumamente específicos para sostener y garantizar la entrada de agua desde el medio externo hacia la parte aérea.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 171 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Cercato, Magalí Cecilia
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2017-04-25

Descripción: Los receptores de glutamato NMDA (RNMDA) están involucrados en aprendizaje y formación de una nueva memoria. Son fundamentales en la codificación y ?almacenamiento? de información y necesarios en la evocación. Juegan un rol crítico en el establecimiento y mantenimiento de plasticidad sináptica y en la formación y estabilización de las sinapsis durante el desarrollo. Los RNMDA son heterotetrámeros compuestos por dos subunidades GluN1, obligatorias para el ensamblado, y dos subunidades regulatorias: GluN2 (A, B. C o D) o GluN3 (A o B). GluN2A y GluN2B son las subunidades regulatorias más abundantes en telencéfalo, especialmente en regiones del SNC relacionadas con memoria y aprendizaje, como hipocampo, amígdala y corteza prefrontal (CPF). En este trabajo de Tesis, nos propusimos evaluar si la adquisición de distintos tipos de aprendizaje y la inducción de plasticidad sináptica producían cambios en los niveles de las subunidades GluN1, GluN2A y GluN2B del RNMDA. En la primera parte, se analizaron posibles cambios en las subunidades del RNMDA durante la consolidación y luego de la evocación de una memoria. Se entrenaron ratas Wistar en distintos paradigmas: habituación al campo abierto (CA), reconocimiento de objetos (RO) y localización espacial de objetos (LO). Luego del entrenamiento o del testeo, los animales fueron eutanasiados y se extrajeron hipocampo, CPF y amígdala para ser analizadas por western blot (WB). Los animales de 1, 2, 3 y 12 meses se habituaron al CA durante la sesión de 5 minutos. En los animales de 1, 2 y 3 meses pero no en los de 12 meses, los niveles de las subunidades GluN1 y GluN2A aumentaron en hipocampo, 70 minutos después de una sesión de CA capaz de generar habituación al ambiente. Este aumento es transitorio, ya que los niveles disminuyen significativamente, siendo indistintos del control a los 90 minutos. Por otro lado, 70 min luego de la evocación de una memoria reciente (1 día) o de una memoria remota (2 meses), hubo un aumento en los niveles de GluN1 y GluN2A en la CPF, involucrando a esta estructura en ?el almacenamiento? o ?persistencia de la traza? de esa memoria del ambiente. También hubo aumento de GluN1 y GluN2A en hipocampo, 70 min luego del entrenamiento en el CA con dos objetos novedosos (igual para RO y LO), lo que permite sugerir que podría tratarse de un mecanismo general relacionado con la formación de una memoria espacial. Por otra parte, 70 min después del test de LO, hubo un aumento de GluN1 y una disminución de GluN2B en hipocampo, mientras que no se detectaron cambios luego del testeo de RO, lo que podría ser explicado porque el RO es independiente del hipocampo (en esta etapa, en que se trata de la discriminación de objetos), mientras que LO sí depende de dicha estructura. Aunque los cambios detectados indican un posible aumento del RNMDA, aparece una disminución de GluN2B; podría tratarse de un mecanismo diferente relacionado con la formación de una memoria espacial sobre un ?engrama similar?. En la segunda parte, evaluamos el efecto de la inducción de plasticidad sináptica en los RNMDA, utilizando un modelo in vitro. Cultivos primarios de neuronas hipocampales (14DIV) fueron estimulados mediante pulsos de KCl. Las neuronas fueron fijadas a distintos tiempos y se evaluaron las subunidades del RNMDA mediante inmunofluorescencia. Comprobamos que existen aumentos de GluN1 y Glun2A similares a los observados in vivo. Sin embargo, dada la compartimentalizacion en la expresión proteica, el análisis de este aumento debe ser considerado por separado, ya que también los mecanismos moleculares involucrados son distintos según la subunidad y el compartimiento analizado. a. En somas, similar a lo observado in vivo, el aumento resulta significativo a los 70 min del estímulo, b. mientras que en dendritas, el aumento ocurre a partir de los 30? para GluN2A y de los 45 min para GluN1. c. En ambos compartimientos, a los 90 min los valores fueron similares a los controles, mostrando su carácter transitorio. d. El aumento de GluN1 en el soma, depende principalmente de: síntesis de novo de mensajeros y de traducción, mientras que a nivel de dendritas, depende de movilización desde pooles ya traducidos, retenidos en el RE a ese nivel. e. El aumento de GluN2A en el soma depende exclusivamente de traducción de mensajeros silenciados, mientras que en las dendritas, el aumento a los 75 min del estímulo tiene dos componentes: transporte de receptores GluN2A-RNMDA ya ensamblados y traducción de mensajeros locales silenciados. Estos aumentos, así como los aumentos in vivo, fueron transitorios, ya que disminuyeron a niveles no diferentes del control a los 90 min, tanto en dendritas como en los cuerpos neuronales. Los resultados in vivo e in vitro muestran que, luego de inducción de plasticidad o luego de un aprendizaje espacial novedoso, hay incremento de las subunidades GluN1 y GluN2A en hipocampo con curso temporal semejante, lo que permite hipotetizar que: ?habría un aumento en los RNMDA posiblemente conteniendo GluN2A, que podría actuar como una señal duradera, contribuyendo a marcar sinapsis involucradas (tagging?), dando lugar al establecimiento y mantenimiento de la plasticidad sináptica, que constituiría parte de la traza de una nueva memoria.? Como última parte, desarrollamos vectores derivados de virus adeno-asociados (AAV), capaces de codificar para un short-hairpin RNA (sh-RNA) anti- GluN2A (sh2A). Pudimos demostrar que la infección con el vector AAV-sh2A disminuyo la expresión de GluN2A, por lo que constituiría una herramienta útil para el estudio de los RNMDA conteniendo GluN2A, tanto in vitro como in vivo. Además, observamos que la disminución de GluN2A en las neuronas transducidas, produjo aumento del número total de espinas, principalmente de espinas inmaduras.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 111 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Soprano, Luciana Lía
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica

Descripción: Para llevar a cabo este estudio, se purificaron los antígenos a homogeneidad, se sometieron a tratamientos de desulfatación y se inmunizaron conejos y ratones con las moléculas tal cual y desulfatadas. La cruzipaína, cisteína proteinasa principal de Trypanosoma cruzi, contiene oligosacáridos sulfatados de alta manosa como componentes de esta glicoproteína. Hemos determinado previamente que estos grupos sulfato son blancos de respuestas inmunes específicas. Con el fin de evaluar los requerimientos estructurales para el reconocimiento inmune y teniendo en cuenta que el epitope de Cz sulfatado aislado no esta disponible en cantidades suficientes para desarrollar estudios sistemáticos de estructura-actividad, llevamos a cabo un análisis indirecto de las características químicas necesarias para la unión de los anticuerpos al epítope sulfatado de la Cz mediante inmunoensayos. Con este objetivo, diferentes moléculas sintéticas fueron acopladas a la/las proteínas BSA y aprotinina y confrontadas con: i) sueros de ratones específicos para Cz y C-T, ii) anticuerpos producidos en conejos inmunizados con Cz y C-T , y iii) IgGs purificadas a partir de sueros de pacientes con Enfermedad de Chagas crónica. Nuestros resultados indicaron que una glucosamina conteniendo un grupo sulfato esterificado en posición O-6 y un grupo N-acetilo fue el epítope preferido para el reconocimiento inmune del suero específico para Cz y su dominio Cterminal. Si bien en menor grado, otros compuestos que contienen diferentes grupos aniónicos cargados fueron también reconocidos. Finalmente, nuestros hallazgos mostraron que la afinidad del C-T por los anticuerpos IgGs purificados de suero de ratón específico para este dominio, así como también de sueros de pacientes con Enfermedad de Chagas es inhibida por el azúcar sintético aniónico NAcGlc6SO3, evidenciando que estos motivos carbohidrato sulfatados juegan un rol central en la unión de este antígeno mayoritario a sus anticuerpos específicos, imitando al epitope sulfatado de la Cz ubicado en los N-glicanos de la extensión C-terminal de la molécula de Cz. La caracterización del epítope sulfatado de la cruzipaína hizo posible el estudio de una serie de inmunizaciones con el dominio C-T, el epítope sulfatado y con IgGs sulfato-específicos. Se inmunizaron ratones BALB/c con C-T y C-Td. Los inmunizados con C-T mostraron relación IgG2a/IgG1<1, bajos niveles de IL-4 y elevada concentración de IFN-?.por ELISA de captura usando C-T como estímulo y un perfil de citoquinas compatible con una respuesta mixta con tendencia Th2 con niveles excesivamente elevados de IFN? e IL-17. Los inmunizados con C-Td presentaron una IgG2a/IgG1<1; IL-4 indetectable, bajo nivel de IFN-? y un perfil de citoquinas similar al control con IL-10 significativamente elevado. Se observaron alteraciones ultraestrucurales cardíacas y mayor inmunoreconocimiento de fibrillas y mitocondrias en inmunizados con C-T con suero policonal anti-Cz y anti-Cz/d ads con miosina. Luego del desafío subletal se observaron parasitemias elevadas. La mortalidad fue del 20% en inmunizados con C-T y 80% en inmunizados con C-Td, observando severas alteraciones musculares en los sobrevivientes del grupo C-Td. Se acopló a BSA NAcGlc6SO3 y NAcGlc. Los inmunizados con BSA-NAcGlc6SO3 montaron una respuesta inmune con predominio de IgG1 e IgG2b seguido de IgG2a, y respuesta celular T de memoria, mientras en el grupo BSANAcGlc predominó IgG2a. Luego de la infección subletal, los inmunizados con el epítope sulfatado desarrollaron parasitemias excesivamente elevadas y niveles similares de IFN-? que el grupo BSANAcGlc que presentó ~70 % de mortalidad. Se purificaron IgGs a partir del suero de los inmunizados con BSA-NAcGlc6SO3 y de ratón pre-inmune y se hizo tratamiento por tranferencia pasiva de anticuerpos. Los ratones que recibieron IgGs sulfato-específicos presentaron alteraciones ultraestructurales en tejido cardíaco. Luego del desafío, los que recibieron IgGs sulfato-específicos presentaron mayores parasitemias que los controles. Se determinó la variación de los nivesles de IgG2 sulfato específicos en pacientes con enfermedad de Chagas crónica durante la progresíon de la enfermedad cardíaca. Los ensayos realizados permitieron evaluar el rol de los epítopes sulfatados presentes en glicoconjugados de T. cruzi en la infección y patogenia de la enfermedad de Chagas.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 257 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Spiaggi, Alejandro Javier
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2014-10-29

Temas:   Ciencia de la vida   -  Equilibrio Iónico   -  Células   -  Sodio   -  Potasio

Descripción: La Na+/K+-ATPasa es una enzima multimérica integral de la membrana plasmática de células animales. Su función es catalizar el trasporte activo de tres iones Na+ desde el citoplasma hacia el medio extracelular y de dos iones K+ en sentido inverso, empleando la energía proveniente de la hidrólisis de una molécula de ATP. Como consecuencia de su actividad, la Na+/K+ ATPasa juega un papel esencial en la homeostasis celular y diversos procesos de transporte.nDurante su funcionamiento la enzima alterna entre dos conformaciones (E1 y E2) que exponen sitios de unión hacia los lados intracelular y extracelular de la membrana, respectivamente, y que difieren en su afinidad por el Na+ y el K+. El transporte de los iones requiere que en algún momento éstos se encuentren ?ocluidos?, es decir, que sean inaccesibles desde ambos lados de la membrana. La liberación del K+ ocluido en E2 es el paso limitante del ciclo de reacciones, y es acelerada marcadamente por la unión de ATP a un sitio de baja afinidad, sin ser hidrolizado.nLa acción moduladora del ATP sobre la desoclusión de K+ ha sido extensamente estudiada, aunque en condiciones experimentales dispares. Por otro lado, se cuenta con información escasa y contradictoria sobre el efecto del nucleótido sobre la reacción inversa, que conduce a la oclusión de K+ a través de la llamada ruta directa, ya que la elevada velocidad de las reacciones involucradas limita el espectro de técnicas aplicables a su estudio. Como consecuencia, no se han propuesto modelos cinéticos detallados que expliquen de forma integral cómo el ATP ejerce sus efectos modulatorios, y que contribuyan a describir los pasos involucrados en el transporte de K+ en presencia del nucleótido.nCon el objeto de resolver esa falencia, en este trabajo nos hemos propuesto caracterizar cinéticamente tanto la desoclusión de Rb+ (uncongénere del K+) comosu oclusión a través de la ruta directa, en un amplio intervalo de concentraciones de Rb+ y de ATP. Para ello se empleó una técnica desarrollada en nuestro laboratorio que permite el estudio de reacciones en el rango de los milisegundos. Los experimentos mencionados se complementaron con el análisis de las modificaciones que el ATP induce en la cantidad de Rb+ ocluido en condiciones de equilibrio.nLos resultados mostraron que el ATP cambia de hiperbólica a sigmoide la curva de Rb+ ocluido en el equilibrio versus , induciendo a su vez una disminución de la afinidad aparente por el catión sin alterar la capacidad de oclusión de la Na+/K+ ATPasa. La cantidad de Rb+ ocluido extrapolada a una concentración infinita del catión correspondió a 2 moles de Rb+ por mol de enzima activa independientemente de la concentración de ATP.nLas curvas de incremento en el tiempo de la cantidad de Rb+ ocluido, tanto en presencia de ATP como en su ausencia, presentaron dos fases mayoritarias y alcanzaron un valor de equilibrio en aproximadamente un minuto. De dichas fases, la más rápida fue la de mayor amplitud, siendo esto más marcado en medios de reacción con ATP, y estuvo asociada a la oclusión de más de un Rb+. El nucleótido produjo una disminución o un aumento de la velocidad inicial de oclusión cuando la concentración de Rb+ fue menor o mayor que 500 ?M, respectivamente. No obstante, en todos los casos la velocidad de la segunda fase de oclusión fue mayor en presencia de ATP.nLa desoclusión de Rb+ en ausencia de ATP se produjo a lo largo de curvas bifásicas de amplitudes similares, compatibles con una liberación secuencial y ordenada de los cationes. El ATP hizo que se perdiera esa secuencialidad y que ambos cationes fueran liberados rápidamente, independientemente del sitio de oclusión que ocupaban. Se consiguió una adecuada descripción de la información experimental con un modelo que propone que la oclusión del Rb+ puede ocurrir desde accesos intra o extracelulares. En el primer caso la unión a los sitios ocurre al azar, mientras que en el segundo es secuencial y ordenada existiendo un paso lento entre la unión de ambos cationes. La unión de ATP a la enzima promueve el cambio conformacional E2 ? E1, desfavoreciendo la oclusión y favoreciendo la desoclusión de Rb+.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 234 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Rossi, Andrés Hugo
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2016-03-31

Temas:   Ciencias de la salud   -  BLS   -  Persistencia   -  Humoral   -  Lumazina sintasa   -  Brucella spp.

Descripción: La lumazina sintasa de Brucella spp. (BLS) es una proteína homodecamérica altamente estable y con la capacidad de activar células dendríticas vía TLR4. Puede ser utilizada para generar quimeras decaméricas insertando la secuencia de péptidos en cada monómero. La inmunización con estas quimeras induce una respuesta humoral fuerte y persistente anti-BLS y anti-péptido; de esta manera BLS constituye un excelente carrier. En el presente trabajo estudiamos la persistencia de BLS en el animal inmunizado y su procesamiento antigénico como parte de las características que pueden otorgar a esta proteína la capacidad de inducir tan extensa respuesta humoral. Se demostró que BLS se asocia a la membrana plasmática de las células dendríticas, ingresa vía macropinocitosis y colocaliza con TLR4. BLS se procesa principalmente por la vía para antígenos exógenos, pero una porción menor no se asocia a esa vía. BLS persiste in vitro por 96 hs en un mayor número de células dendríticas que un antígeno control y persiste en las células del ganglio drenante aún 14 días p.i. La persistencia de BLS in vivo resulta significativamente mayor a la del antígeno control, sin embargo no justificaría la persistencia de la respuesta humoral. El aporte del presente trabajo contribuye al entendimiento de los procesos inmunológicos que permiten a BLS actuar como carrier y constituye una potente herramienta para el diseño y mejoramiento de plataformas de vacunas en desarrollo.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 139 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Alechine, Evguenia
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2014-12-10

Temas:   Ciencia de la vida   -  Cromosoma Y   -  AZF   -  Infertilidad masculina

Descripción: El estudio de microdeleciones en la región AZF del cromosoma Y se solicita de rutina a pacientes azoospérmicos u oligozoospérmicos severos, para predecir la recuperación de espermatozoides mediante biopsia testicular. En distintas poblaciones se ha demostrado variación en la prevalencia y efecto de estas microdeleciones. Con el objetivo de estudiar a la población argentina, se analizaron 240 hombres fértiles del haplogrupo Q3, 170 pacientes infértiles y 90 azoospérmicos. A partir de los resultados obtenidos, se descartaron deleciones constitutivas en el haplogrupo Q3, así como la asociación entre deleciones parciales y disminución del recuento espermático. Se observó una prevalencia del 11,1% de microdeleciones completas que se correlacionaron con alteraciones severas del recuento espermático, independientemente del haplogrupo del paciente. Sin embargo, las deleciones parciales se correlacionaron con determinados haplogrupos sin efecto patogénico. Únicamente las deleciones AZFbc y AZFabc presentaron ausencia de espermatozoides a nivel testicular. La existencia de pacientes azoospérmicos sin deleciones indicaría que existen otros factores que afectan la espermatogénesis. Dado que no es posible predecir la recuperación de espermatozoides empleando únicamente los marcadores recomendados, el presente trabajo culminó con el desarrollo de una herramienta para la detección de genes candidatos de la espermatogénesis. La identificación de nuevos marcadores permitirá tomar decisiones clínicas apropiadas y asesorar genéticamente a la pareja infértil.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: unknown  (tamaño kb)  Pag. 202 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Di Leo Lira, Paola
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2016-10-06

Descripción: El cedrón (Aloysia citrodora) es la especie aromática nativa más difundida en el mundo. La fracción volátil es una de sus características más destacadas. El principal componente de su aceite esencial (AE) es el citral, que, junto con el limoneno, son los responsables del olor característico. Desde el punto de vista de su uso medicinal, es también muy importante la fracción no volátil. El verbascósido, compuesto mayoritario, ha sido determinado como uno de los responsables de sus distintas bioactividades. El desarrollo de este trabajo permitió conocer la variabilidad fitoquímica en poblaciones silvestres y cultivadas en la Argentina y establecer parámetros de calidad para sus diferentes usos. Se determinó la composición química de AE de 135 muestras por cromatografía GC-MS. Observando las diferencias en los perfiles cuali-cuantitativos, fueron agrupadas en 6 quimiotipos. El compuesto sabinona fue aislado e identificado por primera vez en un AE. Se determinó el contenido de verbascósido por HPLC en 52 muestras. El resultado promedio fue 2.1% P/P. Con esta información se espera contribuir con la redacción de normas de calidad para el cedrón argentino, las que favorecerán la elección del material genético para cultivo, permitiendo un buen manejo agrícola y compitiendo con la oferta de otros países.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: unknown  (tamaño kb)  Pag. 191 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Cutrullis, Romina
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2015-10-13

Descripción: La enfermedad de Chagas, causada por el parásito Trypanosoma cruzi, se caracteriza por una intensa miocardiopatía inflamatoria, cuya fisiopatogenia aún no se conoce acabadamente. Nuestro objetivo fue examinar la contribución de distintos mediadores inflamatorios a la inmunopatogénesis de la miocardiopatía chagásica y evaluar el efecto modulador que el tratamiento etiológico con benznidazol pudiera ejercer sobre estos mediadores y la patología inflamatoria. Estudiamos factores potenciales de patogenia chagásica inexplorados, como la citoquina proinflamatoria MIF, analizando su relevancia biológica en el modelo animal y en pacientes infectados con distinto grado de compromiso cardíaco. Los resultados obtenidos indican que las citoquinas y quimioquinas proinflamatorias y sus receptores específicos participan en los mecanismos inmunopatogénicos de la miocardiopatía chagásica crónica. Particularmente, destacamos el rol de MIF que, más allá de resultar fundamental para la protección en la etapa aguda de la infección por T. cruzi, mediante su persistente inducción se asocia con la evolución hacia las formas más severas de disfunción cardíaca por enfermedad de Chagas. El potencial inmunomodulador del tratamiento con benznidazol durante la fase crónica podría ayudar a equilibrar los niveles de MIF y la patología inflamatoria en esta etapa de la infección, limitando así el riesgo de daño cardiovascular a largo plazo.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 162 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Ramírez Gómez, Juan Carlos
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2017-12-21

Descripción: Las poblaciones naturales de Trypanosoma cruzi, agente etiológico de la enfermedad de Chagas, están compuestas por múltiples clones. Se ha postulado que el polimorfismo genético de T. cruzi podría estar implicado en su respuesta diferencial a drogas. En este trabajo se caracterizó la variabilidad genética de las poblaciones de T. cruzi detectables en pacientes crónicos antes y después del tratamiento con diferentes drogas tripanocidas . Un método estandarizado de qPCR fue utilizado como marcador de falla terapéutica y sólo se incluyeron pacientes con resultados positivos en el tamizaje. Las muestras qPCR positivas pre- y pos-tratamiento fueron caracterizadas mediante análisis de patrones de secuencias de ADN satélite (ADNSat) y perfiles de PCR-RFLP de las regiones hipervariables del ADN de kinetoplasto (ADNk). El BZN y el FXN mostraron un mayor efecto tripanocida que el E1224. Los pacientes refractarios al E1224 tuvieron una variabilidad tan alta en sus poblaciones de T. cruzi pre- y pos-tratamiento como la observada en los pacientes del grupo Placebo. Nuestros hallazgos sugieren que la composición genética de las poblaciones T. cruzi circulantes durante el seguimiento reflejan la fluctuación natural de poblaciones policlonales en la infección crónica.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 130 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Vidueiros, Silvina Mariela
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2015-07-14

Descripción: Frente a la posibilidad de que la quinoa (Chenopodium quinoa Willd) vuelva a ser un cultivo de importancia para pequeños agricultores, se propuso realizar la caracterización nutricional del germoplasma nativo de quinoa del Noroeste Argentino y analizar el efecto provocado por el consumo de quinoa sobre el estado nutricional a través del estudio de la composición corporal y ciertos parámetros inmunológicos de utilidad en estudios de nutrición, en modelo experimental, diferenciando el efecto de la quinoa como fuente proteica per se del efecto de la presencia de saponinas en la misma. Las propiedades nutricionales de las diferentes poblaciones nativas de quinoa mostraron un amplio rango de variación y fueron similares, al igual que la calidad proteica, a las de la quinoa cultivada en otros países de Latinoamérica, aportando datos nacionales para las tablas de composición de alimentos. La administración de dieta a base de quinoa con saponinas impactó negativamente en el consumo de dieta, provocó retraso en el crecimiento y alteración de la composición corporal de ratas al destete. Asimismo, tendría efecto sobre la respuesta inflamatoria a nivel intestinal con aumento de células goblets e interleuquina 17 en la vellosidad. La administración de dieta a base de quinoa desaponificada, como única fuente proteica, provocó menor crecimiento de los animales, disminución de los compartimentos corporales y tendencia a menor IgA total en fluidos biológicos respecto a los que recibieron dieta a base de caseína.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: unknown  (tamaño kb)  Pag. 254 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Gutiérrez, Leandro Germán
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2017-02-23

Temas:     -  LMC   -  t(9;22)   -  Cromosoma Ph

Descripción: La Leucemia Mieloide Crónica (LMC) es una enfermedad clonal de células madre hematopoyéticas (CMHs) de médula ósea (MO). La alteración citogenética característica es el cromosoma Philadelphia (Ph), producto de una translocación recíproca entre los brazos largos de los cromosomas 9 y 22 . La consecuencia molecular de esta translocación es el gen quimérico BCR/ABL1 con actividad Tirosina Kinasa (TK) no regulada. Un 10?20% de los casos de LMC presentan deleciones adyacentes a los puntos de ruptura de la t(9;22) sobre el cromosoma der(9). Estas deleciones tienen un tamaño variable que frecuentemente afecta tanto secuencias del cromosoma 9 como del cromosoma 22 y su valor pronóstico en la era de los inhibidores de TK (ITKs) es controversial.nCon el objetivo de estudiar las deleciones submicroscópicas sobre 9q34 en pacientes con LMC (n=61) y desarrollar una herramienta molecular de caracterización del rearreglo BCR/ABL1 genómico este trabajo incluye metodologías citogenéticas, cito-moleculares (FISH), de evaluación de niveles de expresión transcripcional y de análisis genómico de los rearreglos BCR/ABL1 y el recíproco ABL1/BCR (PCR Inversa, PCR de larga distancia, PCR convencional y secuenciación de Sanger).nLa frecuencia de deleciones sobre el der(9) encontrada en nuestro análisis alcanzó un 23% (14/61) del total de casos con LMC. Estos pacientes no presentaron diferencias significativas en sus características epidemiológicas y clínicas respecto a pacientes sin deleciones. Ocho de los 14 casos (57%) presentaron deleciones completas, afectando secuencias tanto de ABL1 como de BCR. Tres pacientes (21%) tuvieron deleciones que sólo afectaron secuencias de BCR y otros tres (21%) presentaron coexistencia de dos clones neoplásicos con diferentes patrones de deleción, demostrando que al menos en algunos casos, las deleciones sobre el der(9) no son un evento simultáneo a la t(9;22).nNuestro análisis, en concordancia con otros reportes, no mostró evidencia que sugiera que las deleciones sobre el der(9) promuevan inestabilidad cromosómica o que afecten los niveles de expresión de BCR/ABL1.nPara llevar adelante el análisis de haplo-insuficiencia, realizamos la evaluación de los niveles de expresión de tres genes supresores de tumor (GST) (ASS1, PTGES y SMARCB1) cercanos al punto de ruptura en el der(9). De los tres genes analizados, sólo la expresión relativa de ASS1 fue afectada significativamente por la presencia de deleciones (n=14) respecto de los casos sin deleciones (n=47) (mediana de expresión relativa, 0,07 vs 0,45, p=0,0001). Este dato constituye evidencia a favor de la hipótesis que sostiene que las deleciones sobre el der(9) afectan GSTs por el mecanismo de haploinsuficiencia.nPara evaluar si las deleciones tienen algún efecto pronóstico, comparamos los niveles de respuesta hematológica completa (RHC), citogenética mayor (RCgMa) y molecular ?3 log (RM3.0) alcanzados a los seis y 12 meses de iniciado el tratamiento con ITKs, en pacientes con y sin deleciones, no hallando diferencias significativas entre ambos grupos. Sin embargo, los valores de odd ratio (OR) mostraron cierta tendencia en los primeros seis meses de tratamiento (3,6 para RHC, de 2,6 para RCgMa, y de 4,5 RM >3 log) que disminuyó a los 12 meses (OR: RHC: 1,6; RCgMa: 1,5 y RM >3 log: 1,8), indicando que la presencia de deleciones en el der(9) podría constituir una señal de alerta (warning) a tener en cuenta en la respuesta a tratamiento con ITKs.nEl tamaño acotado del cluster de ruptura de BCR (3,3 Kb) nos permitió el diseño, desarrollo y aplicación de un abordaje basado en PCR inversa para la caracterización del reordenamiento BCR/ABL1 y su recíproco en seis pacientes con LMC al diagnóstico. Este abordaje permitió la elaboración de reacciones PCR directas de alta sensibilidad paciente-específica (PCR-PE) de gran utilidad para detectar la presencia de enfermedad mínima residual con potencial para la identificación de candidatos a iniciar protocolos de interrupción de tratamiento. La PCR-PE pudo detectar la presencia del clon neoplásico en todos los controles del tratamiento de los pacientes evaluados en paralelo por qRT-PCR mostrando una perfecta correlación entre ambas técnicas. Las características genómicas encontradas sobre los puntos de ruptura en BCR y en ABL1 (elementos Alu, motivos recombinogénicos, cicatrices moleculares) nos permitieron sugerir al menos dos mecanismos moleculares diferentes implicados en el origen de la translocación t(9;22): NHEJ (Non Homologous End Joining) en 4 casos y FoSTeS (Fork Stalling and Template Switching) en los dos casos restantes.nEl abordaje de caracterización del rearreglo genómico BCR/ABL1, constituye una mejora significativa en la costo-efectividad y rapidez para la obtención de PCR-PE, cualidad que la convierten en una metodología ideal para el análisis de la translocación t(9;22) por PCR para su integración al sistema de salud aun en países con recursos limitados.nEl conjunto de datos presentados en esta tesis indican que la LMC es una patología compleja, heterogénea desde su origen, y asociada a múltiples características que hacen de cada paciente un caso único cuya descripción completa requiere de la combinación de abordajes citogenéticos, cito-moleculares y moleculares sobre muestras de ARN y ADN genómico.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 140 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Battistone, María Agustina
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2015-03-20

Temas:   Ciencia de la vida   -  Espermatozoide   -  Capacitación   -  Fosforilación   -  Mamíferos   -  Humanos

Descripción: Los espermatozoides de mamífero son capaces de fertilizar a un ovocito sólo luego de sufrir el proceso de ?capacitación? que ocurre en el tracto femenino y que tiene como consecuencia un aumento en la fosforilación de proteínas en tirosina (Tyr), la ocurrencia de la reacción acrosomal y el desarrollo de la hiperactividad. El objetivo de esta Tesis Doctoral ha sido estudiar los mecanismos moleculares involucrados en las cascadas de señalización conducentes a la capacitación del espermatozoide de mamífero. Los resultados obtenidos indican que la capacitación implica la activación de PKA y la inactivación de serina/treonina fosfatasas a través de Tyr quinasas de la familia de Src, vías que convergen tempranamente a nivel de la fosforilación de los sustratos de PKA. Nuestros resultados también demuestran que la Tyr quinasa PYK2, regulada por calcio, sería la responsable de integrar distintas señales río abajo de PKA, conducentes tanto a la fosforilación en Tyr como al estado funcional del espermatozoide. Considerando que la capacitación requiere la liberación de ?factores decapacitantes? entre los cuales se encuentra la proteína epididimaria CRISP1 (Cysteine Rich Secretory Protein 1) identificada por nuestro grupo, estudiamos las vías de señalización por las cuales esta proteína regula la capacitación. Nuestros resultados utilizando CRISP1 purificada y ratones ?knockout? para dicha proteína desarrollados en el laboratorio, muestran que CRISP1 inhibe los principales canales de calcio presentes en el espermatozoide de mamífero, regulando la capacitación y el desarrollo de la hiperactividad. En conjunto, estos estudios contribuyen al esclarecimiento de los mecanismos moleculares por los cuales los espermatozoides adquieren su capacidad fertilizante y al futuro desarrollo de métodos de regulación de la fertilidad y tratamiento de la infertilidad humana.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 236 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Romano, Raquel Susana Renée
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2013-07-12

Descripción: A medida que avanzan los conocimientos y la competencia en el mercado internacional de vinos, aumentan las exigencias en cuanto a la certificación de la calidad de los mismos. En la actualidad, a nivel internacional no solo se exige que el vino sea elaborado exclusivamente a partir del jugo de uva fermentado, sino que se incluye dentro de esta exigencia los conceptos de certificación varietal y certificación del origen geográfico y cobra mayor importancia determinar si el ?Terroir? de los vinos le otorga características especiales que los distinga de otros vinos del mismo cultivar provenientes de otras zonas geográficas. Por estas razones es necesario establecer procedimientos analíticos de clasificación, diferenciación varietal y geográfica, no solo para la defensa de las exportaciones sino también para proteger las transacciones de los productores de uvas ante los elaboradores de vinos. En la presente tesis se logró optimizar un método de extracción, concentración y cuantificación mediante cromatografía gaseosa, de 73 componentes volátiles que forman parte de los aromas del vino. La caracterización analítica del perfil aromático de los vinos permitió determinar no solo componentes volátiles mayoritarios que inciden directamente sobre la percepción de los aromas de los vinos sino aquellos que se encuentran por debajo del umbral de percepción y que inciden en la percepción global de los aromas del vino diferenciándolos no solo en cuanto a su pertenencia varietal, sino también a su procedencia geográfica. Para obtener un sistema de clasificación varietal y de procedencia geográfica de los vinos blancos se trabajó sobre muestras de vino microvinificados en idénticas condiciones de maceración en frío y fermentación alcohólica de uvas provenientes de cepajes Chardonnay, Sauvignon blanc, Cereza y Torrontés riojano, de las zonas geográficas Mendoza, Valle de Uco, Zona Este, y La Rioja para la construcción del banco de datos de vinos de variedad y origen indudable. Se contrastaron con 25 muestras comerciales de diferentes variedades y zonas geográficas referidas en sus etiquetas. Mediante análisis estadístico discriminante se logró la clasificación varietal y predicción de muestras de vinos blancos comerciales y su correspondencia con la variedad indicada en sus etiquetas. Las muestras microvinificadas clasificaron el 100 % y de las muestras de vinos comerciales, el 90 % clasificaron correctamente según la variedad declarada en sus etiquetas. Respecto del estudio para establecer la posible clasificación y predicción del origen geográfico, mediante análisis discriminante se comprobó que los vinos pudieron ser diferenciados entre las provincias de Mendoza y La Rioja. Dentro de la Provincia de Mendoza se diferenciaron 3 áreas geográficas (agrupados en Zona Mendoza, Valle de Uco y Zona Este) con el 100 % de vinos de referencia correctamente clasificados. Para demostrar la influencia del ?Terroir?, es decir si los vinos de una zona en particular fueron únicos, e incapaces de ser reproducidos en otro lugar, aun cuando la variedad y técnica de elaboración se repitan con exactitud, se realizaron estudios individuales sobre las variedades (Torrontés riojano, Chardonnay y Sauvignon blanc) implantadas en la provincia de Mendoza (Zona Este, Valle de Uco) y en La Rioja utilizando la misma metodología analítica y estadística, obteniendo como resultado que 19 componentes volátiles, que conforman un ?Terroir?, tienen una influencia determinante en la tipicidad de los vinos, a través de aromas que pueden o no ser percibidos aun cuando la variedad cultivada sea la misma. Mediante este estudio se posibilita la obtención de un sistema analítico y estadístico confiable para la aplicación de la ley de Denominación de Origen, en sus artículos referidos a Indicaciones de Procedencia (IP), Indicaciones Geográficas (IG) y Denominación de Origen Controlada (DOC) Como consecuencia del estudio anterior, se encontraron en vinos cinco componentes: trans-Anetol, p-Anisaldehído, Timol, Carvacrol y Mentol, que no tienen registradas rutas metabólicas en vinos y se los relacionó con la flora autóctona como fuente externa de procedencia. Los mismos fueron encontrados en las diferentes partes de las jarillas en altas concentraciones superando ampliamente el OAV, es decir, tienen un alto impacto odorífero ambiental. Se pudo comprobar que algunos de los compuestos volátiles que diferenciaron zonas geográficas fueron absorbidos a través de las raíces de las vides con una permanencia disímil durante 4 semanas en las partes verdes de las plantas. Se verificó la existencia en la pruina de las bayas, aunque en diferentes concentraciones, de los 5 compuestos, coincidiendo sus abundancias relativas a la mayor densidad arbustiva de las jarillas. Por medio del estudio de conglomerados se observó una relación jerárquica entre las jarillas, los viñedos, las pruinas y los vinos en cuanto a la composición y concentración de compuestos aromáticos presentes en todos ellos, existiendo además, una fuerte relación entre los compuestos hallados en vinos y pruinas con las hojas, raíces y polen de jarillas llegando a los viñedos a través del polen y sus frutos para ser luego absorbidos por raíces de las vides y también por adsorción sobre las pruinas para llegar finalmente a los vinos. Por lo que se concluye que existe una unidad de ecosistema interactivo por el traslado a través del viento del polen y sus frutos hacia la zona geográfica de influencia. Finalmente se concluye que el paisaje, entendido en este trabajo como la flora autóctona y específicamente las jarillas, integran un ?Terroir?, mediante interacciones con los viñedos a través de intercambios, contribuyendo junto con el resto de otras variables que definen un ?Terroir?, a la obtención de vinos que sean únicos e irrepetibles aun cuando la variedad de origen sea la misma.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 375 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Alvarado, Cecilia Viviana
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2014-09-09

Temas:   Ciencia de la vida   -  SRC-3   -  RAC3   -  NF-kB   -  Tumorigénesis   -  Coactivador

Descripción: RAC3 es un coactivador de la transcripción de ciertos factores y receptores nucleares que colabora en la actividad biológica de estas moléculas facilitando la expresión génica. Originalmente fue descripto como específico de receptores de hormonas esteroideas, con actividad acetilasa de histonas y la capacidad de remodelar la cromatina facilitando la expresión de genes blanco de estas hormonas. Se lo encontró sobre-expresado en tumores dependientes de las mismas y por esta razón se lo asoció a tumorigénesis hormono-dependiente. Sin embargo, años más tarde, nuestro grupo y otros investigadores hemos demostrado que RAC3 es un coactivador para otros factores de transcripción y tiene además otras funciones a nivel citoplasmático por las cuales contribuye al desarrollo tumoral de una gran variedad de tumores dependientes o no de hormonas, por lo cual hoy día se define como un oncogén. Hemos demostrado previamente que RAC3 es un coactivador de NF-?B, aumentando su actividad transcripcional, así como la expresión de algunos de sus genes blanco. Muchos de estos genes están vinculados a la respuesta inflamatoria, así como al control de ciclo celular, proliferación, expresión de moléculas de adhesión y otros responsables de la supervivencia celular, todos ellos a su vez relacionados con el proceso de tumorigénesis. Estos hallazgos motivaron la búsqueda de niveles elevados de RAC3 en otros tumores no específicamente respondedores a hormonas esteroideas y hoy día se sabe de su alto título en una gran variedad de tumores como el de hígado, páncreas, estómago y la lista crece. También demostramos que su sobre-expresión contribuye al desarrollo tumoral inhibiendo la apoptosis inducida por vía de membrana y mitocondrial, en células tumorales y no tumorales. Su acción protectora de la supervivencia se debía no solo a su actividad remodeladora de la cromatina aumentando la expresión de genes anti-apoptóticos, sino también a acciones citoplasmáticas como la regulación de actividad de kinasas y el transporte de moléculas como AIF desde la mitocondria hasta el núcleo celular, demorando su ingreso a núcleo por asociación con la maquinaria motora de citoesqueleto. A diferencia de otros oncogenes conocidos, en el caso de RAC3, su rol oncogénico no depende de la expresión de variantes por mutación, sino que, la sola sobre-expresión es suficiente. Consecuentemente, su expresión en células normales, no tumorales, es limitante y en ocasiones indetectable por técnicas habituales de determinación de proteínas. Sin embargo, sus altos niveles de expresión en tumores, en la mayoría de los casos no se debe a amplificación génica y los mecanismos que controlan su expresión aún no han sido esclarecidos. En este trabajo de tesis, se investigaron los posibles mecanismos responsables del aumento en los niveles de expresión de RAC3. Demostramos que la respuesta inflamatoria inducida por administración de LPS in vivo en ratones produce el aumento en los niveles de RAC3 en bazo y que ésto ocurre a nivel transcripcional, lo cual, además y como era esperado, fue antagonizado por glucocorticoides, dada su conocida acción anti-inflamatoria. Resultados similares fueron obtenidos in vitro por tratamiento de la línea celular HEK293 con TNF (una de las citoquinas inflamatorias inducidas por LPS in vivo). Se realizó una búsqueda de posibles secuencias regulatorias de la expresión génica de RAC3 en su promotor y encontramos sitios de unión para NF-?B, pero no para GR. Clonamos un fragmento de promotor conteniendo estas secuencias y por ingeniería genética diseñamos un plásmido en el que el promotor de RAC3 fue subclonado río arriba del gen reportero de Luciferasa. A través de estudios in vitro, por ensayos reporteros en células transfectadas con esta construcción, demostramos que TNF o una sobre-expresión de Rel-A (uno de los componentes del dímero de NF-?B) activa el promotor de RAC3. Por ensayos de inmunoprecipitación de la cromatina, confirmamos que los sitios de unión para NF-?B en el promotor de RAC3 son funcionales y que, efectivamente, la activación de la expresión génica de RAC3 inducida por la respuesta inflamatoria ocurre a través de estas secuencias que unen NF-?B. De acuerdo con las evidencias previas de inhibición de la apoptosis por una sobre-expresión de RAC3, se investigó además su posible rol en autofagia, cuyo rol en tumorigénesis es dual. En principio, el proceso opera con el objeto de eliminar desde moléculas mal plegadas hasta organelas dañadas y de este modo preservar la supervivencia celular, sin embargo, cuando ocurre de modo exacerbado puede llevar a la muerte celular. En situaciones de estrés, ayuno o falta de oxígeno a los cuales la vía de señales dependiente de mTOR es sensible, se activa la autofagia con el objeto de obtener energía para la supervivencia celular a partir del reciclado de moléculas propias. Esto es precisamente lo que les ocurre a las células menos expuestas en una masa tumoral. En estos estudios demostramos que RAC3 tiene un rol protector de autofagia inducida tanto por ayuno como por inhibición de la vía mTOR por Rapamicina. Demostramos además, que la hipoxia inhibe la expresión de RAC3 generando un ambiente permisivo para que la autofagia ocurra, permitiendo la supervivencia tumoral. Los resultados obtenidos en este trabajo de tesis, demuestran que la participación de RAC3 como regulador de la autofagia es un mecanismo adicional a los ya descriptos por los cuales promueve tumorigénesis y el microambiente inflamatorio tumoral podría contribuir en la regulación de la expresión de RAC3 y su acción oncogénica.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 236 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Musacco Sebio, Rosario Natalia
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2017-08-17

Temas:   Ciencia de la vida   -  Hierro   -  Cobre   -  Material articulado   -  Daño oxidativo   -  Antioxidantes

Descripción: La definición clásica de estrés oxidativo lo presenta como un desbalance entre las especies oxidantes y antioxidantes, a favor de las primeras. Estas incluyen a las especies reactivas del oxígeno (ROS) tales como el peróxido de hidrógeno (H2O2), peróxidos orgánicos (ROOH), oxígeno singulete (1O2) y radicales libres como anión superóxido (O2??) radical hidroxilo (HO?), radicales peroxilo (ROO?), entre otros. La ?hipótesis redox? amplía este concepto al postular que el estrés oxidativo se debe a procesos oxidativos que alteran el balance redox celular dado por los grupos tioles (-SH), compuestos de bajo peso molecular como el glutatión (GSH) o proteínas involucradas en las vías de señalización y funciones fisiológicas. El objetivo de este trabajo fue estudiar el estrés y daño oxidativo considerado como un mecanismo común en la toxicidad celular y tisular generada por la exposición a agentes tóxicos oxidantes en diferentes modelos experimentales, y comprobar el efecto del tratamiento con sustancias antioxidantes. Se postula que la exposición a material particulado (PM) de la combustión de biomasa produce daño oxidativo celular e inflamación mediante la producción de ROS, produjo una disminución de la viabilidad y aumento de la producción de ROS en células de pulmón, dependiendo del tamaño y de la composición del material particulado. Sin embargo, no se pudieron prevenir los efectos tóxicos del material particulado en células epiteliales y macrofagos al suplementarlas con sustancias antioxidantes. Se estudió el daño oxidativo en hígado y cerebro de rata en un modelo in vivo por sobrecarga de hierro (Fe) y cobre (Cu), dado que se sabe que estos metales son capaces de producir el radical HO? mediante la reacción de Fenton/Haber-Weiss. Se observaron aumentos de la producción de ROS, daño oxidativo a biomoléculas, consumo de antioxidantes endógenos y alteraciones de las defensas antioxidantes enzimáticas dependientes de la dosis y el tiempo de exposición, para la sobrecarga aguda y crónica de ambos metales, acompañados siempre de un incremento de la concentración del metal en los órganos estudiados. En la sobrecarga aguda de Fe y Cu se encontró que los aumentos de la actividad de las enzimas antioxidantes SOD y catalasa, responsables de detoxificar las células de O2?- y H2O2, están relacionados con un aumento de la expresión de dichas enzimas, probablemente regulada por el factor de transcripción nuclear Nrf2. Dado el creciente interés en la toxicidad del Cu, su relación con la enfermedad de Wilson, y su posible participación en enfermedades neurodegenerativas, se focalizó el estudio en este metal. No se encontró, sin embargo, que la sobrecarga crónica de este metal en ratas produzca efectos deletéreos en las mitocondrias del cerebro. El antioxidante liposoluble ?-tocoferol fue capaz de proteger a los fosfolípidos contra el daño oxidativo inducido por Cu, pero no tuvo efecto en la prevención aumento de la oxidación de proteínas y GSH producidos por el metal en el hígado y corteza cerebral de rata, tanto en los experimentos de toxicidad aguda como crónica, indicando que el daño oxidativo por la sobrecarga de Cu puede estar asociado, además de la oxidación de fosfolípidos, a otros mecanismos independientes de las reacciones en cadena mediadas por radicales libres. Por último, con el objetivo de comparar y analizar las posibles diferencias entre los mecanismos asociados a la toxicidad del Fe y el Cu, se estudió el efecto que tienen estos metales cuando se los expone a las mitocondrias aisladas de hígado de rata (sistema biológico funcional). Los resultados obtenidos indicaron que ambos metales son capaces de disminuir la función mitocondrial necesitándose concentraciones mucho menores en el caso del Cu. Este fenómeno está indicando que el Cu(II) es más tóxico que el Fe(III) o que los mecanismos de protección para los efectos del Fe(III) son suficientes para prevenir el daño. La disminución del consumo de oxígeno y control respiratorio se ven mucho más afectados cuando la mitocondria se expone al metal en condiciones de producción de H2O2/ O2??, indicando la participación de estas especies en la toxicidad del metal. Ambos metales producen oxidación de fosfolípidos de manera dependiente de la concentración del metal pero únicamente en condiciones donde la mitocondria dispone de sustratos para la respiración. En el caso del Cu, el antioxidante glutatión (GSH) fue el más eficaz en la prevención de la disfunción mitocondrial y oxidación de fosfolípidos. Esto se explica por la capacidad de esta molécula de interaccionar con el metal, formando complejos muy estables. Para el caso del Fe, estos efectos protectores se observaron únicamente con el butil-hidroxitolueno (BHT). El Cu es capaz de reaccionar en forma directa y en relación estequiométrica con los tioles mitocondriales, no así el Fe. Conclusión: En este trabajo de tesis doctoral se estudió el rol del daño oxidativo y producción de ROS en diferentes modelos de exposición a agentes tóxicos oxidantes. Se comprobó la oxidación de biomoléculas en todos los sistemas estudiados y la alteración de enzimas antioxidantes in vivo. El efecto protector de las sustancias ?antioxidantes? depende de la naturaleza química de la sustancia y del tipo de estrés oxidativo involucrado. Los efectos tóxicos de los metales de transición Fe y Cu presentan un mecanismo en común, mediado por la reacción de Fenton y generación del radical OH?, sin embargo, el Cu participa en mecanismos intracelulares oxidativos y de interacción directa con los grupos tioles de las proteínas y con la molécula de GSH, cuya relevancia en la toxicidad del metal debería ser aun más estudiada.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 204 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Cattalini, Juan Pablo
2016-03-10

Descripción: El presente trabajo de tesis propuso el desarrollo de un novedoso biomaterial compuesto, elaborado a partir de alginato y nanopartículas de biovidrio, con potencial aplicación en la ingeniería tisular ósea para el desarrollo de andamios tridimensionales multifuncionales con capacidad de liberar agentes terapéuticos como iones Cu2+ o Ca2+, y un bisfosfonato como el alendronato. El estudio preliminar del desarrollo de los biomateriales, sobre matrices en dos dimensiones, permitió evaluar la viabilidad de su aplicación en la elaboración de andamios tridimensionales. Luego, se demostró que los andamios desarrollados poseen propiedades interesantes en términos de morfología, porosidad, resistencia mecánica, bioactividad, biodegradabilidad y citocompatibilidad. Asimismo, es importante destacar que los andamios mostraron un perfil de liberación de Cu2+, Ca2+ y alendronato, adecuado para favorecer la proliferación de células óseas y endoteliales, así como la formación de vasos sanguíneos en un modelo considerado in vivo. Además, el trabajo de tesis planteó, por primera vez, el desarrollo y la validación de técnicas analíticas basadas en la electroforesis capilar para la cuantificación de los mencionados agentes liberados desde las matrices elaboradas. Dichos métodos resultaron simples, versátiles, económicos y eficientes, teniendo en cuenta que dichos agentes terapéuticos son liberados desde las matrices en concentraciones del orden de las partes por millón.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 197 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Iannicelli, Jesica
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2016-10-03

Descripción: En Argentina las plantas aromáticas y medicinales han sido tradicionalmente cosechadas del medio ambiente, sin ninguna limitación provocando una importante erosión del germoplasma. Lippia integrifolia es una de las especies bajo esta situación. Para evitar el avance de este proceso, sería importante cambiar el modelo extractivo por un paradigma de producción. Una posible estrategia es generar y transferir a los colectores/productores, materiales genéticamente mejorados. La combinación de técnicas de cultivo in vitro de tejidos con la autopoliploidización, han traído mejoras en la producción de metabolitos secundarios. En este trabajo se obtuvieron autotetraploides de L. integrifolia que mostraron diferencias significativas respecto a la planta madre (tamaño de hojas, inflorescencias, tricomas, estomas, y granos de polen). Además, se incrementaron los rendimientos de aceites en los tetraploides, y se detectaron diferencias cuantitativas en la composición de todos los individuos recuperados de cultivo in vitro (tetraploides y diploides) con respecto a la madre. Por otra parte, se detectó variabilidad genética (polimorfismos) en todas las plantas ex vitro (diploides y tetraploides). Debido a las diferencias fenotípicas (mayor tamaño de la parte usada), y los incrementos en los rendimientos de aceites y la composición, un individuo tetraploide se convirtió en una nueva variedad de ?incayuyo?.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 267 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Buendía Rodríguez, Jefferson Antonio
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2015-02-24

Temas:   Ciencia de la vida   -  Tacrolimus   -  CYP3A5   -  Trasplante hepático

Descripción: Introducción: Existe escasa evidencia respecto al efecto combinatorio y a largo plazo del polimorfismo en el intrón 3 de la isoforma CYP3A5 6986G>A en la farmacocinética del TAC en pacientes trasplantados hepáticos. El objetivo de este trabajo fue caracterizar distintas variables genéticas y clínicas asociadas a la variabilidad farmacocinética/farmacodinámica del Tacrolimus en pacientes postrasplante hepático en población argentina. Métodos: Se evaluó la correlación entre el polimorfismo en el intrón 3 de la isoforma CYP3A5 6986G>A y los niveles de TAC y TAC XL en sangre de pacientes 24 adultos trasplantados hepáticos estables y 77 pacientes pediátricos trasplantados hepáticos durante un periodo de 2 años. Resultados: Se encontró una frecuencia de expresores (CYP3A5*1) entre el 17% al 37% .El genotipo CYP3A5 del receptor juega un papel más importante en la Co/dosis en etapas tempranas, mientras la importancia genotipo del donante se incrementa con el tiempo postrasplante. Conclusión: El papel que juega cada polimorfismo es distinto según avanzan los días luego del trasplante y deben ser tenidos en cuenta con el fin de optimizar los beneficios del TAC durante la fase de inducción y mantenimiento postrasplante.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 93 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Boado, Lorena Analía
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2014-12-16

Temas:   Ciencia de la vida   -  Influenza   -  Baculovirus   -  Hemaglutinina

Descripción: El virus de influenza, que causa infecciones epidémicas en el hombre y diversas especies de animales susceptibles, evoluciona continuamente por la acumulación de mutaciones puntuales, así como por el intercambio de segmentos genómicos entre distintas cepas. Las vacunas antigripales estacionales en uso actualmente para la prevención son eficaces para neutralizar una infección con cepas homólogas, pero su capacidad de cobertura heterosubtípica es variable o nula. El presente trabajo está orientado a desarrollar, por un lado, vacunas antigripales de nueva generación, a través de la expresión de la proteína inmunodominante hemaglutinina por tecnología de ADN recombinante, en un sistema de expresión eucariota (baculovirus/ células de insectos). Por otro lado, se propone la generación de una vacuna ?universal? de amplio espectro de protección a través de dirigir la respuesta inmune del huésped hacia regiones más conservadas del virus. En este sentido, se ha buscado en la segunda parte de este trabajo lograr una vacuna de más amplia cobertura basada en las proteínas internas del virus, en particular en la proteína de matriz M2 y en la nucleoproteína. Se demuestra que las vacunas experimentales basadas en el ectodominio de M2 pueden inducir inmunidad humoral o celular capaces de proteger animales vacunados de una descarga de dosis letal de virus de influenza.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 174 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Cura, Carolina Inés
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2014-09-25

Descripción: La infección por el parásito Trypanosoma cruzi, causante de la enfermedad de Chagas, es un importante problema de salud pública, principalmente en los países endémicos de América. Con una prevalencia estimada de 8 millones de personas infectadas, esta enfermedad muestra un curso clínico variable, desde asintomática hasta fases crónicas con manifestaciones clínicas. Las poblaciones naturales de T. cruzi están compuestas por clones múltiples, distribuidos en seis unidades discretas de tipificación (UDTs TcI-TcVI), de diferente distribución geográfica y circulación en los ciclos de transmisión. La relación entre las UDTs y los diferentes patrones de infectividad y patogenicidad, susceptibilidad a agentes quimioterapéuticos y manifestaciones clínicas, es actualmente sujeto de estudio. Se han desarrollado numerosos esquemas de tipificación de UDTs, con mayor o menor grado de complejidad y sensibilidad analítica, aunque no se ha definido aún un método certero de referencia. Con el objetivo de desarrollar un esquema sencillo de tipificación molecular, que involucre el menor número posible de reacciones de PCR secuenciales, en este trabajo de Tesis se han desarrollado y validado estrategias de PCR en tiempo real multiplex con sondas TaqMan, basadas en la detección de genes polimórficos nucleares y mitocondriales del parásito, que permitieron la caracterización de las seis UDTs de T. cruzi de manera altamente específica. El método desarrollado evidenció una sensibilidad analítica comparable a la del algoritmo de tipificación por PCR convencional utilizado en nuestro laboratorio, siendo capaz de caracterizar correctamente al 100% de las cepas de referencia de T. cruzi y a un elevado porcentaje de las muestras biológicas analizadas. El esquema de PCR TaqMan identificó más eficientemente a las UDTs presentes en muestras con elevada carga parasitaria, derivadas de triatominos, reservorios, pacientes con infección aguda o congénita, o con reactivación de la enfermedad de Chagas, mientras que evidenció limitaciones en la tipificación de muestras provenientes de pacientes crónicos. Una de las estrategias del nuevo algoritmo fue adaptada para la cuantificación de ADN genómico o carga parasitaria en forma específica de UDT. Por otro lado, se ha diseñado y validado una metodología de PCR en tiempo real dúplex para el diagnóstico diferencial de T. cruzi y T. rangeli, potencialmente aplicable en las regiones co-endémicas para ambos tripanosomátidos. Las nuevas metodologías de PCR en tiempo real, como así también las estrategias tradicionales de PCR convencional, fueron aplicadas en la caracterización de las UDTs de T. cruzi y en el diagnóstico diferencial con T. rangeli en distintos escenarios eco-epidemiológicos y clínicos de las regiones endémicas. Por otra parte, se realizó un estudio sobre la diversidad genética dentro de las Udas TcI y TcIII. En este sentido, y en base a estudios previos realizados en Colombia utilizando la secuencia intergénica del miniexón (SL-IR), se extendió la caracterización de los genotipos de TcI a muestras procedentes de trece países del continente americano. El aporte principal del trabajo consistió en la identificación de un nuevo grupo de genotipos, no descripto hasta el momento, TcIe, y la realización de un análisis detallado de la distribución de los grupos TcIa-TcIe en los diferentes ciclos de transmisión y regiones geográficas. El estudio de aislamientos y clones de TcIII confirmó la variabilidad de secuencia en el gen multicopia SL-IR dentro del genoma de T. cruzi.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 240 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Pérez, Sebastián Ezequiel
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2015-10-22

Temas:   Ciencia de la vida   -  siRNA   -  Nanomedicina   -  Nanopartículas   -  Terapia génica   -  Lipoplexos

Descripción: El silenciamiento de genes por interferencia con ARN (iRNA) es un mecanismo específico que puede ser mediado por la administración de pequeños ARN de interferencia (siRNA) sintéticos. El objetivo del presente trabajo fue tomar como ventajas la biocompatibilidad y propiedades fisicoquímicas de la fosfatidilcolina (PC) y las sales biliares para el desarrollo, optimización, caracterización y evaluación in vitro de nanotransportadores basados en PC para la vehiculización de siRNA en células MCF-7 de cáncer de mama y células normales MDCK. Lipoplexos formulados en distintas condiciones fueron capaces de unir siRNA y vehiculizarlo eficientemente a las células, sin presentar signos de citotoxicidad. Su caracterización fisicoquímica exhibió partículas de tamaño nanométrico y morfología pH-dependiente, aunque de escasa estabilidad física. Se optimizaron, entonces, sistemas mixtos compuestos por PC y sales biliares, obteniéndose vehículos de baja citotoxicidad, alta capacidad de unión de siRNA y eficiencia de transfección / silenciamiento. Se observaron partículas menores a 150 nm que mediante evaluaciones fisicoquímicas se describieron como pequeñas vesículas unilamelares o sistemas micelares mixtos, dependiendo de la composición del vehículo y el medio de formulación, lo que las haría adecuadas para posteriores evaluaciones in vivo. Ensayos preliminares también sugieren su uso promisorio para vehiculización de DNA plasmídico.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 236 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Scotti, Leopoldina
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2015-03-26

Temas:   Ciencia de la vida   -  Ovario   -  OHSS   -  Angiogénesis   -  VEGF   -  ANGPTs   -  SIP   -  Ovary   -  OHSS   -  Angiogenesis   -  VEGF   -  ANGPTs   -  SIP

Descripción: El Síndrome de Hiperestimulación Ovárica (OHSS) es una complicación severa de la estimulación ovárica con gonadotrofinas en tratamientos de fertilización asistida. La relación entre la gonadotrofna coriónica humana (hCG) y OHSS esta mediada en parte por la producción de factores angiogénicos, como el factor de crecimiento del endotelio vascular (VEGF). Sin embargo, durante la angiogénesis además del VEGF, otros sistemas participan en la formación de una vasculatura madura y funcional. En base a estos antecedentes, se postularon las siguientes hipótesis: * La inhibición del sistema de VEGF o del sistema de Angiopoyetinas (ANGPTs) en el OHSS afecta la angiogénesis ovárica, disminuyendo la permeabilidad vascular que conduce al desarrollo de ascitis y por consiguiente, mejora la función ovárica. * Los niveles de S1P se encuentran disminuidos en pacientes con riesgo a desarrollar OHSS, siendo en parte responsable de la alta permeabilidad vascular observada en estas pacientes. En conclusión, los resultados de esta Tesis aportan conocimientos para dilucidar la etiología del OHSS como también para detectar biomarcadores (VEGF, ANGPT-1, S1P) que podrían ser utilizados para prevenir el desarrollo de OHSS y por consiguiente, ayudar a los médicos a elegir la mejor estrategia de estimulación ovárica para cada paciente.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: unknown  (tamaño kb)  Pag. 182 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Rossetti, Luciana
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2015-12-01

Temas:   Ciencia de la vida   -  Leche   -  Antioxidantes   -  Oxidación   -  Productos Lácteos   -  Enriquecimiento   -  Natural

Descripción: Para agregar valor a la leche se realizaron ensayos para mejorar la capacidad antioxidante a través de la dieta de los animales. Para obtener datos basales se ensayaron leches de tambos comerciales y de los alimentos utilizados encontrándose una correlación entre ellos, además de una relación estacional. Ensayos de cinética de incorporación de compuestos antioxidantes de pastura fresca en la leche, determinaron que en 20 días su composición se modificaba, lográndose una leche con mayor capacidad antioxidante. Dado que las condiciones productivas no permiten altas asignaciones de pastura en la dieta, se ensayaron dos niveles de alfalfa y dos épocas del año. Para determinar la transferencia de los compuestos incorporados a productos lácteos, se estudiaron en leche entera en polvo y en queso duro. Se vio que un nivel de 50% de pastura lograba la modificación diferencial de las leches y que la estación influye sobre la incorporación de estos compuestos. Las características de la leche cruda se transfirieron a los productos lácteos. Al realizar el seguimiento de la leche en polvo para ver la implicancia en la vida útil, se observó que el aumento de los antioxidantes liposolubles sirvió para preservarla de los efectos de la oxidación.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: unknown  (tamaño kb)  Pag. 207 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Millet, Violeta
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2016-11-09

Descripción: Los modelos desmielinización son herramientas útiles en el estudio de nuevas terapias aplicables a enfermedades desmielinizantes. El modelo inducido por intoxicación con CPZ es altamente reproducible, simple y de baja mortalidad. Nos propusimos estudiar los mecanismos que controlan la viabilidad y la diferenciación oligodendroglial, y que conducen a la desmielinización utilizando este modelo. Nuestros resultados muestran que la desmielinización y muerte de OLGs maduros inducida por CPZ es mediada por la producción de citoquinas pro-inflamatorias desde la microglia, con disfunción de la cadena respiratoria mitocondrial y generación de EROs. Así, animales transgénicos expresando EGFP bajo el promotor de CNPasa presentan una hipomielinización basal y una mayor susceptibilidad a la desmielinización con CPZ debida a la alta expresión de EGFP que lleva al estrés oxidativo y la apoptosis de los OLGs maduros. En concordancia, la inhibición parcial de la actividad del proteasoma mejora la remielinización, disminuye en el reclutamiento de microglia y la activación de NF?B recuperando la actividad de la cadena respiratoria mitocondrial. Finalmente, nuestros resultados muestran a Gal-3 como una nueva molécula secretada desde la microglia, capaz de inducir diferenciación oligodendroglial y de modular la mielinización y la respuesta a la desmielinización. En conclusión, podemos afirmar que la viabilidad y la diferenciación oligodendroglial dependen de la producción de radicales libres así como de la presencia de mediadores provenientes de la microglia.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: unknown  (tamaño kb)  Pag. 176 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Oberkersch, Roxana Elena
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2016-04-18

Descripción: La ateroesclerosis es un proceso espacialmente no aleatorio, y temporalmente no lineal que afecta inicialmente áreas del árbol arterial. Estas áreas presentan una disfunción endotelial caracterizada por estado pro-inflamatorio, pro-trombótico y angiogénico. El fenotipo endotelial atero-protectivo y atero-propenso están asociados a diferentes patrones de expresión génica, vías de señalización y remodelados de la matriz extracelular (MEC). El efecto de las lipoproteínas de muy baja densidad (VLDL) sobre la función endotelial ha sido escasamente estudiado, particularmente el remodelado de la MEC endotelial inducido por las VLDL y la influencia que estas partículas ejercen en el desarrollo de la ateroesclerosis. Los resultados obtenidos en esta tesis indican significativas modificaciones en la producción de los principales proteoglicanos vasculares en las células endoteliales humanas, dependiendo del fenotipo endotelial, en presencia de niveles fisiológicos de VLDL. Junto con estos resultados, demostramos modificaciones estructurales en las cadenas de condroitín/dermatán sulfato y cambios en las enzimas que regulan sus características químicas, luego del tratamiento con las VLDL, en un endotelio atero-resistente. Esta tesis demuestra que las VLDL podrían inducir el remodelado de la MEC a través de los receptores de VLDL y enfatiza una potencial aplicación terapéutica basada en el remodelado de la matriz extracelular endotelial para prevenir la ateroesclerosis.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 179 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Faraj, Santiago Enrique
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2016-12-29

Descripción: La familia Frataxina está compuesta por un conjunto de proteínas pequeñas de tipo a/ß. El primer representante descripto de esta familia fue la frataxina humana, descubierta debido a que el gen que la codifica se encuentra alterado en personas afectadas con ataxia de Friedreich, una enfermedad caracterizada por el deterioro neurológico y el desarrollo de miocardiopatía. Desde entonces se han descripto homólogos en muchas especies de bacterias y eucariotas. La actividad biológica de las proteínas depende de su estructura tridimiensional, codificada en la secuencia de aminoácidos. Entendemos a la estructura como un conjunto dinámico de conformaciones que pueden estabilizarse mediante cambios sutiles en el entorno, o por interacción con otras proteínas o con moduladores alostéricos. Existe un gran consenso sobre la existencia de relaciones entre la movilidad interna, la estabilidad y la función biológica. Se conocen muchos ejemplos que ponen de manifiesto la importancia de la flexibilidad estructural, el desplegado local y la presencia de estados intermediarios en diferentes procesos biológicos, en especial aquellos que involucran interacciones de tipo proteína-ligando y proteína-proteína. En este trabajo abordamos el estudio general de los mecanismos de plegado y las relaciones entre la estabilidad termodinámica y la flexibilidad, que determinan la dinámica y el grado de heterogeneidad del conjunto de conformaciones del estado nativo de la Frataxina humana. Nos focalizamos en definir qué rol juega la región C-terminal sobre dichos determinantes estructurales, y en identificar posibles correlaciones entre alteraciones de la movilidad de distintas regiones de la cadena polipeptídica y cambios en las estabilidades locales y globales. Además, examinamos las bases moleculares del proceso de multimerización, mediado por la región N-terminal del precursor de la proteína. En conjunto, los resultados que presentamos en esta tesis representan un aporte a la comprensión de las bases moleculares de la consolidación estructural y la dinámica del fold Frataxina.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 282 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Pellegrino, Néstor Raúl
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2015-03-30

Descripción: Se diseñó y elaboró un alimento para individuos de mayor edad, teniendo en cuenta el aporte, de energía y el incremento de proteínas, ácidos grasos esenciales y vitaminas A, D y E. Se evaluó el impacto biológico del producto elaborado en modelos experimentales y sus características sensoriales y aceptabilidad Materiales y métodos: Se elaboró un budín, utilizando harinas de trigo, lino y soja semi desengrasadas, aceites de maíz y oliva, mantequilla, ovoalbúmina, azúcar y una mezcla de vitaminas A, D y E. Se determinó: composición centesimal (AOAC), ácidos grasos (CG), vitaminas A y E (HPLC). La evaluación biológica en relación a proteínas, vitaminas A, D y E se realizó en modelos experimentales en ratas. Ensayos sensoriales: Análisis Descriptivo Cuantitativo (QDA) y Aceptabilidad por parte de los consumidores. Resultados: una porción de 120 g aporta 24 % de los requerimientos energéticos, 9.4 g de PUFA (4.5% de las calorías totales, relación ?3/?6 de 1/7), 38 % de los requerimientos de proteínas, 75 % de la IR de vitamina A y 100 % y de vitaminas D y E. El modelo experimental comprobó la eficiencia biológica de la fortificación con las 3 vitaminas. Los descriptores significativos del QDA y los datos de aceptabilidad por los consumidores fueron satisfactorios. Conclusiones: el alimento incrementó el aporte de proteínas, fibra, ácidos grasos esenciales, vitaminas A, D y E, resultando sensorialmente aceptable.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 204 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Casal, Juan José
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2015-03-30

Temas:   Ciencia de la vida   -  Chagas   -  Diseño   -  Antiparasitario   -  Trypanosoma cruzi

Descripción: Dentro de este paradigma desarrollamos un modelo de acción con el objetivo de diseñar y sintetizar moléculas que inhiben la tripanotiona reductasa, una enzima específica del Trypanosoma cruzi que resulta esencial para su supervivencia en el huésped. Se emplearon técnicas de acoplamiento molecular para predecir la o las formas en las cuales las sustancias podrían unirse a la proteína, inhibiendo su acción, así como las fuerzas relativas con la cual se efectuaba esa unión. Estas técnicas han servido para establecer tres forma de desarrollo de fármacos: la predicción de actividad biológica, el cribado virtual de librerías comerciales de compuestos y el diseño de novo de drogas anti-tripanosomiasis. Las tres técnicas arrojaron diferentes núcleos estructurales de compuestos químicos. Sin embargo, a pesar de estas diferencias químicas, las sustancias sintetizadas/compradas han demostrado poseer la actividad predicha mediante los sistemas informáticos tanto en las evaluaciones con la enzima blanco, como con los ensayos in vitro con el parásito. Se buscaron alternativas terapéuticas mediante la síntesis de derivados de ftalazin-1,4-diona pequeñas. Los resultados arrojaron una actividad biológica moderada, poniendo a estos compuestos como líderes en la búsqueda de la mejora de sus propiedades farmacológicas. Nos enfocamos en el desarrollo de antiinflamatorios no esteroideos (AINE) para su uso como co-tratamiento sintomático en la enfermedad de Chagas, la cual cursa en su etapa crónica con procesos de inflamación y daño tisular. Los resultados fueron prometedores con dos núcleos ftalimídicos líderes y un derivado de ftalazina con actividad AINE in vitro e in vivo.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 152 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Fabian, Lucas Emanuel
2015-05-05

Temas:   Ciencia de la vida   -  Quinoxalinas   -  Chagas   -  HIV   -  Sida   -  Enfermedad de Chagas

Descripción: Las quinoxalinas constituyen un sistema heterocíclico presente en numerosos compuestos con demostrada y variada actividad biológica. Con el fin de contribuir al diseño de nuevos compuestos con potencial actividad anti-HIV y/o antichagásica, ya sea a través su acción inhibitoria sobre la transcriptasa reversa del virus de la inmunodeficiencia humana o su inhibición de la cruzipaína, enzima esencial para el desarrollo del ciclo de vida del Trypanosoma cruzi, en este trabajo de Tesis Doctoral de han empleado varias estrategias de diseño de fármacos asistido por computadora para diseñar posibles inhibidores de los mencionados sistemas enzimáticos con estructura quinoxalínica. A partir de los resultados alcanzados mediante el diseño de novo o a través del cribado virtual se propusieron un total de 25 compuestos quinoxalínicos que podrían resultar inhibidores de la transcripsa reversa y/o de la cruzipaína. Estos compuestos fueron sintetizados empleando algunas metodologías habituales para la síntesis de quinoxalinas a las cuales se les introdujeron modificaciones que permitieran su optimización, tales como el empleo de radiación microondas como fuente de energía. De esta manera se aporta una ruta sintética lineal, sencilla y eficiente para la obtención de 29 compuestos quinoxalínicos, muchos de ellos no descriptos previamente en la bibliografía. Se iniciaron los estudios de la potencial actividad antichagásica de los compuestos diseñados y sintetizados dejando planteada la posibilidad de que ensayos posteriores contribuyan a demostrar la actividad de los mismos y la utilidad de los métodos computacionales en el diseño de nuevos compuestos quinoxalínicos activos.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 172 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Losinno, Antonella Denise
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2015-03-30

Descripción: Las células mioides peritubulares (células MP) se encuentran en la pared del túbulo seminífero (TS) y participan en su contracción. Poseen un citoesqueleto particular, organizado en dos capas independientes: una capa interna y otra externa con miofilamentos perpendiculares y paralelos al eje del TS, respectivamente. Esto difiere de la malla ortogonal de filamentos propuesta anteriormente para las células MP. Por ello, en animales adultos se evaluó además de la organización del citoesqueleto, la distribución de otras estructuras y proteínas implicadas en la contracción. Se analizaron los efectos del estímulo con endotelina-1 sobre el TS, especialmente en la célula MP. En el desarrollo testicular postnatal, se evaluó la maduración de este citoesqueleto y el inicio de la respuesta contráctil. Por diferentes microscopios se observó que la célula MP a pesar de ser plana dispone de una maquinaria altamente organizada, con estructuras como caveolas y receptores de endotelina-1 orientadas según las dos capas de miofilamentos que coexisten en la misma célula y que le permite contraerse en dos direcciones. En el desarrollo la organización de los filamentos cambia según progresa la espermatogénesis. Las dos capas no aparecen simultáneamente. Aún con una capa la célula MP se contrae pero de una manera diferente
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: unknown  (tamaño kb)  Pag. 121 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Carabajal, Eliana
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2017-07-04

Descripción: El estudio y monitoreo de poblaciones sujetas a disturbios humanos es esencial para poder identificar y cuantificar los impactos sobre los animales y determinar estrategias de manejo y conservación adecuadas. Los indicadores fisiológicos pueden alertar sobre cambios en el estado de los individuos aún antes de que estos afecten negativamente su capacidad reproductiva o su supervivencia, permitiendo así la detección temprana del problema y la toma de medidas para mitigarlo. Existen diferentes indicadores fisiológicos para medir los efectos de la alteración del ambiente en los organismos. Entre ellos se destacan los marcadores de estrés oxidativo, los parámetros hematológicos, que pueden actuar como sensibles señales del estado de salud y algunas enzimas del metabolismo de aminoácidos o carbohidratos, que son indicativas del daño tisular provocado por compuestos tóxicos. Entre los impactos de origen humano que pueden afectar a los pingüinos de Magallanes se encuentran las actividades que se desarrollan en la costa, como el ecoturismo y la generación de contaminantes en el mar, especialmente los derrames de hidrocarburos. El estrés producido por las visitas en las colonias reproductivas podría provocar cambios fisiológicos que disminuyen la condición física de los animales, volviéndolos más susceptible a contraer enfermedades. En tanto que los contaminantes ambientales pueden producir peroxidación lipídica desencadenando la pérdida de la funcionalidad celular bajo condiciones de estrés oxidativo. Para medir el efecto de estos estresores, se estudiaron dos colonias de pingüinos, una expuesta al turismo (Estancia San Lorenzo, Chubut) y otra cercana a un puerto y a la ciudad y por lo tanto exhibida a contaminantes (Isla Quiroga, Santa Cruz). El objetivo en la primera sección fue determinar si el turismo tiene efectos negativos sobre los pingüinos, comparando individuos que anidan cerca de los senderos por donde circulan los visitantes con nidos en zonas no disturbadas (control). Para ello se midieron diferentes parámetros hematológicos y de estrés oxidativo. No se observaron diferencias significativas en ninguno de los parámetros hematológicos. Sin embargo, se observó que animales expuestos al turismo presentaron mayores niveles del biomarcador de daño oxidativo ROMs y menores niveles de tioles, un reconocido antioxidante, conjuntamente con un aumento de las actividades de las enzimas antioxidantes glutatión transferasa y catalasa, probablemente para compensar el aumento del estrés oxidativo. Por otra parte, se consideró la influencia de otros factores como el sexo, la edad y la zona de anidación. Los pichones mostraron valores significativamente mayores de glucemia y colesterol, mientras que exhibieron menores valores de proteínas totales y de hematocrito que los adultos. También presentaban menores niveles de aspartato aminotranferasa, mientras que mostraron mayor actividad de la fosfatasa alcalina y de la pseudocolinesterasa, sin observar diferencias significativas en la alanina transaminasa y lactato deshidrogenasa, comparado con los individuos adultos. El estudio de OXY demostró menor capacidad antioxidante en pichones comparado con adultos, apreciándose diferencias significativas en los niveles de ROMs. Además, se observaron mayores niveles de TBARS y tioles en pichones y menor actividad de la enzima catalasa respecto de los adultos. Las hembras adultas presentaron mayores niveles de proteínas totales, niveles de aspartato y alanina aminotransferasas, además de un aumento en el número de leucocitos totales respecto de los machos. En la segunda sección de resultados se analizaron los parámetros hematológicos y de estrés oxidativo en pingüinos de la Isla Quiroga. Se registraron diferencias hematológicas entre adultos y pichones. Los pichones mostraron valores significativamente mayores de glucemia y colesterol, mientras que exhibieron menores valores de proteínas totales y de hematocrito. Además, los pichones mostraron niveles mayores de fosfatasa alcalina y pseudocolinesterasa. Con respecto a los parámetros de estrés oxidativo, no se registraron diferencias significativas entre pichones y adultos en ninguno de los parámetros estudiados excepto por una menor actividad de la enzima catalasa en pichones. En la anteúltima sección se compararon los parámetros hematológicos y de estrés oxidativo de pingüinos que anidan en las colonias de San Lorenzo y de Isla Quiroga. El único parámetro que presentó el mismo comportamiento, independientemente del sexo y edad de los pingüinos, fue la glucemia que demostró menores niveles en los animales de IQ. En individuos adultos de ambos sexos se registraron mayores niveles de peroxidación lipídica en plasma, conjuntamente con una reducción de antioxidantes, en los individuos provenientes de IQ. Sólo en machos se observaron niveles de actividad de las enzimas alanina aminotrasferasa y fosfatasa alcalina significativamente mayores en IQ. Los pichones de la colonia IQ presentaron menores niveles de TBARS y tioles en glóbulos rojos, pero contrariamente se registraron mayores niveles de tioles en plasma, OXY, hematocrito y proteínas totales. En la última sección se evaluaron 3 pingüinos con manchas de petróleo que fueron rehabilitados. Los resultados mostraron que los pingüinos con ese leve empetrolamiento tenían valores hematológicos (excepto para hematocrito y proteínas totales) y de estrés oxidativo (excepto la actividad de enzima catalasa y tioles en glóbulos rojos) mayores en comparación con pingüinos de Magallanes de la zona control de la colonia San Lorenzo. En el presente trabajo se reportan los datos de los parámetros hematológicos y de estrés oxidativo de los pingüinos de Magallanes, con el fin de reportar los rangos fisiológicos en los pingüinos, tanto los afectados por turismo y contaminantes, como de individuos que pueden considerarse normales. Estos resultados serán una herramienta indispensable para poder realizar una correcta evaluación del impacto ambiental sobre la especie.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: unknown  (tamaño kb)  Pag. 145 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Denoya, Gabriela Inés
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2015-07-07

Descripción: Los consumidores demandan frutas mínimamente procesadas libres de aditivos y con apariencia fresca. Sin embargo, el daño provocado por el procesamiento a los tejidos acorta su vida útil. El presente trabajo se realizó con la finalidad de estudiar el efecto de las Altas Presiones Hidrostáticas (APH) para preservar duraznos mínimamente procesados. Cubos/cilindros de durazno fueron procesados combinando inmersión en solución de ácidos orgánicos, envasado al vacío y tratamiento por APH a temperatura ambiente. Se optimizaron las condiciones del tratamiento, determinándose que con 600MPa-5min se lograba la mayor inactivación de enzimas, con la mínima alteración de la textura y el color. También se estudió la importancia de seleccionar como materia prima variedades con baja actividad de la polifenoloxidasa, para controlar el pardeamiento enzimático del producto. Se encontró que en los duraznos presurizados se mantienen activos ciertos procesos bioquímicos (expresión y actividad de enzimas) y aunque se modifican algunas características de los tejidos vivos, el producto final mantiene la apariencia, textura y flavor de la fruta fresca. Finalmente, se determinó que la temperatura óptima de conservación es de 4°C, pudiendo mantenerse el producto sin deterioro microbiológico ni sensorial por 42 días. Notablemente, a 20°C el producto podría ser conservado con calidad comercial adecuada.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 222 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Sacerdoti, Flavia
2016-03-02

Temas:   Ciencia de la vida   -  Toxina Shiga   -  Preñez   -  Aborto   -  Rata   -  Fisiología   -  Desarrollo fetal

Descripción: En Argentina, las infecciones asociadas a Escherichia coli productor de toxina Shiga (STEC) producen la mayor incidencia mundial de Síndrome Urémico Hemolítico (SUH). Evidencias epidemiológicas demuestran un alto número de adultos portadores de STEC. Alrededor del 15 % de los abortos espontáneos son producidos por infecciones. La hipótesis de este trabajo es que las infecciones por STEC durante el embarazo pueden provocar complicaciones mediadas por la toxina Shiga tipo 2 (Stx2). La dosis subletal de 0,5 ng Stx2/g administrada a ratas en etapa temprana de gestación provocó daños irreversibles en los tejidos fetales, hipoxia, inflamación local, restricción del crecimiento intrauterino y finalmente aborto. La inmunización de ratas con BLS-Stx2B resultó en altos títulos séricos anti-Stx2B con capacidad neutralizante de Stx2. Las madres inmunizadas inyectadas con Stx2 tuvieron un parto normal y a término y las crías amamantadas por madres inmunizadas, desafiadas al destete con una dosis letal de Stx2 sobrevivieron en un 100%. Estos resultados indican que Stx2 produce aborto y que la inflamación local y la hipoxia decidual jugarían un papel importante en la pérdida de la preñez. La presencia de anticuerpos neutralizantes anti-Stx2 en los sueros maternos son una herramienta eficaz para prevenir los daños de Stx2.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: unknown  (tamaño kb)  Pag. 125 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Amaya, Celina
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2014-05-27

Descripción: Deshidroleucodina (DhL) es una lactona sesquiterpénica aislada de las hojas de la planta Artemisia douglasiana Besser, que crece en Argentina. Previamente, nuestro laboratorio ha demostrado que DhL inhibe la proliferación de células tumorales en cultivo y el crecimiento de tumores en ratones. Con el fin de demostrar que DhL posee potencial para el desarrollo de fármacos antitumorales, en esta tesis analizamos las propiedades antimigratorias de DhL en células tumorales. Como modelo de estudio utilizamos células en cultivo, arrestadas en la fase G1/S del ciclo celular. En las células tratadas con DhL fueron analizadas las propiedades de adhesión, invasión y migración. Como resultado, observamos que DhL no indujo apoptosis ni senescencia y no afectó la viabilidad celular. Luego, en una superficie recubierta con fibronectina, comprobamos que DhL inhibió la adhesión y la formación de adhesiones focales. Posteriormente, observamos que DhL inhibió la invasión del matrigel por las células tumorales y la migración celular. Además, DhL inhibió la protrusión de la membrana en el frente de avance, por la alteración de la organización del citoesqueleto de actina y la actividad de proteínas señaladotas como Rac1, ERK y p38. Estos resultados indican que DhL, a través de la inhibición de la señalización de ERK, afecta la adhesión, invasión y migración de las células tumorales en cultivo, confirmando la hipótesis que esta lactona sesquiterpénica tiene un gran potencial farmacológico como agente antimetastásico.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 172 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Romero, Mariana
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2015-09-29

Descripción: El péptido natriurético atrial (ANP) es un factor hipotensor y natriurético fuertemente involucrado en la regulación de la función cardiovascular y renal. El presente trabajo de tesis estudió los efectos cardiovasculares y renales de una infusión de ANP (100ng/h) durante 14 días en ratas espontáneamente hipertensas (SHR) machos y hembras adultas jóvenes, y determinó si existen diferencias entre sexos. El ANP disminuyó la presión arterial al aumentar la diuresis y la natriuresis; redujo el tamaño de los miocitos, el número de células apoptóticas cardíacas y renales, el contenido de colágeno intersticial y perivascular en corazón, riñón y aorta; estimuló la actividad del sistema del NO y disminuyó el estado oxidativo en corazón y riñón. Los efectos beneficiosos del ANP sobre la morfología cardiovascular y renal serían mayores en machos que en hembras SHR. Esto se debería a que las hembras SHR controles presentaron menores valores de presión arterial e índices de daño cardiovascular y renal, así como una mayor actividad de la NOS y capacidad antioxidante en estos tejidos. Los resultados de este estudio sugieren la potencial utilidad del tratamiento crónico del ANP para prevenir el daño cardiovascular y renal que desarrollan estos animales con el avance de la hipertensión.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: unknown  (tamaño kb)  Pag. 192 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Molina, Matías Alejandro
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2016-09-22

Descripción: Enterococcus faecalis CECT7121 es una bacteria de origen ambiental que ha demostrado modular la respuesta inmune en diversos modelos biológicos, convirtiéndose en un atractivo candidato a ser empleado como microorganismo probiótico. Sin embargo, aún es necesario definir los mecanismos a través de los cuales ejerce sus efectos inmunomodulatorios. En el presente trabajo de Tesis Doctoral se evaluaron los efectos de E. faecalis CECT7121 sobre las células dendríticas (DCs), analizando no solo su activación como efectores centrales de la respuesta inmune innata sino también sus consecuencias sobre la inmunidad adaptativa. También se estudió la estimulación que este microorganismo ejerce sobre los macrófagos. Además, se evaluaron las consecuencias del tratamiento intragástrico con este probiótico en ratones BALB/c. Por último, dadas las características inmunoestimulantes de E. faecalis CECT7121 hacia un perfil inflamatorio, se utilizó un modelo tumoral para contextualizar los efectos benéficos de esta cepa. E. faecalis CECT7121 indujo en forma dosis-dependiente una fuerte activación in vitro de DCs generadas a partir de precursores de médula ósea, induciendo la secreción de citoquinas pro- y anti-inflamatorias (IL-6, TNF?, IL-12p40 e IL-10). En comparación con otras cepas bacterianas analizadas, se observaron diferencias significativas en los niveles de TNF? e IL-10 producidos in vitro. Además, E. faecalis CECT7121 estimuló la expresión de marcadores celulares de activación como MHC-II, CD80 y CD40. Las preparaciones antigénicas obtenidas de E. faecalis CECT7121 indujeron diferentes respuestas de citoquinas en cultivos de DCs. En particular, los ácidos lipoteicoicos estimularon la producción de todas las interleuquinas pro-inflamatorias testeadas, mostrando características interesantes como moléculas inmunoestimulatorias. La estimulación con E. faecalis CECT7121 sobre DCs generadas a partir de precursores de médula ósea de ratones genéticamente modificados remarcó la importancia de los mecanismos de reconocimiento y las moléculas que participan en la señalización intracelular. La eliminación de la proteína adaptadora MyD88 en DCs MyD88-/- impidió su maduración y la producción de citoquinas. Por su parte, ni la expresión de DC-SIGN humano (hSIGN) ni la ausencia del receptor de manosa (MR-/-) en DCs murinas pareció haber modificado el efecto estimulatorio de esta cepa bacteriana. En el estudio de las consecuencias generadas sobre la respuesta inmune adaptativa, las DCs previamente estimuladas con E. faecalis CECT7121 estimularon la proliferación de linfocitos T CD4+ e indujeron la producción de IFN? en co-cultivos in vitro. Los ensayos in vivo permitieron evidenciar que la inoculación intraperitoneal de DCs pulsadas con E. faecalis CECT7121 en ratones naïve generó una acumulación sistémica de células que específicamente produjeron IFN?. In vitro, E. faecalis CECT7121 promovió la activación de macrófagos hacia el perfil clásico M1, estimulando la producción de citoquinas pro-inflamatorias como IL-6 y TNF?. En comparación con las demás cepas estudiadas, no se detectaron diferencias significativas en los niveles de citoquinas secretados. Al analizar los mecanismos intracelulares desencadenados, se observó que esta cepa probiótica activó la vía de señalización que involucra al factor de transcripción NFAT. El tratamiento intragástrico con E. faecalis CECT7121 en ratones BALB/c ejerció un efecto estimulante sobre el sistema inmune local y sistémico. Este probiótico indujó mayores respuestas proliferativas y torció la respuesta inmune hacia la producción de IFN?. La producción de esta citoquina fue mayor al día 4 y disminuyó para el día 11 luego del tratamiento, mostrando signos de una respuesta cinética que tiene lugar tanto a nivel local como sistémico. En las condiciones experimentales utilizadas, E. faecalis CECT7121 no afectó la generación ni el reclutamiento de Tregs o MDSCs. Al contextualizar los efectos benéficos E. faecalis CECT7121 empleando modelos anti-tumorales, este probiótico inhibió de manera dosis-dependiente la proliferación in vitro de las células tumorales murinas (LBC) y humanas (Raji y PL104). Las cepas control mostraron un comportamiento dosis-dependiente similar al de E. faecalis CECT7121. Sin embargo, no todas las bacterias testeadas mostraron el mismo nivel de inhibición de la proliferación celular. Resultados similares fueron observados en los efectos directos de las paredes bacterianas purificadas. La administración in vivo por vía intraperitoneal de E. faecalis CECT7121 o las cepas control testeadas protegió de la muerte al 90 % de los animales desafiados con una dosis letal del linfoma LBC, probablemente debido a la acción conjunta de la estimulación in situ de la respuesta inmune innata y la inhibición tumoral directa. En resumen, estos resultados demuestran que la estimulación inmunológica generada por E. faecalis CECT7121 involucra la activación de la respuesta inmune innata (teniendo como blanco principal a las DCs y los macrófagos) y el consecuente desarrollo de respuestas celulares adaptativas del perfil Th1. Estos resultados demuestran que E. faecalis CECT7121 puede, en definitiva, constituir una novedosa estrategia adyuvante tanto en planes de vacunación oral como sistémica, o incluso como agente modulador en terapias anti-tumorales.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 129 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Hope, Sandra Ingrid
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2017-09-20

Temas:   Ciencia de la vida   -  Endotelina   -  Hipotálamo   -  NET   -  Ratas   -  Fisiología   -  Transportador de noradrenalina

Descripción: En el presente trabajo de tesis, demostramos que las endotelinas-1 y -3 (ET-1 y ET-3) se comportan como neuropéptidos moduladores de la actividad del transportador de noradrenalina (NET) en el hipotálamo anterior y posterior de ratas normotensas. La regulación del mismo por las ETs es compleja e involucra diferentes subtipos de receptores de ETs, incluyendo los llamados no convencionales o atípicos y múltiples vías de señalización. En el hipotálamo anterior se observa que la ET-1 disminuye la captación neuronal de noradrenalina (NA) a expensas de la reducción de la actividad del NET debido a una disminución en los sitios de unión. Las modificaciones producidas en la actividad del NET son específicamente sobre la capacidad máxima de transporte de NA o sea número de transportadores funcionales sin alterar su afinidad. El efecto inhibitorio de la ET-1 es mediado por el receptor ETB e involucra diferentes vías que incluyen la NOS neuronal, la PKA y la PKC. En general estas vías activan los sitios de fosforilación del transportador en los aminoácidos serina y tirosina interactuando entre Sintaxina A1 y NET. Esto produce la regulación del transportador en la superficie neuronal aumentando la internalización del NET, por lo tanto disminuye su número en la membrana de la terminal nerviosa. En esta misma región hipotalámica, la ET-3 incrementa la captación neuronal de NA por aumento de la actividad del NET debido a un incremento del número de transportadores expresados en la membrana de la neurona. Este efecto se basa en una movilización del NET desde los compartimentos intracelulares hacia la superficie de la membrana. Este neuropéptido ejercería su efecto a través de la activación de un receptor atípico o no convencional el cual está acoplado a una proteína G. La activación del complejo receptor atípico/proteína G involucra diferentes mecanismos intracelulares Ca2+ dependientes. En el hipotálamo posterior, ambos neuropéptidos disminuyen la captación neuronal de NA a expensas de la reducción de la actividad del NET como consecuencia de una disminución en los sitios de unión. Este efecto es consecuencia de un incremento en la internalización del transportador desde la superficie de la membrana neuronal hacia los depósitos intracelulares. En el caso de la ET-1 el efecto inhibitorio es mediado por el receptor ETB unido a proteína G y la ET-3 a través de la activación de un receptor atípico o no convencional el cual está acoplado a una proteína G. En ambas situaciones, independientemente del receptor que se active, el efecto inhibitorio de ambas ETs involucra diferentes vías intracelulares que incluyen a la NOS neuronal, PKA y PKC. Esto produciría el mismo efecto descripto previamente en el caso de la ET-1 en el hipotálamo anterior. Sobre la base de los resultados obtenidos en la presente Tesis Doctoral sumado a los trabajos previos de nuestro grupo permiten demostrar contundentemente que tanto la ET-1 como la ET-3 se comportan como neuromoduladores de la transmisión noradrenérgica en el hipotálamo anterior como en el posterior, de animales normotensos, a través de la regulación de tres procesos importantes, la actividad del NET, la regulación de la liberación neuronal de NA y la actividad y expresión de la tirosina hidroxilasa. Por lo tanto, y a la luz de todos estos resultados, podemos inferir que los efectos producidos por las ETs a nivel central sobre la fisiología cardiovascular son consecuencia de la reducción en la simpatoinhibición a nivel del hipotálamo anterior y un incremento de la simpatoexitación del hipotálamo posterior. Todo esto daría respuesta al aumento de la actividad simpática central, producido por las ETs, que fuera observado por diversos autores.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 181 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Nastro, Marcela Bettina
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2016-04-25

Descripción: Se estudiaron aislamientos de enterobacterias de pacientes atendidos en el hospital de Clínicas "José de San Martin" durante los años 2009- 2013. La presencia de BLEE de tipo CTX-M es el mecanismo principal de resistencia a cefalosporinas de espectro extendido; pero se observó un desplazamiento de BLEEs de tipo CTX-M-2 por enzimas del grupo CTX-M-1, asociado a una diseminación multiclonal. El mecanismo de resistencia a carbapenemes más prevalente fue la presencia de carbapenemasa de tipo KPC. Los aislamientos portadores del gen blaKPC, surgieron esporádicamente causando brotes aislados y luego se observó una diseminación monoclonal en K. pneumoniae asociada al ST258. Posteriormente se detectó la diseminación a otras especies de enterobacterias y a otros secuenciotipos de K. pneumoniae. La resistencia a colistina emergió en K. pneumoniae con KPC debido a la selección de las subpoblaciones resistentes en el clon epidémico, y en los aislamientos KPC negativos por dispersión de clones resistentes. El uso previo es el principal factor relacionado con la adquisición y facilitaría la selección de subpoblaciones resistentes. La asociación colistina/ rifampicina demostró ser la combinación más activa in vitro, en aislamientos portadores de KPC sensibles y resistentes a colistina y fue utilizada en el hospital con buenos resultados clínicos.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 216 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Calabró López, María Valeria
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2017-06-21

Temas:   Ciencia de la vida   -  Hipertensión   -  Oxidantes   -  Antioxidantes   -  NADPH oxidasa   -  Flavonoides

Descripción: Estudios epidemiológicos muestran una disminución en la incidencia de enfermedades cardiovasculares (ECV) y de hipertensión (HT) en sujetos que consumen regularmente una dieta rica en frutas y hortalizas. Estos estudios apoyan la idea de que los beneficios podrían estar causalmente relacionados con la presencia de ciertos flavonoides en las frutas y hortalizas. Los flavonoides han sido ampliamente reconocidos por tener una acción antioxidante in vitro y por ello se les adjudicó su efecto beneficioso sobre la salud. Sin embargo, en los últimos años se ha incrementado la evidencia acerca de otros posibles mecanismos de acción (interacción con membranas y receptores; regulación de actividades enzimáticas, entre otros efectos) que serían compatibles con los efectos observados in vivo y con la baja concentración de flavonoides presente en los tejidos El óxido nítrico (NO) modula varios aspectos de la fisiología cardiovascular participando en la regulación de la presión arterial, la frecuencia y contractibilidad cardíaca, así como la vasorelajación. La disminución de la biodisponibilidad de NO es considerado un marcador temprano de desarrollo de ECV. La concentración de NO en los tejidos dependerá tanto de su producción por parte de la enzima óxido nítrico sintasa (NOS) como de su metabolización. Una de las vías de metabolización del NO es su reacción con el anión superóxido. La enzima NADPH oxidasa es considerada una de las fuentes principales de producción de anión superóxido en el sistema cardiovascular y existe evidencia de su participación en el desarrollo de la ECV. El objetivo general del presente trabajo de tesis fue estudiar los efectos de dos flavonoides suplementados en la dieta, (?)-epicatequina (EC) y quercetina (QC), sobre el metabolismo del NO y del anión superóxido, y los posibles mecanismos de acción involucrados, en tejido cardíaco. Para ello se seleccionaron dos modelos animales en donde se desarrolla un aumento de la PA y en los cuales se encuentra comprometida la biodisponibilidad de NO. En el primer modelo se indujo el aumento de la PA por inhibición de la enzima óxido nítrico sintasa (NOS) con L-NAME. Este inhibidor se administró en el agua de bebida (360 mg/L) durante 4 días a un grupo de animales, mientras que a otros dos grupos se les coadministró EC o QC (4 g/kg de dieta). La administración de dichos compuestos fue efectiva en prevenir el aumento de la PA y del estrés oxidativo inducido por L-NAME, así como los cambios en el metabolismo del NO (en el caso de la EC) y del anión superóxido (para ambos compuestos). Así, tanto la EC como la QC fueron eficaces en prevenir la disminución de la biodisponibilidad de NO en corazón, siendo los mecanismos implicados en su restablecimiento a valores controles los siguientes: i) un aumento de la actividad de NOS y de los niveles de fosforilación de eNOS en presencia de EC, ii) una disminución de la producción de anión superóxido dependiente de NADPH oxidasa, asociada a una menor expresión de la subunidad regulatoria p47phox en presencia de EC y QC. En conjunto, dichos eventos conducen a un menor consumo de NO a través de su reacción con el anión superóxido y a un aumento de su biodisponibilidad en tejido cardíaco en este modelo experimental. En el segundo modelo se indujo el aumento de la PA por administración de fructosa en el agua de bebida, que promueve alteraciones funcionales y metabólicas similares al síndrome metabólico en humanos. La fructosa se administró en el agua de bebida (10% p/v) por 8 semanas y a un grupo de ratas se les coadministró EC (0,2 g/kg de dieta). La administración de EC en la dieta fue eficaz para prevenir el aumento de la PA y del estrés oxidativo y mejorar parámetros metabólicos alterados por la sobrecarga de fructosa. Así, la EC fue eficaz para prevenir la disminución de la biodisponibilidad de NO en corazón, siendo los mecanismos implicados en su restablecimiento a valores controles los siguientes: i) el aumento de la actividad de NOS sin modificación en la expresión de eNOS, pero con incremento en la fosforilación de eNOS en Ser1177 y ii) la prevención del estrés oxidativo como consecuencia de una menor producción de anión superóxido dependiente de NADPH oxidasa, asociado a una menor expresión de la subunidad regulatoria p47phox en presencia de EC. En conjunto, dichos eventos conducen a un menor consumo de NO a través de su reacción con el anión superóxido y a un aumento de su biodisponibilidad en tejido cardíaco en este modelo experimental. De acuerdo a los resultados obtenidos en los distintos estudios de esta tesis, se puede concluir que el efecto antihipertensivo de la EC y la QC involucra un conjunto de mecanismos alternativos a una acción antioxidante clásica. Podemos inferir que los flavonoides estudiados serían los responsables, al menos en parte, de los efectos beneficiosos sobre el sistema cardiovascular y la hipertensión. Los hallazgos descriptos en esta tesis proporcionan nueva e importante información para diseñar dietas enriquecidas en dichos compuestos y/o realizar estudios de intervención dirigidos a la prevención y/o tratamiento de enfermedades metabólicas y crónicas no transmisibles en las cuales la biodisponibilidad de NO esté comprometida
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: unknown  (tamaño kb)  Pag. 209 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Busso Casati, Carolina Inés
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2017-03-02

Descripción: La tendencia en alimentación saludable incentiva a la demanda de alimentos donde se incluyen los llamados "alimentos funcionales", con altas cantidades de compuestos bioactivos y efectos beneficiosos sobre la salud, como son los polifenoles. Los polifenoles presentes en alimentos de origen vegetal, son estudiados por sus propiedades captadoras de radicales libres, que le confieren actividad antioxidante. La producción de frutos rojos o berries constituye un negocio en expansión en la Patagonia, donde las condiciones agroecológicas son ideales para su producción. En los últimos años ha aumentado la demanda de estas frutas para su uso como ingredientes en la industria, solos o en mezclas con otros alimentos como productos lácteos. El nivel considerable en compuestos bioactivos como antocianinas reportado para estas frutas las hace interesantes para su uso en el desarrollo de alimentos funcionales. El objetivo de este trabajo fue realizar una caracterización fisicoquímica y determinar los niveles de compuestos bioactivos (contenido de polifenoles totales-PT, antocianinas-AMT) capacidad antioxidante-CAT y color (parámetros CIELab, índices de color polimérico) en pulpas de arándano, sauco, cassis y maqui originarios de El bolsón, solas, en productos comerciales existentes en el mercado y en formulaciones en base a azúcares y maltodextrina (MD). Se estudió también el efecto del almacenamiento y procesos de preservación en las características y estabilidad de los productos. Mediante ensayos de almacenamiento acelerado se analizaron cambios fisicoquímicos y sensoriales y a través de la evaluación sensorial su aceptación por parte del consumidor. Se determinaron los parámetros cinéticos de deterioro de AMT y color durante el almacenamiento y tratamientos térmicos (velocidades de degradación, tiempos medios, Energías de activación Ea y Q10). También se evaluó la adición de ácido ascórbico en la estabilidad de los sistemas. Se estudió la estabilidad de compuestos bioactivos y color en productos obtenidos por concentración al vacío, liofilización y secado spray. Entre las frutas estudiadas, el arándano presentó el contenido más bajo de polifenoles y antocianinas totales en las pulpas naturales, cerca de 3000 mg/l de PT y 290 mg/l en AMT. En sauco y maqui poseen valores intermedios de PT, entre 5500 y 6000 mg/l y en el cassis los valores son significativamente más elevados, de 10300 mg/l en la pulpa natural. En cuanto a AMT, presentaron en orden creciente sauco 923 mg/l, cassis 1222 mg/l y maqui 1795 mg/l. Las características fisicoquímicas de los jugos fueron similares, destacándose el cassis en cuanto al mayor contenido en ácido ascórbico natural de la fruta. La capacidad antioxidante fue mayor para el cassis, seguida por sauco y maqui en niveles similares y por último el arándano. Durante almacenamiento a 40 °C de los jugos comerciales los parámetros estudiados mostraron cambios significativos, observándose una importante disminución de AMT. En cuanto PT se observó una disminución máxima de un 40 % y un descenso máximo del 50 % en CAT. Las correlaciones entre PT y parámetros de color mostraron valores positivos para el color rojo (a*) y negativos para color amarillo (b*) y luminosidad (L*). Se observó en general un aumento en el parámetro h° y en porcentaje de color polimérico lo que indica el corrimiento hacia tonos más amarronados. En el almacenamiento, se obtuvieron energías de activación en el rango 53-86 kJ/mol para el sauco y cassis, y valores de Q10 entre 1,5-1,85 en el rango 25-38 °C lo que indica un considerable efecto de la temperatura de almacenamiento en la estabilidad de los parámetros estudiados. En los jugos adicionados con ácido ascórbico, los resultados revelaron un aumento en las velocidades de deterioro de AMT y a*. Los parámetros cinéticos de la degradación durante tratamientos térmicos entre 70-90 °C evidenciaron velocidades de deterioro mayores para AMT en relación a la degradación del color. Las Ea de degradación determinadas estuvieron en el rango entre 81 y 118 kJ/mol lo que muestra un efecto considerable de la temperatura de tratamiento térmico para estos sistemas. En cuanto a la degradación de PT y CAT, los resultados fueron similares a los obtenidos durante el almacenamiento, observándose una considerable retención. El proceso de concentración no afectó el contenido de AMT, PT y color pero durante el almacenamiento se observó un importante descenso sobre todo en AMT y color y un aumento en el porcentaje de color polimérico. Las muestras con agregado de sacarosa+MD tuvieron mayor aceptabilidad que las adicionadas con trehalosa o stevia. Los polvos obtenidos por liofilización almacenados a 38 °C mostraron una muy buena retención de AMT (mayor al 75 %) y para los PT sólo se observó un descenso máximo del 15% en el caso de arándano, manteniéndose para las demás frutas. El color rojo de las muestras reconstituidas en base al polvo almacenado también permaneció estable. En cuanto a las muestras obtenidas por secado spray en base a arándano y sauco, las características físicas obtenidas fueron buenas, mostrando también relativamente altos valores en la temperatura de transición vítrea. En las muestras de sauco obtenidas por secado spray se observó una excelente estabilidad de AMT y color luego de 45 días a 38 °C, observándose sólo una disminución del 4% en AMT y del 1% en el parámetro a*. Los resultados obtenidos constituyen un importante aporte al conocimiento de la estabilidad de antocianinas y polifenoles en jugos de frutos rojos sometidos a diversas condiciones de almacenamiento y procesamiento y pueden ser aplicados para el desarrollo de alimentos con beneficios para la salud humana.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: unknown  (tamaño kb)  Pag. 217 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Meroño, Tomás
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2015-03-17

Descripción: La sobrecarga y la deficiencia de hierro fueron asociadas a mayor riesgo de enfermedad cardiovascular (ECV). Sin embargo, los mecanismos involucrados y su impacto clínico resultan poco conocidos. Asimismo, aún no ha sido evaluado el potencial terapéutico del mantenimiento de la homeostasis del hierro sobre los factores de riesgo de ECV. El objetivo de la tesis fue evaluar el rol de los niveles de hierro sobre la inflamación, la disfunción endotelial y la aterosclerosis a través del estudio de sus bioindicadores en pacientes con sobrecarga y deficiencia de hierro en comparación con controles sanos, y estudiar el impacto de sus respectivos tratamientos. Se evaluó el metabolismo de los glúcidos y los lípidos, la actividad de enzimas asociadas a lipoproteínas, la composición química y funcionalidad de las lipoproteínas aisladas, y bioindicadores de inflamación y aterosclerosis. En ambos trastornos del metabolismo del hierro, se observaron: alteraciones en el perfil lipoproteico, presencia de lipoproteínas modificadas y disfuncionales, y un estado proinflamatorio caracterizado por una mayor actividad de fosfolipasa-A2 asociada a lipoproteínas. Estas alteraciones revirtieron en respuesta a los tratamientos respectivos de cada condición. En conclusión, las alteraciones del metabolismo del hierro se asocian a procesos proinflamatorios capaces de promover el desarrollo de ECV.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 172 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Micucci, Horacio Alejandro
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2015-12-23

Descripción: Las deficiencias o la inexistencia de sistemas de información en salud es una problemática internacional. En esta tesis se plantea la pérdida de información de gran parte del sector privado y de obras sociales en la atención sanitaria argentina. Se busca esbozar una solución al problema de la notificación privada al sistema de vigilancia en salud. Para ello se fundamentan los diseños y se evalúan los resultados de dos experiencias de notificación por parte un sector de bioquímicos privados, demostrando la factibilidad de repetirlas y extenderlas. Este diseño de la notificación bioquímica privada permitiría, de extenderse, utilizar personal científico capacitado, contribuir a hacer más accesible el acto de salud y ampliar la información apta para la vigilancia epidemiológica de un amplio sector cuyos datos se pierden, a condición de que el Estado asuma un rol central en la estructura sanitaria más allá de los cambios de gobierno. Los resultados de la tesis y el análisis de las principales fortalezas, oportunidades, debilidades y amenazas en las experiencias presentadas permiten afirmar que los agentes de salud privados de pequeña envergadura pueden integrarse en un sistema nacional de salud e información, de directriz estatal, y que su capacidad instalada no debe desecharse.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 126 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Bach, Hernán Gerónimo
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2015-04-16

Temas:   Ciencia de la vida   -  Valeriana   -  Ñancolahuen   -  Anatomia   -  Valerianaceae   -  Antioxidante   -  Farmacobotánica

Descripción: El género Valeriana (Valerianaceae) está constituido por aproximadamente 250 especies. En la región patagónica Argentina hay especies nativas de valeriana que se utilizan en medicina tradicional. Los usos populares de las ?valerianas? son: tratamiento de los estados neuróticos, trastornos menores del sueño y dolores gástricos. Los estudios anatómicos se realizaron con las técnicas de corte y coloración. En el estudio de polifenoles se cuantificaron fenoles totales, ácidos hidroxicinámicos y flavonoides. Los aceites esenciales se analizaron por GC-FID-MS. El estudio de la actividad antioxidante in-vitro se midió con las técnicas de DPPH y ABTS. En V. clarionifolia la estructura primaria de la raíz forma una protóstela ectofloica. La estructura secundaria una actinostela hexarca. El rizoma de V. carnosa posee estructura anómala. Ambas especies presentan escasos granos de almidón. Las mayores concentraciones de polifenoles se cuantificaron en el estadio fenológico de la floración. Los aceites esenciales mayoritarios son beta-sesquifelandreno alfa-pineno, acetato de bornilo y ácido isovaleriánico. Asimismo se reporta la presencia de dolichodial y epidolichodial. La actividad antioxidante de los cocimientos es mayor en las dos especies en el estadio de la floración. El presente estudio aporta importante información que puede ser utilizada en control de calidad de medicamentos herbarios.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: unknown  (tamaño kb)  Pag. 162 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Fernández, Ignacio
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2017-03-30

Temas:   Ciencia de la vida   -  Brucella   -  Sistema de dos componentes   -  Hipoxia   -  NtrY   -  NtrX   -  Brucella abortus

Descripción: Brucella abortus es una bacteria patógena que infecta al ganado bovino y al humano, causando una enfermedad conocida como brucelosis. Esta bacteria se caracteriza por una gran versatilidad metabólica que le permite sobrellevar las condiciones adversas que encuentra durante su ciclo de infección, entre las que se destaca la baja concentración de oxígeno de su nicho replicativo intracelular. Se ha descripto que una vía de señalización formada por la histidina quinasa NtrY y el regulador de respuesta NtrX participa en el la respuesta adaptativa que lleva adelante B. abortus frente a la microaerobiosis. Puesto que existe muy poca información respecto al funcionamiento de dicha vía, el objetivo de esta tesis doctoral ha sido dilucidar las bases moleculares del mecanismo de activación del sistema de señalización formado porNtrY y NtrX de B. abortus. Para ello, se llevó adelante una caracterización bioquímica y estructural del sistema. Se ha demostrado que NtrY es una enzima bifuncional (quinasa y fosfatasa) y se probó larelevancia de un residuo de cisteína (C569) en su regulación in vitro en respuesta al estado al estado redox. Además, se han reportado las primeras estructuras cristalográficas del dominio REC de NtrX y de la proteína completa, así como una descripción de su estado oligomérico, su capacidad para unir ligandos e interactuar con el ADN. Los resultados obtenidos implican un avance importante en el conocimiento respecto de esta vía de señalización y proporcionan antecedentes para continuar indagando los detalles de su activación.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 148 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Jozefkowicz, Cintia
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2016-03-09

Temas:   Ciencia de la vida   -  PIP   -  PIP1   -  PIP2   -  Acuaporina   -  Membrana plasmáticas   -  Homotetrámeros   -  Tetrámeros

Descripción: La asociación específica de canales de membrana plasmática de las células vegetales para formar arreglos oligoméricos es un evento biológicamente relevante porque confiere ventajas funcionales a la fisiología celular vegetal. En el caso de las acuaporinas de plantas, se sabe que estas se encuentran como canales oligoméricos en distintas membranas de la célula vegetal y al momento de comenzar este trabajo doctoral se habían reportado evidencias que apoyaban que las acuaporinas vegetales de membrana plasmática (PIP) podrían interactuar para formar oligómeros mixtos mediante la combinación de monómeros del tipo PIP2 y PIP1. Sin embargo, restaba comprender el tipo de oligómero que forman los parálogos PIP1 y PIP2 y el tipo de estequiometría alcanzada al ensamblarse. Asimismo, si bien estaba ampliamente reportada la interacción funcional entre algunas PIP1 y algunas PIP2, no era claro si todas las PIP1 y todas las PIP2 son capaces de interaccionar, y se desconocían los determinantes estructurales que resultan claves para la interacción entre ambos subtipos de acuaporinas. Siendo este el estado de conocimiento sobre las relaciones estructura-función del grupo PIP de acuaporinas vegetales, el trabajo de tesis aquí presentado se centró en investigar la capacidad de las acuaporinas de este grupo para formar arreglos hetero-oligoméricos, determinando su actividad, regulación, localización, e indagando cuáles podrían ser los determinantes estructurales necesarios para que tenga lugar la interacción entre PIP1 y PIP2. Para lograr este objetivo, se examinaron las propiedades funcionales de 2 acuaporinas de Beta vulgaris tipo PIP2 en cuanto a su interacción con PIP1 y se evaluó la formación de distintas especies tetraméricas. Nuestros enfoques experimentales incluyen: i) la medición de la actividad biológica de los tetrámeros en cuanto a su capacidad de transportar agua; ii) el análisis de la localización de PIPs fusionadas a EYFP o ECFP por microscopía de fluorescencia confocal; iii) el diseño y la evaluación funcional de mutantes que permitan estudiar la interacción PIP1-PIP2; iv) la realización de construcciones homo y hetero-diméricas de PIP1 o PIP2; v) el estudio de la regulación de la actividad biológica de los diferentes arreglos tetraméricos por cambios en el pH citosólico; y vi) la realización de estudios bioinformáticos y estructurales de PIPs in silico. Los resultados obtenidos durante el desarrollo de esta Tesis Doctoral muestran que no es posible generalizar que cualquier miembro del grupo PIP2 es capaz de interactuar con cualquier miembro del grupo PIP1, siendo el primer loop extracelular de PIP2 un elemento estructural clave en la interacción entre monómeros en el tetrámero y un posible controlador del fenómeno de hetero-tetramerización. A su vez, hemos podido demostrar que distintos tipos de hetero-tetrámeros PIP1-PIP2 con estequiometrías 2:2, 1:3 y 3:1 son capaces de formarse y alcanzar la membrana plasmática en el sistema de expresión heterólogo de oocitos de Xenopus; lasevidencias experimentales halladas muestran que el ensamblado de PIP1-PIP2 en hetero-tetrámeros ocurre con estequiometría flexible y dependiente de la expresión relativa de cada uno de los parálogos. Interesantemente, todas las especies hetero-tetraméricas presentan igual actividad biológica en términos de transporte de agua y respuesta cooperativa a la regulación por pHint. Sin embargo, las propiedades de los hetero-tetrámeros PIP1-PIP2 difieren de las propiedades halladas para los homo-tetrámeros. Dado que la presencia en membrana plasmática de hetero-tetrámeros vs homo-tetrámeros depende de cantidad de proteínas PIP2 disponibles en relación a la cantidad de proteínas PIP1, y considerando que estos ensambles poseen importantes diferencias funcionales, el manejo de la expresión relativa PIP1/PIP2 se torna un mecanismo de regulación del transporte de agua en la célula vegetal. Así, nuestros hallazgos arrojan luz no sólo la estequiometría de los hetero-tetrámeros formados por PIP1-PIP2 y su funcionalidad biológica, cuestiones que estaban pendientes de ser elucidadas en el campo biofísico de las acuaporinas vegetales, sino también sobre la hetero-tetramerización de las PIPs como un nuevo mecanismo de regulación relevante para ajustar el transporte de agua a través de la membrana plasmática de las células vegetales.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: unknown  (tamaño kb)  Pag. 144 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Olmos, Valentina
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2016-08-08

Descripción: La influencia del nivel de exposición al arsénico (As) sobre su perfil metabólico urinario se evaluó en población Argentina, expuesta crónicamente al As. Se investigó el perfil metabólico urinario (As inorgánico, ácido monometilarsónico y ácido dimetilarsínico) y se utilizó el As urinario (suma de todos los metabolitos) como medida del nivel de exposición. Se investigó la presencia de tres polimorfismos: T860C en el gen codificante de la arsenito metiltransferasa, y C677T y A1298C en el gen codificante de la metilentetrahidrofolato reductasa. Se observó influencia de la edad, el género, el nivel de exposición y la presencia del polimorfismo T860C sobre el perfil metabólico urinario del As. No se observó influencia de los polimorfismos C677T o A1298C. La influencia del nivel de exposición sobre el perfil metabólico urinario del As mostró ser diferente entre niños y adultos, hombres y mujeres y entre individuos portadores de los genotipos silvestre y heterocigota para el polimorfismo T860C. La exposición al As debe reducirse drásticamente, no sólo para reducir los efectos nocivos para la salud del As, sino también porque la capacidad de metabolizar el As de ciertos subgrupos de población, podría verse afectada potenciando el riesgo de desarrollo de enfermedad.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 179 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Charó, Nancy Lorena
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2015-03-31

Descripción: En trabajo previo de nuestro laboratorio se demostró que la proteína nuclear no histónica HP1y se concentra transitoriamente en el polo del núcleo opuesto al centro organizador de microtúbulos al inducir la diferenciación de preadipocitos 3T3-L1. Nos preguntamos si la polarización nuclear de HP1y ocurría en otros procesos de diferenciación celular, y para ello analizamos la distribución de HP1y durante el proceso de miogénesis. Empleando inmunofluorescencia indirecta y microscopía confocal observamos que en mioblastos C2C12, HP1y además de localizarse en regiones nucleares eucromáticas y heterocromáticas como ya se había reportado (Minc et al., 1999; Minc et al., 2000), llamativamente se localiza en el citoplasma. Luego de 4 días de inducida la diferenciación, los mioblastos dan lugar a la formación de miotubos donde HP1y se localiza mayoritariamente en el citoplasma adoptando un aspecto filamentoso muy marcado, que se dispone en forma longitudinal al miotubo. En cambio, HP1a, otro miembro de la familia de las HP1 altamente homóloga a la isoforma y, se encuentra sólo presente en el núcleo tanto de mioblastos como de miotubos. Análisis por Western blot de las fracciones nucleares y citoplasmáticas de mioblastos y miotubos confirmaron que HP1y se encuentra en ambas fracciones. De manera relevante, observamos que HP1y se localiza en el citoplasma en forma de filamentos que se estructuran transversalmente tanto en miotubos C2C12 maduros como en miofibrillas aisladas de músculo esquelético de ratón. En función de su distribución filamentosa observada en miotubos y en miofibrillas de músculo de ratón, investigamos su posible asociación con proteínas que forman el citoesqueleto, y así encontramos que HP1y interacciona con actina y tubulina, hallazgo muy novedoso descripto por primera vez. Finalmente, para investigar la importancia funcional de HP1y durante el proceso de miogénesis, se generaron mioblastos C2C12 en los que se interfirió la expresión de HP1y de manera estable empleando ARNsh, células que luego fueron inducidas a diferenciarse. Al cabo de 4 días de diferenciación, las C2C12 HP1y- mostraron diferentes fenotipos, desde la formación de miotubos delgados atróficos hasta la inhibición del proceso miogénico, dependiendo ello del nivel de interferencia de HP1y. En síntesis, HP1y no es una proteína de exclusiva localización nuclear y cumple un rol esencial en la correcta formación del miotubo.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 162 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Cerón Cucchi, María Esperanza
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2014-12-17

Descripción: La llama (Lama glama) es un herbívoro que posee un sistema digestivo conformado por 3 compartimentos. El primer compartimento (C1), similar al rumen en los rumiantes, posee un ecosistema microbiano complejo que incluye bacterias, protozoos, arqueas y hongos, y es donde ocurre la fermentación del forraje consumido, un proceso fundamental para la nutrición del animal. El C1 de la llama se encuentra pobremente caracterizado debido a las dificultades que involucra trabajar con los microorganismos que lo habitan. El objetivo de este trabajo fue contribuir al conocimiento de los microorganismos presentes en el C1 de la llama procedentes de dos zonas geográficas distintas (Buenos Aires y Jujuy). Se cuantificaron parámetros tales como pH, amoníaco y ácidos grasos volátiles. Se pudo revelar a las principales bacterias y arqueas metanogénicas que habitan el C1. Se detectaron potenciales nuevas especies bacterianas, además se logró la cuantificación y detección de géneros y especies de protozoos. Este es el primer trabajo en proveer información sobre la cuantificación, detección y diversidad genética de microorganismos anaerobios presentes en el C1 de la llama. Este estudio provee una visión del ecosistema bacteriano del C1 de la llama y sienta las bases para futuros estudios.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: unknown  (tamaño kb)  Pag. 181 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Gojanovich, Aldana Daniela
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2017-02-21

Descripción: Las MSCs (mesenchymal stem cells) se pueden diferenciar a células del linaje mesenquimal, incluyendo adipocitos y osteoblastos. Al activarse la vía Hippo, TAZ, efector de la vía y coregulador transcripcional, se fosforila en Ser 89, lo que provoca su unión a las proteínas reguladoras 14-3-3 en el citoplasma. Esto impide la represión de genes implicados en adipogénesis (que por ende se expresan). En mamíferos, la familia 14-3-3 está compuesta por 7 parálogos que se unen específicamente a residuos fosforilados en serina o treonina (pS/T) en sus proteínas blanco. Nuestra hipótesis fue que la interacción con TAZ era específica de un o algunos parálogo/s de 14-3-3. Se observaron variaciones en los niveles de los parálogos de 14-3-3 durante la adipogénesis de células hASCs y 3T3-L1. La variación se produjo tanto a nivel del ARNm como de la proteína, siendo específica para los parálogos 14-3-3y, (B), (n) y E. El parálogo más variable fue 14-3-3y, cuyos valores aumentaron durante la adipogénesis de hASCs y 3T3-L1. Tras el silenciamiento de 14-3-3B los resultados sugerirían que ésta podría regular la localización subcelular de TAZ. Nuestro análisis apoya el concepto actualmente creciente de funciones moleculares específicas para los diferentes parálogos de 14-3-3.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 128 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Juriol, Lorena Vanesa
2016-03-30

Temas:   Ciencias Bioógicas   -  Deficiencia de zinc   -  Programación fetal   -  Corazón   -  Ratas   -  Prenatal   -  Postnatal

Descripción: El presente estudio evaluó si la deficiencia moderada de zinc durante la vida fetal y postnatal, en ratas, induce alteraciones cardíacas que predisponen al desarrollo de enfermedades cardiovasculares en la vida adulta y diferencias de sexo. Ratas Wistar recibieron durante la preñez hasta el destete una dieta control o baja en zinc. Las crías continuaron con dieta control o baja en zinc hasta la adultez. La deficiencia de zinc durante la vida fetal y postnatal indujo un aumento de la presión arterial sistólica y menor contractilidad asociada al aumento de apoptosis, inflamación, actividad antioxidante y disminución en la expresión de TGF-?1, sistema del óxido nítrico y manejo de calcio en el ventrículo izquierdo de machos. El adecuado aporte de zinc luego del destete no logró revertir el incremento de presión arterial, pero si los efectos sobre la morfología y función cardíaca. Las hembras fueron menos sensibles a esta deficiencia, ya que no se presentaron cambios en la presión arterial y en la estructura y función cardiaca. Este estudio demuestra la importancia de optimizar la dieta, durante el desarrollo prenatal, para prevenir enfermedades cardiovasculares, y también durante la vida postnatal, para disminuir las consecuencias de esta deficiencia durante la vida fetal.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 181 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Wood, Irene
2016-02-23

Descripción: Los triptanos son fármacos antimigrañosos diseñados a partir de serotonina (5-HT). Son agonistas selectivos de receptores 5-HT1 pero difícilmente atraviesan la barrera hemato-encefálica (BHE) para acceder a receptores centrales. Si bien el prototipo sumatriptan es de los triptanos más usados y está disponible en distintas formas, resulta necesario optimizar su eficacia y seguridad. Teniendo en cuenta que los poloxámeros son nanomateriales adecuados para vehiculizar fármacos, mejorarían la farmacocinética de sumatriptan, favorecerían su liberación prolongada y potencialmente su permeación a través de membranas. Aquí, realizamos simulaciones computacionales para entender el comportamiento de triptanos en membranas modelo. La interfase cumplió un papel clave en el anclaje de los compuestos indólicos: los grupos fosfato y colina favorecieron la distribución interfacial de estos compuestos, mediante múltiples interacciones. Confirmamos estos resultados experimentalmente. El comportamiento observado indica que estos compuestos no difunden fácilmente a través de membranas, como la BHE, con lo cual otro mecanismo de transporte sería necesario. También estudiamos la agregación de poloxámeros en agua y la encapsulación de sumatriptan en micelas poliméricas (resultaron adecuados). Los poloxámeros estudiados interactuaron con fosfatidilcolina dependiendo del entorno y su balance hidrofílico-lipofílico. Sería necesario profundizar en los efectos de estos poloxámeros sobre la permeación de fármacos.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 160 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Guaytima, Edith del Valle
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2017-03-17

Descripción: La organogénesis del riñón es un proceso secuencial cuyo principal evento es la mutua inducción entre las células del mesénquima metanéfrico (MM), y las células epiteliales del brote ureteral (BU). Como resultado, el MM experimenta una transición mesénquima?epitelio (TME) para dar origen al nefrón, y el BU sufre sucesivas ramificaciones que originarán el sistema de túbulos colectores. Durante la nefrogénesis, la síntesis de bradiquinina (BK) aparece muy temprano, y la expresión del ARNm para su receptor B2 (RB2) es mucho mayor en el riñón en desarrollo que en el adulto. Asimismo, el bloqueo farmacológico del RB2 durante la etapa fetal provoca una diferenciación anormal de los túbulos renales, pero aún no se han descripto las causas bioquímicas ni morfológicas que lo justifiquen. Por lo tanto, se planteó como objetivo general estudiar el papel que cumple la hormona intrarrenal BK en el desarrollo posnatal de la papila renal. Se eligió como modelo de estudio cultivos primarios de células de TCd de papila renal de ratas neonatas, puesto que en la rata, el riñón completa su desarrollo en el periodo posnatal. La primera parte de esta tesis se centró en la caracterización morfológica y fenotípica de las células de TCd en el cultivo primario. Mediante ensayos de inmunofluorescencia de doble marcación se observó que las células de TCd en cultivo poseen una gran tendencia a unirse entre sí para formar colonias migratorias, que se evidenció por la presencia de lamelipodios en las células del borde de la colonia. Durante el desarrollo renal, los cambios morfológicos ocurren aceleradamente. En los cultivos primarios, estos cambios se ven reflejados en el alto nivel de heterogeneidad que exhiben las colonias, en relación con el grado de asociación, y de maduración o diferenciación de las células de TCd. Por otra parte, el análisis fenotípico de las células que aparecen en los cultivos primarios como células aisladas, brindó la información necesaria para concluir que se trata de células mesenquimáticas. Las reconstrucciones 3D y perfiles xz permitieron deducir que estas células se localizan de forma adyacente o por debajo de las células de la monocapa. La baja velocidad y cortos tiempos de centrifugación aplicados durante el aislamiento de los TCd de la papila, evitó la contaminación con células individuales. Por lo tanto, se interpreta que estas células con características mesenquimáticas se originan in situ en el cultivo primario mediante un proceso de transición epitelio-mesénquima (TEM) de las células de TCd. El conjunto, los resultados sugieren la existencia de un ?equilibrio dinámico? entre las células de TCd que forman parte de las colonias, y las células que no lo hacen, fuertemente desplazado hacia las primeras. Las reconstrucciones 3D, perfiles xz y experimentos en tiempo real muestran claramente que las células mesenquimáticas generadas in situ, finalmente se insertan entre las células de la colonia, y, como consecuencia de la inducción por parte de las células de TCd, experimentan una TME para quedar definitivamente integradas en la monocapa. Sobre la base de los resultados expuestos, se plantea un modelo en el cual las células mesenquimáticas que se originan de novo funcionarían de nexo entre el modelo de nefrogénesis propuesto más recientemente que incluye dos conversiones fenotípicas (TEM-delaminación-TME), y el modelo clásico de mutua inducción. En la segunda parte de la tesis se estudió el efecto de la BK sobre las células de TCd. Para ello, las células se estimularon con BK en presencia o en ausencia de un antagonista específico de RB2, HOE-140, o de un inhibidor específico de PI3K, LY294002. El análisis de las células de TCd tratadas con BK reveló la formación de un córtex continuo de filamentos de actina alrededor de la colonia, y la presencia de bordes ondulatorios o ?ruffles? de membrana en las células de la periferia. Los experimentos realizados en tiempo real confirmaron tales fenómenos y mostraron un aumento en la velocidad de formación y tamaño de lamelipodios y ?ruffles?, así como la adquisición de un mayor nivel de compactación celular, reflejado por la disminución del área total de las colonias. El pre-tratamiento con HOE-140 afectó la adhesión célula-célula inducida por BK y la formación de ?ruffles?. El análisis conjunto de las imágenes de inmunofluorescencia y los resultados de experimentos realizados en tiempo real en presencia de LY294002, demostraron la participación de PI3K en la asociación célula-célula, y en la formación de estructuras migratorias inducidas por BK. Asimismo, el análisis por Western blot evidenció que la activación de PI3K mediada por la unión de BK a RB2 induce en la células de TCd la activación de su efector ?corriente abajo? Akt, debido a un incremento de su forma fosforilada (Akt-P), hecho que ocurre solo en ausencia de HOE-140, y de LY294002. Esta situación se vio reflejada en las imágenes de inmunofluorescencia, donde se observa una mayor intensidad de marcación de Akt-P, y también de Rac1, un conocido efector ?corriente abajo? de PI3K que participa en la formación de lamelipodios. Resumen 3 En conclusión, los resultados presentados en este trabajo de tesis doctoral ofrecen nuevas evidencias experimentales que resaltan el rol que ejerce la BK durante el desarrollo postnatal del riñón, a través de su unión a RB2 y posterior activación de la vía PI3K/Akt/Rac1, mecanismo que favorece la migración colectiva del BU durante la nefrogénesis, desde la zona donde se origina en la papila, hasta la corteza renal donde ocurre la mutua inducción entre el MM y el BU, para dar origen al nefrón y al sistema de túbulos colectores, respectivamente.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 140 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Varani, Andrés Pablo
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2015-08-28

Temas:   Ciencia de la vida   -  Nicotina   -  Adicción   -  GABAb   -  Receptores   -  Drogas

Descripción: La nicotina es el principal componente activo del tabaco y juega un papel importante en la adicción al mismo. En roedores, la administración aguda de nicotina modifica la locomoción, ansiedad y nocicepción; mientras que administraciones repetidas producen respuestas conductuales relacionadas con sus propiedades adictivas, como el efecto reforzante y la dependencia física. En nuestro estudio, se utilizó un abordaje genético y farmacológico para evaluar la hipótesis de que los receptores GABAB modulan las propiedades adictivas de la nicotina. Con este fin, respuestas conductuales agudas (hipolocomoción, antinocicepción y conductas relacionadas con la ansiedad), efecto reforzante y síndrome de abstinencia (manifestaciones somáticas y motivacionales) de la nicotina se investigaron en ratones pretratados con baclofen (agonista GABAB) o 2-OH-saclofen (antagonista GABAB) (abordaje farmacológico) y en ratones deficientes de la subunidad GABAB1 (GABAB1 knockout) (abordaje genético). En estos animales, exploramos posibles alteraciones neuroquímicas (concentraciones de dopamina, noradrenalina y serotonina) y moleculares (expresión de c-Fos y receptores nicotínicos). En resumen, observamos que alteraciones conductuales, neuroquímicas y moleculares inducidas por las propiedades adictivas de la nicotina fueron modificadas por la estimulación (baclofen), el bloqueo (2-OH-saclofen) o la falta (ratones GABAB1 knockout) de receptores de GABAB. En conclusión, estos resultados sugieren que los receptores GABAB juegan un papel en las propiedades adictivas de la nicotina y apoyan la hipótesis de que agonistas de los receptores GABAB podrían ofrecer ventajas terapéuticas para el tratamiento de la dependencia al tabaco.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 187 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Brandán, Yamila Romina
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2017-03-01

Descripción: Los túbulos colectores (TC) renales están formados por un epitelio simple, y su organización tisular y función requieren de la presencia de estructuras de adhesión celular, como son los contactos focales (CF) y las uniones adherentes (UA), que conectan el citoesqueleto de actina con la matriz extracelular, o con los complejos de unión célula-célula, respectivamente. Esta conexión se establece básicamente debido a la presencia de vinculina, molécula que posee sitios de unión a lípidos de membrana, a actina y a proteínas que forman parte de ambas estructuras de adhesión celular. En trabajos previos realizados con células de TC de papila renal, se demostró que la hormona bradiquinina (BK) provoca una reestructuración reversible de los CF, induciendo la movilización de vinculina, con la aparición simultánea en el citosol de vesículas conteniendo esta proteína. Estos trabajos pioneros sirvieron de base para la realización del presente trabajo de tesis. Se eligió como modelo de estudio cultivos primarios de células de TC de papila renal de ratas adultas. Se observó que estas células conservan in vitro las características típicas de las células de TC en el tejido intacto. Este comportamiento se vio reflejado por el crecimiento en monocapas, la expresión de los glicoconjugados (DBA+) característicos de este tipo celular, filamentos intermedios constituidos por citoqueratina-7, la formación de UA y el desarrollo de un cilio primario. En la primera parte de la tesis se realizaron estudios bioquímicos y morfológicos de las vesículas que contienen vinculina. Para ello, se utilizaron muestras enriquecidas en vesículas obtenidas de cortes delgados de papila renal, estimulados con BK. Para el aislamiento de las vesículas se puso en práctica un método inmunomagnético, utilizando un anticuerpo dirigido contra vinculina. Se demostró que la vinculina se asocia de forma periférica a la membrana de las vesículas, orientada hacia el citosol, a través de interacciones electrostáticas. El análisis por Western Blot y espectrometría de masa demostró que contienen, además de vinculina, PI(4,5)P2, componentes del retículo endoplasmático (RE) y del citoesqueleto, y marcadores del compartimiento endosomal de reciclaje (Rab 5, Rab 11 y el receptor de transferrina), poniendo en evidencia la heterogeneidad de las mismas. Sobre la base de los resultados obtenidos, se propuso un modelo dinámico de distribución intracelular de vinculina. Es sabido que cuando no forma parte de las estructuras de adhesión, la vinculina conforma un pool citosólico. Los resultados obtenidos demostraron que, además de una forma libre, la vinculina también presenta una forma asociada a vesículas. Se planteó la existencia de dos poblaciones de vesículas: una localizada muy cerca del núcleo cuya función sería de reservorio, denominada circuito de tránsito restringido de vesículas entre el RE y el aparato de Golgi; y otra localizada en la zona marginal de la célula, que representa un circuito corto de reciclaje de endosomas tempranos, los que participarían del recambio basal de la vinculina asociada a los CF. Cuando se estimulan las células con BK, ocurren dos fenómenos. Por un lado, vinculina se disipa de los CF, la que es captada por las vesículas Rab 5+ preexistentes, que forman parte del circuito corto de reciclaje localizado en la región marginal, y a tiempos prolongados de estimulación, estas vesículas adquieren Rab 11. Esto indica que la estimulación con BK promueve una movilización de vesículas del reservorio, desde el aparato de Golgi hacia la membrana plasmática, para lograr reestablecer las condiciones basales. Además, se demostró que los microtúbulos participan en el transporte de las vesículas que contienen vinculina. Por lo tanto, BK induce una reestructuración reversible de los CF y no su desarmado. Trabajos previos demostraron que las proteínas que forman parte de los CF y UA, entre ellas vinculina, se localizan en microdominios rafts enriquecidos en colesterol y esfingomielina (SM). En la segunda parte de la tesis se estudió la participación de vinculina en el mantenimiento de las estructuras de adhesión celular. Para ello, las células de TC fueron incubadas en presencia de un inhibidor farmacológico, o transfectadas con un ARN de interferencia específico para las enzimas SM sintasa 1 y 2, presentes en el aparato de Golgi y membrana plasmática respectivamente, con el objetivo de disminuir su expresión. Solo la inhibición de la SM sintasa 1 produjo un deterioro de las UA, provocando la pérdida de unión entre las células. Paralelamente, se observó un incremento de la cantidad de CF que contenía vinculina, pero no talina. Puesto que la SM sintasa 1 se localiza en el aparato de Golgi, y su actividad es esencial para la formación de vesículas, el deterioro observado sobre las UA podría deberse a modificaciones en la formación de vesículas que participan en el proceso de transporte y reciclado de los complejos adherentes. Mientras que el aumento de los CF cumpliría un mecanismo compensatorio de las células ante la disolución de las uniones intercelulares, con el fin de mantenerse adheridas a la matriz extracelular, y de esta forma asegurar su supervivencia. En conclusión, los resultados presentados en este trabajo de tesis doctoral aportan nuevas evidencias experimentales que resaltan la participación de la molécula de vinculina en los mecanismos que regulan la plasticidad celular, como lo es la pérdida o mantenimiento de estructuras de adhesión, para responder a cambios que se producen en su entorno sin perder la viabilidad
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 128 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Zubrzycki, Jeremías Enrique
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2015-03-12

Descripción: La podredumbre húmeda del capítulo (PHC), causada por Sclerotinia sclerotiorum, es una de las limitante más importantes para el cultivo del girasol. Este trabajo tuvo como objetivo identificar las regiones del genoma de girasol asociadas a resistencia a PHC a partir de una estrategia de mapeo de QTL sobre una población de líneas recombinantes endocriadas. Se construyó un nuevo mapa genético incorporando marcadores de tipo SNP sobre un mapa existente, se caracterizó el comportamiento fenotípico de la población utilizando infecciones asistidas del patógeno durante cuatro campañas. Se registraron los datos de incidencia, severidad, intensidad y período de incubación. El mapa resultante posee 2823,8 cM y una densidad media de 4,57 cM por loci. Se identificaron 36 QTLs distribuidos en 13 grupos de ligamiento, destacándose dos regiones sobre los GL10 y 15, por su expresión consistente en las diferentes campañas. Los marcadores asociados a estas regiones podrán ser usados por los programas de mejoramiento en el desarrollo de genotipos con mejor desempeño ante el PHC. Asimismo, estos QTL se presentan como candidatos a ser estudiados en profundidad para caracterizar los componentes funcionales responsables de la expresión del fenotipo de interés.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 204 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Dardis, Andrea
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
1999-10-13

Descripción: La HSC por déficit de la enzima P450c21, es un desorden hereditario autosómico recesivo, que presenta una forma clásica, de expresión temprana durante la vida fetal, y una forma no clásica (NC) de expresión tardía postnatal. La forma clásica incluye, una forma severa en la cual está alterada la síntesis de cortisol y aldosterona (forma perdedora de sal, PS) y una forma en la cual la función mineralocorticoidea está conservada (forma virilizante simple, VS). En la forma NC, el exceso de producción de andrógenos adrenales se manifiesta en la prepubertad o adolescencia. Si bien estos pacientes poseen deficiencias parciales de la enzima P450c21, la razón por la cual presentan manifestaciones clínicas más tardías no se conoce. Sin embargo la edad en que se expresa fenotípicamente, coincide con la edad en que se produce la adrenarca, caracterizada por el aumento fisiológico en la producción de andrógenos adrenales. En el humano ha sido descripto un gen activo que codifica para la enzima 21 hidroxilasa, el CYP21B, y un pseudogen inactivo, el CYP21A, duplicados en tandem junto con los genes que codifican para los componentes C4 del complemento, C4A y C4B. Estos genes, ubicados en el brazo corto del cromosoma 6 banda 21.3, presentan un 98% de homología entre sí, lo cual dificulta su análisis a nivel molecular. En pacientes con HSC por déficit de la enzima P450c21, en poblaciones norteamericana y europeas, ha sido descripto que el 25 % de las alteraciones del gen CYP21B representan deleciones, o macroconversiones del gen CYP21B en una forma similar al CPY21A . El 75 % restante representan mutaciones puntuales (MP). Existe escasa información acerca de la frecuencia de estas alteraciones génicas en población latinoamericana Los objetivos del presente estudio fueron :1-Caracterizar las alteraciones del gen CYP21B en pacientes con HSC por déficit de la enzima P450c21, en población argentina. 2- Evaluar las implicancias de la enzima 3?-HSD en la regulación de la síntesis de andrógenos en la adrenal humana, y analizar su vinculación con el inicio de la adrenarca y la expresión fenotípica de la forma NC de HSC por déficit de la enzima P450c21. Nueve alteraciones descriptas del gen CYP21B (deleciones o macroconversiones génicas, P30L, In2, I172N, Ex3, ClEx6, V281L, Q318X y R356W) fueron analizadas en 73 pacientes (146 alelos) con diagnóstico de HSC por déficit de la enzima P450c21, ( 38 con la forma PS, 15 con la forma VS y 20 con la forma NC). Se elaboró una estrategia de estudio del gen CYP21B, que nos permitió caracterizar un 85% de los alelos de pacientes con las formas clásicas, y un 77.5% en pacientes con la forma NC. En las formas clásicas de HSC las alteraciones más frecuentes fueron, al igual que en otras poblaciones, las deleciones o macroconversiones génicas (20.7%), y la MP In2 (24.5%). En los pacientes con la forma NC, la MP más frecuente fué la V281L (57%). La correlación entre el fenotipo y el genotipo mostró que la expresión fenotípica de la patología estaría vinculada a la severidad de la mutación presente en el alelo menos afectado. El análisis de MP poco frecuentes o no descriptas del gen CYP21B, permitió detectar en dos pacientes una sustitución de GG por C en el codón 483, que provocaría un corrimiento de marco de lectura abierto. Esta MP fue descripta previamente en un paciente en población sueca. Sin embargo, los efectos de esta alteración sobre la funcionalidad de la proteína no han sido determinados. Por otro lado, la abundancia del ARNm de las enzimas 3?-HSD y P450c21 fue analizada en 15 tejidos adrenales normales prepuberales. El análisis de los resultados se realizó dividiendo a los sujetos en 2 grupos : Grupo1(Gr1), menores de 8 años, y Grupo2 (Gr2), mayores de 8 años. La abundancia del ARNm de 3?-HSD también fue analizada en 2 tejidos adrenales tumorales virilizantes (TV) y un tumor sindrome de Cushing (TSC). Se observó que la abundancia del ARNm de la enzima 3?-HSD fue significativamente mayor en el Gr1 que en el Gr2, mientras que la abundancia del ARNm de la enzima P450c21 no mostró diferencias entre ambos grupos. Además, la abundancia del ARNm de la enzima 3?-HSD en los TV fue significativamente menor que en el TSC. La caracterización de las alteraciones del gen CYP21B en pacientes con HSC por déficit de la enzima P450c21 en población argentina, representa un aporte de relevancia ya que existe escasa información disponible en poblaciones latinoamericanas. Por otro lado, se vincula a la transferencia asistencial, dado que nos ha permitido realizar diagnóstico prenatal, e implementar conductas terapéuticas destinadas a evitar la virilización genital en los fetos femeninos afectados. Además, posibilitó precisar el diagnóstico en pacientes con la forma NC, en los cuales las técnicas bioquímicas clásicas no son concluyentes. Por otro lado el descenso de la expresión de la enzima 3?-HSD en función de la edad cronológica, podría ser responsable del incremento de la secreción de DHEA y DHEA-S, observado durante la adrenarca. En pacientes con la forma NC de HSC por déficit de la enzima P450c21, probablemente el descenso fisiológico de la expresión de la enzima 3?-HSD ocasione un incremento en la producción de DHEA y DHEA-S de mayor magnitud, dado que ha sido descripta una mayor sensibilidad de la glándula adrenal al ACTH en este grupo de pacientes. Finalmente, los resultados obtenidos sugieren que la expresión del ARNm de la enzima 3?-HSD sería la llave síntesis androgénica en la adrenal humana.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 170 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Ghiglione, Bárbara
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2015-03-27

Temas:   Ciencia de la vida   -  ß-lactamasa   -  CTX-M   -  Ceftazidima   -  Mutaciones   -  Hidrólisis

Descripción: La mayoría de los microorganismos productores de ?-lactamasas CTX-M suele ser resistente a cefotaxima pero sensible a ceftazidima. Por esta razón, estas enzimas se conocen como ?cefotaximasas?. Sin embargo, existen variantes ?emergentes? que poseen la mutación Asp240Gly y son capaces de conferir resistencia a cefotaxima y ceftazidima simultáneamente. En este trabajo demostramos que la mutación Asp240Gly se asocia a un fenotipo claro de resistencia a ceftazidima sólo cuando clones hiperproductores de Escherichia coli carecían de porinas OmpF en la membrana externa. La sustitución de glicina en la posición 240 no afecta visiblemente la conformación ni la estabilidad de la enzima, lo que se traduce en eficiencias catalíticas conservadas frente a los ?-lactámicos. Sin embargo, otorgaría mayor flexibilidad conformacional a la enzima, de manera tal que ceftazidima podría acomodar su sustituyente voluminoso en la cavidad del sitio activo para ser hidrolizado más eficientemente. Las ?-lactamasas CTX-MAsp240Gly tienen eficiencias catalíticas frente a ceftazidima entre 5 y 15 veces mayores que las de sus respectivas variantes salvajes, aunque éstas continúan siendo por lo menos 200 veces más bajas que las de cefotaxima. Es decir que a pesar de ejercer efectos sutiles en el comportamiento cinético, la mutación Asp240Gly puede otorgar una gran ventaja selectiva cuando se combina con impermeabilidad en el ambiente de selección adecuado.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 221 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Aguirre, Alejandra Inés
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2015-03-12

Temas:   Ciencia de la vida   -  Receptor NMDA   -  Alzheimer   -  Memoria   -  Vectores virales   -  Animales   -  Ratas

Descripción: Los receptores NMDA (RNMDA) participan en plasticidad sináptica y memoria. El hipocampo participa en la formación de memoria de largo plazo (MLP),y se encuentra afectado en la Enfermedad de Alzheimer (EA). Investigamos subunidades regulatorias del RNMDA luego de formación de memoria de trabajo (MT) y de MLP dependiente de hipocampo en ratas de genotipo salvaje (Controles) y transgénicas (Tg) modelo de EA (McGill-­?R-­?Thy1-­?APP), jóvenes y de 1 año. Todas tuvieron MT y MLP, pero los aumentos transitorios en GluN1 y GluN2A, detectados en ratas jóvenes luego de habituación, no ocurrieron en ratas añosas. Controles ni Tg, sugiriendo un mecanismo alterado, que no sería requerido para la MLP. Para evaluar la participación de dichas subunidades en memoria, desarrollamos vectores amplicón que expresan ARN antisentido (AS) contra GluN2A y GluN2B. Ratas inoculadas en hipocampo con vectores 2A(AS), mostraron MT y MLP. Las inoculadas con vectores 2B(AS) mostraron MT más tardía y deficiente, y no formaron MLP. Entonces, GluN2B, a la que se unirían los oligómeros de péptidos amiloides-­?? (o?A) en etapas tempranas de EA, no constituirían un blanco terapéutico aceptable. Desarrollamos un anticuerpo monocatenario contra o?A, construimos el plásmido para su expresión en células eucariotas y los vectores amplicón, como posible terapia experimental contra la EA.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: unknown  (tamaño kb)  Pag. 188 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Conde, Pamela Andrea
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2015-04-09

Descripción: El objetivo general de esta Tesis Doctoral consistió en evaluar el efecto de eritropoyetina (EPO) y kit ligando (KITL), durante la maduración in vitro (MIV) de ovocitos. Se utilizaron dos modelos, bovino y murino. En bovinos se estudió el efecto de EPO y KITL en el medio de MIV, en presencia de suero fetal bovino (FCS) o seroalbúmina bovina (BSA), sobre la maduración nuclear y citoplasmática del ovocito, la producción de especies reactivas del oxígeno (ROS) en ovocitos y embriones y la presencia de células apoptóticas en el cumulus. En murinos se evaluó la acción de ambos factores durante la MIV de ovocitos obtenidos a partir del cultivo in vitro de folículos. En presencia de EPO o KITL, el porcentaje de embriones bovinos clivados y de blastocistos se incrementó o tendió a incrementarse respecto al control con BSA, respectivamente. No se observaron diferencias significativas en la maduración nuclear. El número de blastómeras por embrión de 48 hs. fue mayor, se observó un aumento en la producción de ROS por embrión y disminuyó significativamente el porcentaje de apoptosis en las células cumulus respecto al control con BSA. En ratón, la presencia de KITL durante la MIV de ovocitos obtenidos a partir del cultivo in vitro de folículos preantrales aumentó el porcentaje de blastocistos. EPO no mostró diferencias significativas. En conclusión, EPO y KITL no tendrían impacto en la maduración nuclear de los ovocitos bovinos o murinos, sin embargo podrían ejercer un efecto positivo sobre la maduración citoplasmática en las condiciones estudiadas.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 114 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Foscaldi, Sabrina Andrea
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2016-04-21

Temas:   Ciencia de la vida   -  Arenavirus   -  Tacaribe   -  Traducción

Descripción: Las proteínas del virus Tacaribe (TCRV), prototipo de los arenavirus del Nuevo Mundo, se expresan a partir de ARN mensajeros subgenómicos (ARNm), los cuales contienen estructura Cap en su extremo 5?, carecen de cola de poli(A) en el extremo 3?, pero presentan una región 3? no codificante que puede potencialmente formar una estructura secundaria de horquilla (hairpin II), con un presunto papel en la traducción. Para analizar la contribución de las secuencias no codificantes en la traducción de los ARNm de TCRV, se generó un transcripto sintético que imita al ARNm de la Nucleoproteina viral (NP), y que contiene el gen de la Luciferasa de luciérnaga (FLUC). Además, se generaron transcriptos mutantes con modificaciones en la secuencia 3' o 5? no traducible. La eficiencia de traducción de esos transcriptos en células transfectadas fue evidenciada mediante la determinación de la actividad FLUC, junto con la determinación de su estabilidad mediante PCR cuantitativa. En conjunto, los datos sugieren que la estructura secundaria en la secuencia hairpin II y/o su contenido de residuos G/C juegan un papel modulador en la traducción. Por otra parte, tanto la secuencia proximal al codón de terminación en la región 3? no traducible, como la región 5' no codificante contienen motivos de secuencia o estructura que estimulan la traducción. Se encontró que la presencia de NP u otras proteínas virales no afectan la eficiencia de traducción, y que este proceso requiere del factor de traducción eucariota eIF4GI. Además, en este trabajo se desarrolló un sistema de genética inversa que dirige la generación de TCRV recombinante, una herramienta valiosa que permitirá la realización de estudios mecanísticos en el contexto de la infección viral.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 149 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Saporito Magriñá, Christian Martín
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2018-03-14

Temas:   Ciencia de la vida   -  Cobre   -  Glutatión   -  Proteostasis   -  Estrés oxidativo

Descripción: La acumulación intracelular de cobre (Cu) resulta tóxica para las células, como se observa en la enfermedad de Wilson. Sin embargo, aún no se conocen los mecanismos moleculares que conducen a la muerte celular en la sobrecarga intracelular de Cu. Objetivo: determinar si el estrés oxidativo constituye la fuerza impulsora de la muerte celular inducida por Cu, identificar procesos adicionales que puedan estar involucrados y comprender el mecanismo de protección endógena. Resultados: si bien la sobrecarga de Cu genera estrés oxidativo en ratas y células en cultivo, ésta no mantuvo correlación con la sensibilidad de las células al metal y el tratamiento con N-acetilcisteína no protegió a las células. El transcriptoma de las células mostró una intensa respuesta de choque térmico en ausencia de una respuesta antioxidante. Los iones Cu2+/Cu1+ promueven la agregación proteica de manera directa y la toxicidad del metal se potencia con estímulos pro-agregantes, pero no pro-oxidantes. Por su parte, el glutatión resultó ser una molécula endógena protectora capaz de inactivar al Cu y prevenir un amplio espectro de reacciones bioquímicas, independientemente de sus propiedades antioxidantes. Conclusión: la muerte celular inducida por Cu es impulsada por la alteración de la proteostasis, mientras que el glutatión previene esta interacción.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 231 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Carozzo, Alejandro Enrique
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2015-09-16

Temas:   Ciencia de la vida   -  AMPc   -  Páncreas   -  Diferenciación   -  MRP4

Descripción: Los adenocarcinomas ductales pancreáticos (PDAC), el subtipo histológico más frecuente de cáncer de páncreas, es uno de los tipos de tumores más letales, representando la cuarta causa de muerte relacionada con cáncer en los países desarrollados. Distintos componentes de la cascada del AMPc se encuentran frecuentemente alterados en este tipo de neoplasias e incluso en sus lesiones previas. La falta de terapias efectivas para su tratamiento hace necesaria la búsqueda y validación de nuevos blancos terapéuticos y biomarcadores para su detección temprana. En este trabajo de tesis demostramos que la exclusión de AMPc mediada por MRP4 cumple un papel crítico en el proceso de proliferación de células de PDAC, producto de la participación de este nucleótido cíclico en un circuito mitogénico al interactuar con receptores específicos en la membrana plasmática. Asimismo, los resultados obtenidos indican que el AMPc regula la transcripción de MRP4 a través de un mecanismo dual, en el cual, el balance entre los niveles intra- y extracelulares de este segundo mensajero, juega un papel clave en la regulación de la expresión del transportador. Por lo tanto, los resultados experimentales descriptos en este trabajo de tesis, junto a los reportes bibliográficos analizados, permiten postular al proceso de exclusión de AMPc mediado por MRP4 como un blanco validado para futuras intervenciones terapéuticas en PDAC.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 170 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Ferri, Cristian Alberto
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2015-03-16

Descripción: En la Leucemia Mieloide Crónica la resistencia al tratamiento puede deberse, entre otras causas, a mutaciones en el BCR-ABL1, a la sobreexpresión de Src kinasas o subexpresión de genes oncosupresores. La presencia del BCR-ABL1 en la Leucemia Linfoblástica Aguda (LLA) confiere mal pronóstico, por ello se han desarrollado protocolos más agresivos que incluyen inhibidores de tirosina kinasa (ITK). La hipótesis de este trabajo fue determinar si la detección temprana de las mutaciones en BCR-ABL1 y la expresión de los genes LYN y PTEN estarían involucradas en la resistencia al tratamiento. Mediante high resolution melting y ARMS-qPCR se incrementó la detección de mutaciones en un 16% respecto de la secuenciación directa. Se analizó la dinámica del clon mutado y de los transcriptos BCR-ABL1, permitiendo definir el rol de la mutación en la resistencia, seleccionar el ITK adecuado y evaluar respuesta al tratamiento. El análisis de la expresión LYN/PTEN en pacientes resistentes a imatinib o nilotinib y sin mutaciones, permitió asociar la falta de respuesta al tratamiento con la expresión alterada de estos genes. La cuantificación de BCR-ABL1P190 en LLA demostró ser una herramienta importante para evaluar la respuesta al tratamiento y definir enfermedad mínima residual, previo al trasplante de médula ósea.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: unknown  (tamaño kb)  Pag. 151 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Towstyka, Nadia Yasmín
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2017-12-07

Descripción: En esta Tesis se evaluó la activación de células Tyd empleando anticuerpos anti-CD3, fosfoantígenos y cristales de urato monosódico (MSU). Además, se investigó el rol inmunomodulador de los neutrófilos sobre células Tyd. Observamos que la expresión de CD69 y la producción de IFN-y y TNF-a inducida por anticuerpos anti-CD3 fueron potenciadas por neutrófilos. La inhibición de serin proteasas previno la potenciación de la activación de células Tyd y la adición de elastasa, catepsina G y proteinasa3 acélulas Tyd incrementó su activación. El efecto de las serin proteasas sobre las células Tyd fue mediadopor el receptor activado por proteasas, PAR1. Además, se demostró que los cristales de MSU activaron a las células Tyd aumentando la expresión de CD25 y CD69, y la producción de IFN-y y TNF-a. El efecto estimulador de los cristales de MSU fue dependiente de Spleen tyrosinekinase Syk, ya que el tratamiento de las células con el inhibidor GS-9973 disminuyó su activación; asímismo la estimulación de las células con cristales de MSU gatilló la fosforilaciónde Syk.Por otro lado, se observó que los neutrófilosinhibieron la activación de células Tyd inducida por cristales de MSU.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 145 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Bastón, Juan Ignacio
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2015-03-25

Descripción: La endometriosis se caracteriza por la presencia de tejido endometrial fuera de la cavidad uterina formando lesiones que se desarrollan y vascularizan en sitios ectópicos. Galectina-1 (Gal-1) es una lectina endógena que desempeña importantes funciones pro-angiogénicas e inmunomoduladoras en la biología tumoral. El objetivo principal de esta tesis fue estudiar el rol de Gal-1 en la etiopatogenia de la endometriosis. Demostramos que Gal-1 se expresa en las células estromales y endoteliales pero no en las células epiteliales endometriales eutópicas y ectópicas. Además, los niveles de Gal-1 son mayores en las lesiones que en el endometrio eutópico de las pacientes con endometriosis grado I/II, lo cual podría indicar que Gal-1 juega un papel primordial en los estadios tempranos del establecimiento de esta patología. Observamos también que Gal-1 juega un papel significativo en la fisiopatología de la endometriosis, dado que promueve la proliferación in vitro de las células estromales endometriales, además del desarrollo vascular y el crecimiento de las lesiones endometriósicas in vivo. También se demostró que el bloqueo específico a nivel peritoneal de esta lectina limita el crecimiento de las lesiones, lo cual lleva a sugerir que Gal-1 podría convertirse un blanco terapéutico potencial para combatir la progresión de esta enfermedad.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 147 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Tuttolomondo, María Victoría
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2014-12-09

Temas:   Ciencia de la vida   -  Remediación   -  Sol-gel   -  Colageno

Descripción: El impacto de los residuos generados por la actividad del ser humano sobre el ecosistema ha sido motivo en los últimos años de innumerables esfuerzos en busca de soluciones. En este sentido, una de las áreas que más crecimiento experimentó es el desarrollo de nuevos biosorbentes para ser utilizados como sorbentes en remediación ambiental para la remoción de metales y/o contaminantes orgánicos, tanto en aguas naturales como en efluentes industriales. Existen más de 100.000 tipos de colorantes que se utilizan comercialmente en industrias, implicando esto el uso de más de 700.000 toneladas al año de los mismos. Pequeñas cantidades (1ppm) en agua de algunos colorantes ya modifican el color de la misma y la hacen no consumible. Muchos de ellos resultan poseer estructuras químicas estables térmicamente y resistentes a la biodigestión aeróbica. En particular, los azo colorantes son los colorantes más utilizados por la industria en la actualidad. Su estructura química particular los convierte en ideales para mantener el color de telas, alimentos, medicamentos, etc., inalterados por mucho tiempo. Se los conoce como colorantes recalcitrantes, es decir que permanecen en el ecosistema mucho más tiempo que colorantes con otra estructura. Es muy difícil que sean degradados por la luz o por los procesos estándares de las plantas de tratamientos de efluentes. Las aguas coloreadas llevan a un cambio total de la flora y la fauna, llegando en casos a la eutroficación. La remoción de azo colorantes de los cursos de agua es de primordial atención. El presente plan de tesis se dirige hacia promover el avance y la aplicación de la investigación científica relacionada con el manejo de contaminantes del medio ambiente, como también la formación de recursos humanos en el área de química ambiental y consolidar la inserción de esta temática de alta incumbencia social para el bienestar humano y ecológico. Los resultados obtenidos en el primer capítulo están referidos a la inmovilización de biomoléculas en nanopartículas magnéticas de silicio obtenidas mediante microemulsión inversa por la técnica sol gel. Ellos nos muestran que el material obtenido es monodisperso, con nanopartículas core/shell donde el interior posee el ferrofluido magnético y el exterior puede ser modificado sin perder las propiedades magnéticas. La enzima (ureasas como modelo) inmovilizada en la superficie de las nanoesferas mantiene su actividad en un largo período de tiempo. Por otro lado, el costo de las enzimas necesarias para decolorar azo colorantes y la necesidad de formar una cadena de reacción para que la decoloración vaya acompañada de una detoxificación mostraron ser económicamente inviables. El segundo capítulo trata de la inmovilización de microorganismos (Pseudomonas sp.) capaces de decolorar azo colorantes (negro de Remazol, naranja de metilo y naranja de bencilo) en una matriz de sílica obtenida por la técnica sol-gel. Los resultados obtenidos muestran que las células son capaces de mantener la viabilidad dentro del material polimérico, que el gel no impide la entrada de nutrientes ni la salida de enzimas y productos de desecho y que las bacterias mantienen la viabilidad por largos períodos de tiempo. Puede observarse también que la capacidad de decolorar los colorantes azoicos ensayados se acompaña también de la detoxificación de los mismos, dado que el ensayo realizado con semillas de lechuga mostró mejoras en la germinación de dichas semillas luego del tratamiento con el residuo decolorado. El tercer capítulo trata de la utilización de un biopolímero abundante, biodegradable y de muy bajo costo para la adsorción de azo colorantes reactivos (Remazol black) en solución acuosa. En el capítulo se muestra la excelente capacidad de adsorción del hidrogel de colágeno tipo I para este tipo de colorantes, el estudio de las interacciones entre sorbente y sorbato y la comparación entre diferentes azo colorantes con otras estructuras químicas (rojo Congo y marrón de Bismarck). Asimismo se muestra el efecto del agregado de nanopartículas de silicio obtenidas por la técnica sol-gel en las propiedades mecánicas del hidrogel de colágeno y como repercute este agregado en la adsorción de azo colorantes reactivos. En definitiva, el presente trabajo de tesis permitió, por un lado, abordar aspectos básicos relacionados con la técnica sol-gel y describir una nueva forma de obtener nanopartículas magnética huecas, por otro lado trabajar sobre la inmovilización de biomoléculas en superficie e inmovilización de microorganismos por atrapamiento y finalmente describir el uso de un biopolímero de muy bajo costo y muy abundante para abordar el tema de remediación de los azo colorantes en los cursos de agua. Cada capítulo incluye el análisis de costo de fabricación de cada material para realizar la comparación final entre ellos desde el punto de vista económico.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 170 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Gándola, Yamila Belén
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2015-03-17

Descripción: El objetivo general de esta Tesis fue estudiar el comportamiento de sistemas nanométricos basados en lecitina, para ser utilizados como vectores de oligonucleótidos en el tratamiento del cáncer de mama. Los sistemas propuestos fueron Nanopartículas de Fosfatidilcolina (NPCs) y Nanopartículas Mixtas de fosfatidilcolina y colato de sodio (NMs). Se estudiaron sus características fisicoquímicas, y se demostró su capacidad de carga de siRNA. Las NPCs no resultaron citotóxicas, y lograron promover la internalización celular de oligonucleótidos, pero no mediaron el silenciamiento post-transcripcional de un gen blanco (PTGS) eficientemente. Las NMs también fueron capaces de vehiculizar oligonucleótidos al interior celular e incluso evidenciaron mediar PTGS, pero presentaron citotoxicidad dependiente de su concentración. Los resultados mostraron características promisorias, por lo que estos sistemas podrían optimizarse y proponerse como base tecnológica para su uso en terapia génica. Por otro lado, se estudiaron los efectos biológicos de los sistemas nanopartículados. Se evidenciaron distintos efectos sobre la activación de vías de señalización intracelular y viabilidad celular dependiendo de la composición y características fisicoquímicas de la nanopartículas. Esta novedosa caracterización en cuanto a su actividad biológica, demostró la importancia de evaluar sus acciones sobre sistemas vivos, aún cuando el material de origen sea considerado inerte y/o biocompatible.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 163 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Ferella, Alejandra
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2017-06-14

Descripción: El virus respiratorio sincicial bovino (BRSV) es la principal causa de infección del tracto respiratorio bajo causando bronquiolitis y neumonía en terneros de temprana edad. Este virus afecta también a otras especies animales. Teniendo en cuenta el impacto sanitario y económico que genera esta enfermedad a nivel productivo en bovinos y dado que Argentina es uno de los principales países productores de carne y leche, es importante disponer de estudios epidemiológicos actualizados del BRSV en animales susceptibles, con el objetivo final de diseñar estrategias de prevención y control de la enfermedad. Los resultados obtenidos en este trabajo evidenciaron una elevada seroprevalencia con porcentajes mayores al 70 % en todos los sistemas productivos evaluados. Asimismo, se estudió la circulación del BRSV en bovinos de tambo y establecimientos de engorde a corral, mediante seroconversión. Los resultados mostraron que la infección por BRSV está ampliamente distribuida en la población bovina, sugiriendo que, probablemente, el papel del BRSV en la presentación de la enfermedad respiratoria en nuestro país, particularmente en la región estudiada, haya sido subestimado. A su vez, fue posible detectar la presencia de genoma viral en hisopados nasales de animales de engordes a corral que presentaron seroconversión para este agente viral y en pulmones de animales con lesiones compatibles con enfermedade respiratoria, reforzando la evidencia de circulación de este agente viral. Por otra parte, se detectó la presencia de AN contra BRSV en búfalos, camélidos, caprinos y ovinos de Argentina, evidenciando la circulación del virus en esas especies y abriendo el interrogante de su importancia como reservorios del BRSV. El control de la infección por el BRSV puede lograrse, por un lado, mejorando las medidas de bioseguridad y, por el otro, mediante la vacunación. Si bien existen numerosas vacunas disponibles en el mercado destinadas a la prevención de la infección por BRSV, aun, no se ha logrado controlar su circulación en animales de producción. En este sentido, el diseño de vacunas más eficientes es una de las necesidades que presenta el sector productivo. En este trabajo de tesis se obtuvo un candidato vacunal basado en el virus Vaccinia Ankara modificado (MVA) que porta en la secuencia codificante del gen de la proteína F de BRSV (MVA-F). Esta proteína está altamente conservada entre las distintas cepas de BRSV y es la principal inductora de anticuerpos neutralizantes. La capacidad inmunogénica de MVA-F se confirmó en el modelo murino, empleando esquemas de vacunación prime-boost homólogos o heterólogos. Los resultados mostraron que tanto la vacunación homóloga (dos dosis de MVA-F) como la heteróloga (combinando el prime con MVA-F y el boost con una vacuna a subunidad que contiene la proteína F) indujeron tanto la producción de anticuerpos neutralizantes de BRSV como secreción específica de IFN-?, evidenciando una respuesta balanceada Th1-Th2. Los aportes de este trabajo de tesis permitieron actualizar los estudios epidemiológicos de BRSV en Argentina y evidenciar circulación viral. En base a estos resultados proponemos mejoras estratégicas en los cronogramas de vacunación actualmente utilizados contra BRSV, teniendo en cuenta los puntos críticos de infección dentro de los establecimientos y los momentos específicos de manejo según cada sistema productivo. Además, se obtuvo un nuevo inmunógeno recombinante capaz de inducir una respuesta inmunitaria (humoral y celular) específica contra BRSV en ratones, cuya eficacia deberá ser evaluada en el hospedador natural
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 169 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Bitrian, Mariana
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2013-07-05

Descripción: El género Acinetobacter está integrado por bacterias Gram-negativas no fermentativas de la clase Gammaproteobacteria y comprende tanto bacterias ambientales como patógenas oportunistas. El complejo A. calcoaceticus - A. baumannii (Acb) ha adquirido gran importancia debido a su persistencia en infecciones intrahospitalarias y su perfil de multirresistencia a los agentes antimicrobianos convencionales. Con la finalidad de proveer nuevas herramientas que puedan emplearse en el tratamiento de la infección, se propone el estudio de marcadores fenotípicos, genes de densidad poblacional (QS), y de dominios fotorreceptores con el objeto de evaluar su relación con la respuesta de virulencia en Acinetobacter. Nueve cepas clinicamente relevantes del género Acinetobacter fueron analizadas en cuanto a marcadores fenotípicos relacionados con virulencia. Si bien, ninguna de ellas mostró secreción de proteasas, ni síntesis de acil homoserino lactonas (AHL) de cadena corta, otros marcadores como la secreción de lipasa, la formación de biofilm, la motilidad celular, la resistencia antibiótica y la actividad hemolítica mostraron gran variabilidad. Por otra parte, la producción de sideróforos de tipo catecol fue significativamente mayor en las cepas aisladas de pacientes, por lo que podría ser considerado un marcador de virulencia en Acinetobacter. Todos los miembros del complejo Acb produjeron AHL de cadena mediana o larga y presentaron inhibición de la motilidad tipo twitching por luz azul. El análisis filogenético de las familias LuxI y LuxR demostró que las proteínas del sistema de QS poseen un origen ancestral dentro de la clase Gammaproteobacteria y se reforzó la hipótesis de la adquisición de genes reguladores de QS por transferencia horizontal. Muchos organismos han desarrollado fotorreceptores capaces de absorber la luz a través de sus cromóforos. Las proteínas BLUF mostraron una distribución predominante en la clase Gammaproteobacteria y bacterias quimitróficas, siendo la arquitectura BLUF corta la más frecuente. Mientras A. baumannii posee una única secuencia codificante para proteína BLUF, A. baylyi ADP1 presenta cuatro secuencias putativas para proteínas BLUF, reflejando la importancia de su conservación. La formación de biofilm en A. baylyi ADP1, a diferencia a lo descripto para A. baumannii, no mostró regulación por luz ni temperatura. Además, en A. baylyi la luz inhibió la producción de sideróforos de tipo catecol, la frecuencia de transformación y la motilidad tipo twitching. El análisis de la participación de las cuatro proteínas BLUF en la inhibición de la motilidad en A. baylyi ADP1 se realizó por noqueo de sus genes codificantes y posterior complementación, revelando que las proteínas codificadas por los genes ACIAD1499, ACIAD2125 y ACIAD2129 son activas y necesarias para la regulación de la motilidad tipo twitching y pueden complementarse unas a otras en su función, mientras que ACIAD2110 no participa en la regulación de este fenotipo. Esta conclusión fue también confirmada por el análisis de mutantes noqueadas en multiples genes (ACIAD1499, ACIAD2125 y ACIAD2129). Los cuatro genes se expresaron tanto en luz como en oscuridad. Sin embargo, los niveles de expresión de ACIAD1499, ACIAD2125 y ACIAD2129 fueron menores bajo la incidencia de luz azul, lo que explica la necesidad de que los tres genes sean expresados para alcanzar la cantidad de fotorreceptor requerida para provocar la inhibición de la motilidad. Este trabajo de tesis mostró la variabilidad que presentan los miembros del género Acinetobacter en cuanto a los marcadores fenotípicos relacionados con virulencia, el sistema de QS y las proteínas BLUF, reflejando la gran dificultad para controlar las infecciones generadas por este patógeno oportunista. La regulación de la motilidad tipo twitching mediada por proteínas BLUF en A. baylyi ADP1 revela una redundancia genética poco común en bacterias y constituye el primer ejemplo de acción conjunta de tres fotorreceptores en un organismo procariota.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 171 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Tittarelli, Estefanía
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2017-07-06

Descripción: El dengue es un problema para la salud pública, siendo la enfermedad más importante transmitida por artrópodos. El virus del dengue (DENV) se clasifica en cuatro serotipos (DENV 1-4) que presentan variantes genotípicas. La transmisión del virus se produce principalmente por mosquitos de la especie Aedes aegypti. Hacia 1970, se había logrado la completa eliminación del vector en la mayoría del continente americano gracias a campañas implementadas por la OPS. Sin embargo, el deterioro de las mismas a lo largo del tiempo permitió la progresiva recolonización del mosquito y posterior reemergencia del dengue. Como consecuencia, en las últimas décadas se ha observado un aumento significativo en la incidencia del virus en el continente. En Argentina el dengue alcanzó nuevamente el territorio en los noventa, siendo las provincias del norte las más afectadas. En la ciudad de Buenos Aires y el Área Metropolitana (AMBA), la presencia del vector se registra desde 1995. Desde 1999, se han registrado casos de DENV de distintos serotipos sin evidencia de circulación local sostenida. En 2009 ocurrió un brote de DENV-1 de gran importancia en el país, donde se detectó transmisión local por primera vez en AMBA. Sin embargo, la magnitud del mismo fue superada recientemente en el 2016, donde también se registró transmisión local. El abrupto crecimiento que han tenido los casos de DENV en los últimos años en nuestro país, y en especial la ocurrencia de casos autóctonos detectados en AMBA, una región donde se creía poco probable la circulación local del DENV, evidencia la importancia que tiene la vigilancia del virus para la salud pública. El objetivo del presente trabajo fue ampliar el conocimiento sobre la epidemiología molecular del DENV que circuló en AMBA en el período 1999-2016; para poder inferir su historia y dinámica de dispersión, así como también determinar si existieran características únicas asociadas a su adaptación local. Hemos obtenido la secuencia del genoma completo de 46 DENV-1, -2 y -3 y de la secuencia que codifica para la proteína E de 82 DENV-1 detectados en AMBA durante los años estudiados. Hemos genotipificado las secuencias obtenidas y los estudios filogeográficos realizados nos permitieron estudiar la dispersión global y local de estos virus con el fin de inferir la introducción de los genotipos evaluados en América. El genotipo V de DENV-1 habría sido el primero en ingresar en 1966 por Puerto Rico. Luego, en 1980 habría ingresado al continente el genotipo Asiático/Americano de DENV-2 por las Islas Vírgenes Británicas. Finalmente, el genotipo III de DENV-3 habría ingresado en 1990 por Puerto Rico o Nicaragua. Esta tesis también aporta datos sobre las características de crecimiento de los aislamientos obtenidos durante el brote de DENV-1 del 2009, dado que fue la primera vez que se detectó circulación local en AMBA. A su vez, se compararon las cargas virales presentadas en infecciones primarias y secundarias, y se demostró la posible existencia de infecciones secundarias por DENV en un área no endémica. Respecto del brote del 2016 en AMBA, se encontraron dos linajes genéticos sin diferencias entre cepas locales e importadas. Se podría proponer que AMBA estaría sufriendo una transición de ser un área donde ocurrían brotes esporádicos a ser un escenario endémico propicio para el DENV. Se debería considerar también que otros arbovirus transmitidos por el mismo vector podrían emerger en AMBA. Como conclusión, esta tesis abarca aspectos epidemiológicos y evolutivos del DENV que contribuyen a un mejor conocimiento de la dinámica local del mismo. Estos datos podrían aportar información al sistema de salud para la planificación de medidas adecuadas de prevención y control, para evitar futuros brotes ocasionados por estos arbovirus.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 201 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Juanes, Matías Hernán
2016-02-23

Temas:   Ciencia de la vida   -  GH-1   -  Genes   -  Mutaciones   -  Variantes   -  Crecimiento

Descripción: El crecimiento somático normal requiere de la integración de múltiples factores que actúan a nivel periférico, como factores metabólicos y hormonales, y a nivel central, como factores de trascripción involucrados en el eje hipotálamo-hipofisario-IGF-1. Se han descripto numerosos genes implicados en las alteraciones de dicho eje y todavía no se sabe la real prevalencia de estas alteraciones en los pacientes con déficit de talla. El fenotípico de déficit o falta de acción de hormona de crecimiento incluye un grupo de diferentes patologías que clasificamos en cuatro grupos: 1) Deficiencia aislada de GH, por alteración del gen GH1 o GHRHR, 2) Insensibilidad a la GH-1, por alteración de los genes GHR y STAT5b, 3) Resistencia a IGF-1, por alteración del gen IGF1R y 4) Deficiencia múltiple de hormonas hipofisarias por alteraciones en distintos genes que codifican para factores de transcripción que participan en la embriogénesis y diferenciación hipofisaria (PROP1, POU1F1, LHX3, LHX4, HESX1, OTX2, GLI2). Dado que la caracterización molecular de los genes relacionados con el eje Hipotálamo-Hipófiso-IGF-1 tiene implicancias diagnósticas que impactan directamente en la estrategia terapéutica y el consejo genético, el objetivo general de la presente tesis doctoral es la identificación molecular de pacientes pediátricos con alteración de dicho eje.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: unknown  (tamaño kb)  Pag. 104 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Mathó Pacielo, Cecilia
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2016-07-07

Descripción: La enfermedad de von Hippel-Lindau (VHL) es un desorden hereditario, autosómico dominante, causado por mutaciones en el gen supresor tumoral VHL. La proteína VHL (pVHL) forma un complejo (VBC) con las Elonguinas B y C, Culina 2 y Rbx1. La función más descripta de pVHL es la de regular los niveles de las subunidades ? de HIF. La presente tesis consistió de la implementación de un método de detección de deleciones en este gen, para ofrecer un estudio genético completo, y la caracterización funcional de dos nuevas variantes génicas. Nuestros resultados destacan la importancia de realizar el estudio genético completo del gen de la enfermedad de VHL para la confirmación de enfermedad de VHL, no sólo en pacientes con diagnóstico clínico de la misma, sino también en pacientes que presentan una única manifestación típica de la enfermedad, permitiendo su diagnóstico y seguimiento apropiados. Mediante los estudios in vitro, in vivo e in silico hemos demostrado la patogenicidad de las variantes P138R y L163R que involucra mecanismos dependientes e independientes de HIF. Asimismo, estos resultados aportan la base para futuros estudios considerando el impacto de las alteraciones estructurales en las modificaciones post-traduccionales que determinan el destino y función de pVHL.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 199 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Bonneau, Graciela Alicia
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2015-11-05

Descripción: La enfermedad cardiovascular (ECV) representa la primera causa de muerte en occidente; la obesidad, especialmente abdominal (OA) y el estado inflamatorio se asocian con la presencia de ECV e insulino-resistencia (IR). La adiponectina, considerada un sensibilizador de insulina tiene efectos anti-aterogénicas y anti-inflamatorios. Se estudió la relación entre la presencia de IR y factores de riesgo asociados, con la morbi-mortalidad por ECV mediante un estudio de cohorte prospectivo. Se estudiaron 315 individuos (247 mujeres (47,6 ± 9,1 años) y 68 varones (47,1 ± 9,2 años)) durante 5 años. Se incluyó un subgrupo de 70 individuos para el estudio de gen y receptores de adiponectina por biología molecular. Se encontró un predominio de sobrepeso (38,7%) y obesidad (27,3%) asociado a un perfil lipídico aterogénico. El 24,1% de los individuos tenía Síndrome Metabólico (SM) siendo col-HDL disminuido el parámetro más frecuente; según HOMA El 18% era IR. La obesidad aumento del 2007 al 2011 en un 8,1%. A lo largo de los 5 años, 58 individuos desarrollaron IR y 9 diabetes (DBT2). De las variables analizadas, OA predijo IR y obesidad DBT2. El 45,7% de los individuos, tenían adiponectina disminuida. Solo en mujeres la concentración sérica de adiponectina explicó la IR de forma independiente. En el análisis de las secuencias de genes ADIPOQ se encontró un SNP no descripto en la base de datos de SNPs (dbSNP) en la posición -11348 G>T de la región promotora en una frecuencia de 38% que se asoció con valores disminuidos de adiponectina circulante. El genotipo GG del SNP rs1029629 del ADIPOR2 presentó asociación significativa con IR y con disminución de adiponectina circulante.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 119 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Dupraz, Hernán Carlos
2015-10-09

Temas:   Ciencia de la vida   -  Obesidad   -  Deficiencia calcio   -  Escolares   -  Salud ósea   -  Calcio

Descripción: La transición nutricional está caracterizada por la obesidad epidémica y deficiencia de micronutrientes como Ca. Ambos estarían inversamente relacionados, especialmente durante el crecimiento. Objetivos: Diagnosticar prevalencia de exceso de peso e insuficiencia cálcica, mediante IMC y relación Ca/crea (orina basal), en escolares sanos de 5 a 10 años. Analizar las interacciones entre ellos y sus efectos sobre la salud ósea. Materiales y métodos: Se estudiaron 695 escolares municipales de Vicente López. Puntos de corte del IMC: percentilo 85 para sobrepeso (SP) y 95 para obesidad (Ob). Ingesta calcica deficiente para Ca/Crea <0,07; adecuada 0,07?0,15; elevada >0,15. Se evaluó alfa-alfa CTX (?CTX) y beta-beta CTX (? CTX) y QUI. Resultados: Existió alta prevalencia de exceso de peso y deficiencia de Ca (24,9 % y 54%, respectivamente) sin diferencias por sexo. El IMC elevado y deficiencia de Ca no se asociaron. El ?CTX descendió con la edad, sin diferencias por sexo. El QUI no mostró diferencias por sexo ni edad. El análisis factorial asoció inversamente QUI con ?CTX y ?CT e IMC y directamente con Ca/crea Conclusiones: Es imprescindible fomentar hábitos alimentarios, para prevenir el sobrepeso y deficiencia de Ca que afectan los huesos, beneficiando la Salud Pública nacional.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: unknown  (tamaño kb)  Pag. 126 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Lotufo, Cecilia Maricel
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2017-03-10

Temas:   Ciencia de la vida   -  3A   -  Virus de la fiebre aftosa   -  Replicón   -  Elisa

Descripción: La Fiebre Aftosa es una enfermedad vesicular aguda de rápida propagación y amplio rango de huéspedes. El agente etiológico es el virus de la fiebre aftosa (VFA), un virus no envuelto con genoma ARN de simple cadena y polaridad positiva, perteneciente a la familia Picornaviridae. El genoma del VFA codifica para una poliproteína que es escindida por proteasas virales para generar 4 proteínas capsidales y 8 no capsidales (PNC). Se ha reportado que la proteína NC 3A juega un papel relevante en la síntesis del ARN, en el anclaje a membranas intracelulares del complejo replicativo, así como en la virulencia y rango de huésped del VFA. El propósito de este trabajo fue estudiar el rol de la región N-terminal y la propuesta como transmembrana de la proteína NC 3A en la replicación del ARN y en su ubicación intracelular. La metodología utilizada fue la evaluación de mutantes puntuales y de deleción realizadas sobre un replicón del VFA (pRep), basado en la cepa O1/Campos, transcripto desde el promotor de la polimerasa del fago T7 (T7pol). Este replicón codifica la región completa de proteínas NC, y los extremos no traducibles, pero las proteínas capsidales fueron reemplazadas por el gen reportero de la Luciferasa de Luciérnaga. Se realizaron deleciones sobre pRep en la región N-terminal de 3A (pRep?6-11, pRep?6-17 y pRep?6-23) y posteriormente mutaciones puntuales (pQ18A/H19A/E20A y pE20A). Por otra parte, se mutó la zona predicha como transmembrana (aa 57-76), reemplazándola por una secuencia de 8 alaninas (pRep?TM). La evaluación de replicación/transcripción se realizó por medición de luminiscencia, luego de transfección de células BHK-21 con los plásmidos mutantes o controles, junto con los plásmidos que expresan T7pol y Luciferasa Renilla, este último para normalizar la medición. Las mutantes pRep?6-23, pQ18A/H19A/E20A, pE20A y pRep?TM presentaron una marcada disminución de actividad Luciferasa con respecto a pRep con 3A wt. La ubicación intracelular se evaluó mediante Inmunofluorescencia Indirecta, por microscopia de fluorescencia y confocal, utilizando el anticuerpo monoclonal 3H7 y un anticuerpo comercial contra la etiqueta Flag. Se construyeron plásmidos de expresión de 3Awt (p3AF) y de las mutantes analizadas anteriormente, unidas a la etiqueta Flag (p?6-11F, p?6-17F, p?6-23F y p?TMF). Con la mutante p?TMF, se demostró que la secuencia comprendida entre los aa 56 y 76 de la proteína 3A del VFA, estaría involucrada en la asociación a membranas citoplasmáticas, ya que luego de su deleción la proteína se localiza en el núcleo celular. Se concluye que la región comprendida entre los aa 18 a 23 de la proteína 3A, en especial el ácido glutámico en la posición 20, serian críticos para la replicación viral, mientras que los aa 56 a 76 están involucrados en la ubicación subcelular de la misma. Complementariamente, se mapeó el anticuerpo monoclonal 3H7 y se encontró que su epitope se ubica en la zona N-terminal de 3A y se desarrolló un ensayo de ELISA indirecto utilizando la proteína 3A unida a un péptido carrier (3AGFP-ELISA) para screening de circulación viral en bovinos. El 3AGFP-ELISA resulto rápido y específico, en la distinción de sueros de animales vacunados, de sueros de animales infectados o convalecientes. Se evaluó su performance en comparación con el ensayo 3ABC-ELISA actualmente en uso, (desarrollado también por nuestro Instituto), mediante el análisisde un grupo de 5 sueros positivos de referencia fuertes y débiles (cercanos al valor de corte del ensayo) y posteriormente el análisis de 363 sueros de animales vacunados/no infectados. Los resultados obtenidos con ambos ELISAs 3AGFP y 3ABC mostraron una muy buena correlación, por lo que 3AGFP-ELISA, se podría proponer como una técnica simple y rápida, para el screening inicial de sueros de campo.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 158 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Ferrero, Maximiliano Rubén
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2014-12-19

Descripción: Trypanosoma cruzi, agente causal de la enfermedad de Chagas, es un protozoario hemoflagelado que posee una cisteína proteinasa mayoritaria denominada cruzipaina (Cz). Esta enzima además de un dominio catalítico, presenta un dominio C-terminal (C-T) de relevancia inmunológica. Nuestro grupo ha descripto previamente en este dominio, una O-glicosilación constituida por N-acetil glucosamina y una N-glicosilación compuesta por oligosacáridos de alta manosa, y un grupo sulfato constituyendo el primer reporte de glicoproteínas sulfatadas en Trypanosomátidos. Además, encontramos que los sulfatos presentes en la Cz presentan una marcada antigenicidad en pacientes con enfermedad de Chagas y también en modelos de infección murino donde además estarían directamente relacionados con el daño del tejido cardíaco. A pesar de la relevancia que muestran los motivos sulfatados del parásito nada se sabe del mecanismo de sulfatación ni acerca de su rol en el metabolismo del mismo. La sulfatación, modificación crítica en muchas instancias de reconocimiento biológico, es catalizada por enzimas denominadas sulfotransferasas las cuales dependen para llevar a cabo su función de una molécula denominada PAPS (3'- fosfoadenosina-5' fosfosulfato). En este trabajo, estudiamos el efecto del clorato de sodio, un reconocido inhibidor de la síntesis de PAPS. En epimastigotes tratados con dicho inhibidor, observamos tanto una disminución de la sulfatación de la Cz por western blot como un desplazamiento hacia puntos isoeléctricos más altos en electroforesis bi-dimensional. Además vimos un marcado descenso de sulfoglicoesfingolípidos en cromatografía de placa delgada, confirmado mediante el análisis por espectrometría de masa (UV-MALDI-TOF). Estos parásitos mostraron anormalidades estructurales en imágenes de microscopía electrónica, y cuando se utilizó el tratamiento sobre trypomastigotes, obtuvimos una disminución marcada en la capacidad infectiva de los mismos. Mediante ensayos de citometría de flujo vimos una fuerte presencia de los epitopes sulfatados de la Cz expuestos en la superficie de trypomastigotes y en ensayos de infección posteriores pudimos demostrar la participación de estos epitopes presentes en el dominio C-T de la Cz en dicho proceso. Las siglecs (sialic acid recognizing Ig-superfamily lectins), son un grupo de lectinas de reconocimiento a ácido siálico, expresadas en células del sistema inmune e involucradas en la regulación negativa de la activación de las mismas. Se ha demostrado que la señalización por vía de las Siglecs muchas veces depende del contexto glicosídico en el cual se encuentre el ácido siálico y que T. cruzi es reconocido por estas lectinas. Nuestros resultados con Siglec-E de ratón, ortóloga de la Siglec-9 humana, mostraron que los ligandos de esta lectina en el parásito están específicamente expuestos en proteínas de membrana. Además, existe un reconocimiento de esta lectina a Cz tanto lisosomal de epimastigotes como de Cz liberada al medio por trypomastigotes metacíclicos. La participación de los sulfatos de la Cz promoviendo esta interacción fue demostrada en ensayos de ELISA directo en los cuales Cz y C-T tuvieron un reconocimiento significativamente mayor al de Czd y C-Td. Estos resultados fueron confirmados en ensayos de ELISA de competencia entre Cz y Czd. Por último mediante tratamientos con clorato de sodio, demostramos que la presencia de sulfatos en la superficie del parásito incrementa el reconocimiento de Siglec-E por los mismos utilizando citometría de flujo. En conjunto nuestros resultados sugieren que las glicoproteínas silalidadas del parásito, que contienen grupos sulfatos como la Cz, interaccionan con Siglec-E modulando la respuesta inmune del hospedador, favoreciendo la parasitemia y la persistencia del parásito. Finalmente considerando los antecedentes detallados sobre la relevancia de la sulfatación tanto en el metabolismo del parásito como en el desarrollo de la enfermedad de Chagas; sumado a la ausencia de secuencias genómicas que podamos identificar como posibles sulfotransferasas del parásito, sostenemos firmemente que esta vía es un blanco potencial terapéutico de relevancia.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 182 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Zilberman, Judith Miriam
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2016-11-03

Descripción: Estudio traslacional de los mecanismos fisiopatológicos de la hipertensión y ECV en la menopausia (MNP) desde los aspectos experimentales y su correlación con la clínica. Objetivo: estudiar los efectos del enalapril sobre: eje hormonal, PA, función endotelial en MNP normotensas (NT) e HTA y, en modelos experimentales de MNP e HTA: receptores hormonales, estrés oxidativo, sistema del NO, remodelamiento cardíaco y renal, fibrosis tisular y vascular. Un estudio (1034 mujeres), mostró asociación entre HTA, dislipemia, hiperglucemia y obesidad. En 29 mujeres MNP (NT e HTA) el enalapril, en un año, elevó el estradiol disminuyendo los síntomas climatéricos. La evaluación de la función endotelial en 498 mujeres mostró que la HTA y la MNP aumentan precozmente el índice de rigidez vascular. En ratas SHR MNP el enalapril disminuyó el peso cardíaco, del VI y el diámetro de los miocitos. En riñón, VI y aorta se incrementó actividad de la NOS, mejoró la peroxidación y fibrosis con aumento de la expresión de receptores de estrógeno a (alfa) en médula y los ß (beta) en corteza y corazón. En ratas normotensas el efecto fue más atenuado. Esta serie de estudios básicos y clínicos confirman que las investigaciones traslacionales pueden aportar beneficios en el cuidado de la salud humana.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: unknown  (tamaño kb)  Pag. 234 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Jarne, Antonio Rubén
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2016-03-11

Descripción: La introducción de la variable "proceso" como objeto de estudio en bioseguridad permitió un análisis cuantitativo del biorriesgo a nivel de procedimientos y operadores biomédicos. Se construyó un primer mapa de riesgo calculando el Riesgo Relativo (RR) a accidentes biológicos en una institución biomédica con 471 trabajadores; de un total de 82 accidentes/año, 41 correspondieron a accidentes biológicos (50%). Del total de operadores, 435 pudieron ser clasificados correctamente (92% especificidad) en tres categorías de riesgo con diferencias significativas (p<0,05): elevado (RR>2.5), moderado (RR aprox. 1) y bajo (RR< 0,50). Para el segundo mapa se utilizó una matriz multidimensional de análisis del riesgo biológico por exposición desarrollado en esta tesis (BioRIM optimizado). La distribución de frecuencias de 114 procesos analizados presentó tres máximos con diferencias significativas (p<0,05), correspondientes a tres categorías de riesgo: elevado (>50 UBRs/día), moderado (3 a 50 UBRs/día) y bajo (< 3 UBRs/día) con un 96% especificidad. La comparación entre métodos presento una correlación moderada (R²: 0,2302), sin embargo ambos clasificaron en las misma tres categorías al 74,1% de los operadores. Los mapas obtenidos son complementarios; el BioRIM optimizado analiza el riesgo previo al daño y los registros de accidentes evalúan la eficiencia de la bioseguridad implementada.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 249 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Palacio, María Inés
2016-03-08

Descripción: El objetivo del presente trabajo fue diseñar un alimento funcional panificado que incluya un ingrediente, obtenido de materias primas no convencionales, que aporte componentes del tipo ?-galactósidos cuyas propiedades prebióticas fueron confirmadas mediante ensayos in vitro e in vivo con modelo animal. En este contexto, se obtuvieron materias primas a partir de semillas de lupino, zapallo y trigo sarraceno. En primera instancia se evaluó y optimizó el proceso de extracción de los azúcares presentes en las mismas. Posteriormente, se evaluó la capacidad prebiótica de los materiales obtenidos frente al microorganismo L. paracasei y microorganismos entéricos, para luego continuar su estudio utilizando un modelo de ratas Wistar en crecimiento. Finalmente, se seleccionó la harina de semillas de zapallo debido a su alto valor nutricional, al auge del consumo de semillas y disponibilidad de las mismas en nuestro país, para la formulación de un producto panificado apto para celíacos. Se realizaron análisis de composición centesimal y se evaluaron características tanto físicas como sensoriales, evaluadas por consumidores celíacos. El producto panificado resultó contener compuestos con propiedades prebióticas y un perfil nutricional de alto valor, enriquecido en proteínas, grasas de origen vegetal y fibra dietaria total, con respecto al producto elaborado con premezcla para celíacos.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: unknown  (tamaño kb)  Pag. 176 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Vilte, Daniel Alejandro
2015-11-18

Descripción: Escherichia coli enterohemorrágico (EHEC) es el patógeno que responsable del síndrome urémico hemolítico (SUH. Argentina tiene la mayor incidencia mundial de SUH en niños menores de 5 años. El serotipo O157:H7 es el más frecuente en pacientes con SUH. El ganado bovino es el reservorio primario de EHEC O157:H7, y la principal fuente de infección para humanos. La vacunación del ganado bovino constituye una estrategia de intervención prefaena para reducir la excreción de EHEC O157:H7. En este trabajo se evaluaron dos vacunas: la primera compuesta por 2 factores de colonización, las proteínas Intimina y EspB, producidas de modo recombinante; la segunda consistente en envolturas bacterianas de EHEC O157:H7. Se desarrolló un modelo de inoculación experimental de EHEC, luego se llevó a cabo un ensayo de vacunación con desafío posterior para cada vacuna. Nuestros resultados indican que la inmunización sistémica con dos dosis de la vacuna con Intimina y EspB recombinantes podría reducir la colonización y la excreción de EHEC O157:H7 en terneros. También se redujeron el tiempo de colonización y la magnitud de la excreción por la inmunización subcutánea con envolturas bacterianas de O157:H7. Se necesitarían ensayos adicionales para evaluar la eficacia de las vacunas en terneros en condiciones naturales.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 143 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Rojas, Florencia Dinorah
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2016-04-28

Temas:   Ciencia de la vida   -  Antifúngicos   -  Uso clínico   -  Malassezia spp.   -  In vitro

Descripción: Las levaduras del género Malassezia han sido reconocidas como miembros de la microbiota cutánea normal del hombre y otros animales. Se caracterizan por ser lipofílicas y la mayoría de ellas lipo-dependientes, razón por la cual requieren de una fuente externa de ácidos grasos para su crecimiento. Estas levaduras son agente etiológico de pitiriasis versicolor y foliculitis por Malassezia y puede participar como agente secundario o exacerbador de otras afecciones dérmicas. Además han sido asociadas a infecciones sistémicas en pacientes inmunosuprimidos. Los métodos disponibles para determinar la sensibilidad antifúngica in vitro de las levaduras son aplicables solo a especies de Candida y Cryptococcus neoformans. Debido a los requerimientos nutricionales y condiciones de cultivos especiales de Malassezia sp., su estudio de sensibilidad antifúngica es complejo. El objetivo de esta investigación fue determinar la sensibilidad antifúngica de aislados de Malassezia de origen clínico frente a antifúngicos de uso tópico y sistémico. Se estudiaron cepas de Malassezia depositadas en la colección de cultivos, aisladas de muestras clínicas de pacientes con afecciones dérmicas y sistémicas. La sensibilidad se determinó por las técnicas de microdilución en caldo y de difusión en agar. Para asegurar el crecimiento de estas levaduras, se modificó densidad del inóculo, temperatura y tiempo de incubación y se suplementó el medio base de cultivo. Se evaluaron fluconazol, ketoconazol, itraconazol, voriconazol, miconazol, anfotericina B y terbinafina. Para correlacionar ambos métodos, se aplicó análisis de regresión lineal y se determinó acuerdo categórico. Se procesaron un total de 120 aislados de Malassezia spp. Las modificaciones realizadas a la técnica permitieron el desarrollo de todas las especies estudiadas. Las CIM y los halos de inhibición pudieron ser leídos a las 72 h de incubación. En general, las levaduras fueron inhibidas a bajas concentraciones de ketoconazol, itraconazol y voriconazol. Las sensibilidades frente al fluconazol, el miconazol, la anfotericina B y la terbinafina resultaron ser más variables y se obtuvieron altas CIM, especialmente frente a M. furfur y M. globosa. Con respecto a la difusión, la mayor dispersión de los halos de inhibición se observó para fluconazol, voriconazol y miconazol. En cambio, frente al ketoconazol y el itraconazol se observó menor variabilidad de los resultados. El análisis de regresión lineal no pudo ser realizado para el itraconazol, el ketoconazol y la terbinafina porque no existió, en estos casos, relación lineal entre las variables CIM y halo de inhibición. La concordancia más elevada fue observada para el itraconazol y la más baja para la anfotericina B y el fluconazol. Las modificaciones realizadas a las metodologías de referencia permitieron el desarrollo de las especies de Malassezia y la obtención de valores de sensibilidad en iguales condiciones de densidad de inóculo, temperatura y tiempo de incubación. M. furfur, M. sympodialis y M. globosa mostraron perfiles de sensibilidad variables frente a los antifúngicos probados, M. furfur demostró ser la especie menos sensible y M. sympodialis la más sensible. Este comportamiento diferente observado entre las especies de mayor prevalencia, enfatiza la necesidad de realizar la identificación de especies. El ketoconazol, el itraconazol y el voriconazol fueron las drogas más efectivas, observándose poca variabilidad de la sensibilidad intra-especie. Sin embargo las sensibilidades fueron muy variables frente al fluconazol, miconazol, anfotericina B y terbinafina, y esto es importante considerando que estas son drogas de uso frecuente. El análisis de correlación lineal no es aplicable para comparar ambas metodologías, debido a que las variables CIM y halo de inhibición no se relacionan linealmente. Debido a estos resultados y a la poca concordancia obtenida, el método de difusión en agar no sería adecuado para determinar la sensibilidad antifúngica de levaduras de Malassezia.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 151 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Dos Santos, Patricia Carolina
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2016-03-29

Temas:   Ciencias de la salud   -  Telómeros   -  Complejo RNPH/ACABOX   -  LLC   -  IGHV   -  Citogenética   -  FISH

Descripción: La leucemia linfocítica crónica (LLC) es la leucemia más frecuente en adultos de occidente, caracterizada por una alta variabilidad clínica. Los telómeros son estructuras nucleoproteicas que protegen los extremos cromosómicos. En este estudio efectuamos el análisis de la longitud telomérica (LT), estatus mutacional de IGHV y cuantificación de la expresión de los genes reguladores de la LT: hTR, hTERT, NHP2, DKC1, NOP10 y GAR1, en 134 pacientes con LLC, y su correlación con factores pronóstico. Se observó acortamiento telomérico en pacientes respecto de controles (p=0,0001), en los casos con anomalías de alto riesgo y mayor número de alteraciones genéticas, asociados a corta sobrevida libre de tratamiento. Se detectaron diferencias en la distribución de genes IGHV respecto de otras regiones geográficas, y reducción de la LT en pacientes con IGHV no mutado (p=0,017). La expresión génica mostró desregulación global de los niveles de transcripto de todos los genes; GAR1, NHP2 y NOP10 presentaron correlación positiva (p<0,0001). Nuestro estudio sustenta hallazgos previos en la expresión de hTERT y brinda nueva información sobre los genes restantes siendo, a nuestro conocimiento, el primer análisis de los mismos en LLC, contribuyendo a su caracterización biológica y a la comprensión de los mecanismos patogénicos involucrados en su desarrollo.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: unknown  (tamaño kb)  Pag. 174 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Cabrera, Maia
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2016-03-22

Descripción: El proceso de optimización de un compuesto líder obtenido a partir de una estrategia fenotípica, requiere de la caracterización del mecanismo molecular de acción involucrado. A partir de un cribado fenotípico realizado previamente sobre un grupo de compuestos pertenecientes a la familia de las tiosemicarbazonas (TSCs), se identificó el compuesto tiosemicarbazona 4,4?-dimetoxibenzofenona como un compuesto líder en la línea celular U937. La caracterización del mecanismo de acción de T44Bf, realizado sobre un panel de líneas celulares de leucemia aguda humana (U937, HL60, KG1a y Jurkat) mostró que su efecto antiproliferativo está asociado a un arresto mitótico reversible inducido por la inhibición de la polimerización de los microtúbulos, lo que eventualmente conduce a la muerte por apoptosis. Esta última resultó ser selectiva por células leucémicas en contraposición a células hematopoyéticas diferenciadas. Asimismo, la actividad apoptótica estuvo asociada a la pérdida de potencial de membrana mitocondrial, fosforilación sostenida de las proteínas anti-apoptóticas Bcl-2 y Bcl-xL y un incremento de la proteína pro-apoptótica Bad. Por último, la fosforilación de la MAPK ERK 1/2 demostró ser un requisito para la inducción de apoptosis. Los resultados describen un mecanismo novedoso para una TSC, y permiten establecer las bases racionales para la utilización de un biométodo para el desarrollo a fututo de los ensayos de optimización de este compuesto líder.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 137 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Sevic, Ina
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2017-12-28

Temas:   Ciencia de la vida   -  Hepatitis B   -  Infección viral   -  Evolución   -  Virología

Descripción: El virus de hepatitis B (HBV), debido a su estructura poblacional de cuasiespecie, circula como un conjunto de subpoblaciones de variantes genéticamente relacionadas que evolucionan a lo largo de la infección crónica. Como resultado del proceso evolutivo, se fijan aquellas subpoblaciones virales que presenten el mayor fitness para cada situación particular durante la infección crónica. En este trabajo se presentó un nuevo método destinado a evaluar el fitness viral del HBV y se utilizó para la evaluación del fitnessreplicativodel HBV en dos escenarios evolutivos: proceso de seroconversión (intra hospedador) y ocupación del nicho ecológico (interhospedador). Este método facilita el análisis de las interacciones entre diferentes variantes virales en un proceso de cotransfección. En este trabajo se concluye que: El fitnessreplicativo está directamente relacionado con la capacidad replicativa de cada variante analizada. La cotransfección con sgtD1del y sgtD1mut constituye la primera evidencia dela interacción entre variantes virales en el transcurso de la replicación del HBV en un mismo sistema celular. El mayor fitness replicativo del sgtF1b comparado con sgtF4 como un aporte a la comprensión de la ocupación por el sgtF1b del nicho ecológico de nuevas infecciones en Argentina.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 91 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Marchini, Timoteo
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2015-03-30

Descripción: La exposición a partículas de contaminación ambiental (MP) se encuentra asociada a incrementos en la morbilidad y mortalidad cardiovascular. El estrés oxidativo y la respuesta inflamatoria han sido señalados como partícipes fundamentales en este contexto, aunque los mecanismos subyacentes no se conocen en detalle. El objetivo de este trabajo fue evaluar dicha hipótesis en modelos de exposición aguda in vivo e in vitro, utilizando MP derivado de la combustión del petróleo (ROFA). Se observó una alteración del metabolismo oxidativo y energético cardíaco, junto con una disminución de la reserva contráctil y diastólica. Estos cambios se acompañaron de incrementos en marcadores plasmáticos de estrés oxidativo e inflamación. La reacción inflamatoria producida por ROFA indujo la extravasación de leucocitos, por activación de células endoteliales y mieloides dependiente de TNF-?. Los monocitos circulantes parecerían desempeñar un rol central en los efectos observados, dado que su depleción previene la aparición de marcadores de inflamación local y sistémica. Asimismo, el bloqueo de TNF-? in vivo previno los efectos de ROFA a nivel cardíaco. Estos resultados indican que el estrés oxidativo y la respuesta inflamatoria se encuentran asociados a la exposición a MP, y podrían explicar los efectos adversos reportados sobre el sistema cardiovascular.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 188 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Cela, Eliana Maitén
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2016-12-05

Descripción: La piel es un órgano constituido por distintos tipos celulares, entre ellos muchos con funciones inmunológicas. Es, además, el órgano más expuesto a la radiación UV contenida en la luz solar; exposición que puede llevar a un estado de inmunosupresión. Sin embargo, también se conocen efectos benéficos de la exposición cutánea a RUV. El objetivo del presente trabajo de tesis fue estudiar comparativamente los efectos de la exposición cutánea a dosis altas de RUV (daUV) y dosis bajas y repetitivas de RUV (dbrUV) sobre la respuesta inmune innata y adaptativa. La exposición a daUV llevó a una marcada inflamación local, con disminución de la respuesta inmune adaptativa; mientras que la exposición a dbrUV promovió el efecto contrario, sin signos de inflamación local, con refuerzo de la barrera epitelial e inmunoestimulación sistémica. En contraste con estos resultados, al realizar un desafío infeccioso con Staphylococcus aureus en animales irradiados, se observó que la exposición a daUV no alteró la respuesta frente al patógeno, pero sí lo hizo la exposición a dbrUV, permitiendo una mayor diseminación de la infección. El presente trabajo demuestra que la exposición cutánea a RUV puede llevar a distintas modificaciones de la respuesta inmune, tanto nocivas como beneficiosas.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 167 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Pérez, Melisa Paula
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2017-03-07

Descripción: La necesidad de contar con herramientas seguras y efectivas para el manejo de plagas, alternativas o complementarias a los insecticidas químicos, estimula el interés en usar entomopatógenos como agentes de biocontrol. Bacillus thuringiensis es entre ellos, el patógeno más exitoso en cumplir este objetivo, y el que además mantiene potencial para seguir desarrollándose. En este estudio se trabajó en la selección y caracterización de cepas de B. thuringiensis tóxicas para larvas de dos especies de coleópteros plagas que son de gran importancia en el Sector Agropecuario: el picudo del algodonero (Anthonomus grandis) y el escarabajo de la cama de pollos (Alphitobius diaperinus). Asimismo, se trabajó en el mejoramiento de un medio de cultivo para obtener una mayor biomasa activa de una cepa nativa de B. thuringiensis con vistas a la elaboración de un bioinsecticida. En una primera etapa, se realizaron bioensayos preliminares con cultivos completos de 124 cepas de B. thuringiensis con larvas neonatas de A. grandis. Se seleccionaron tres cepas exóticas y cuatro nativas por causar porcentajes de mortalidad superiores al 50%. Todas ellas eran productoras de ?-exotoxina. Las cepas nativas compartieron una morfología similar de cristales parasporales, un perfil de proteínas similar y los mismos genes insecticidas. Sus características hacen que se parezcan a cepas tóxicas para Lepidópteros. Además mostraron un perfil de REP-PCR idéntico al de la cepa lepidoptericida HD-1, sugiriendo que podrían pertenecer al serovar kurstaki. Sin embargo, se observaron diferencias en el perfil plasmídico y en la producción de ?-exotoxina. Para determinar en qué fracción del cultivo se encontraban los metabolitos responsables de la toxicidad, se realizaron bioensayos utilizando pellets resuspendidos y sobrenadantes filtrados, comparándolos con los cultivos completos. Ambas fracciones mostraron diferentes niveles de toxicidad. Los resultados sugieren que los principales factores de virulencia se encuentran en el sobrenadante y estarían directamente relacionados con la presencia de ?-exotoxina. De acuerdo con los bioensayos de los sobrenadantes filtrados y sobrenadantes filtrados y autoclavados, no se descartaría también la participación de factores de virulencia termolábiles como Cry1Ia en la toxicidad. En las cepas seleccionadas el principal factor de virulencia sería la ?-exotoxina, por lo que su uso no sería posible de acuerdo a la reglamentación vigente. No obstante, estas podrían ser fuente de genes (ej: cry1Ia) para la producción de plantas transgénicas resistentes a dicha plaga. En una segunda etapa, se realizaron bioensayos preliminares con cultivos completos de 42 cepas de B. thuringiensis con larvas de 2º estadio de A. diaperinus. Las cepas evaluadas no resultaron tóxicas o presentaron porcentajes de mortalidad menores al 10%, exceptuando la cepa nativa INTA Mo4-4 y B. thuringiensis svar. morrisoni cepa tenebrionis DSM2803. Ninguna de estas dos cepas demostró producir ?-exotoxina, sugiriendo que este metabolito no tendría un papel preponderante en la patogenicidad. Ambas cepas presentaron morfología similar de cristales, un perfil de proteínas similar y los mismos genes insecticidas. Sin embargo, alguna diferencia surgió cuando se compararon los perfiles electroforéticos de REP-PCR. Ambas cepas mostraron perfiles similares que difieren por la presencia de una banda polimórfica en INTA Mo4-4. Estas similitudes sugieren que esta cepa podría representar una variante dentro del serovar morrisoni. Al igual que para A. grandis, se analizó en qué fracción del cultivo se encontraban los metabolitos responsables de la toxicidad. Los resultados mostraron que los metabolitos tóxicos principales se encontrarían en el pellet y se asociarían a proteínas Cry3. Se cuantificó la virulencia del pellet seco y molido de ambas cepas para la estimación de la concentración letal media y de otros parámetros estadísticos empleando bioensayos ?finos?. La cepa INTA Mo4-4 resultó significativamente más tóxica que la cepa tenebrionis DSM2803. Se observó además que la solubilización y tripsinización in vitro de los cristales de INTA Mo4-4 no influyen significativamente sobre su virulencia. Por lo expuesto, la cepa nativa INTA Mo4-4 se constituyó como la mejor opción para ser utilizada como ingrediente activo de un formulado nuevo destinado al manejo de A. diaperinus. Teniendo en cuenta esta premisa, se seleccionó el caldo BM con almidón soluble como medio propicio para la producción de INTA Mo4-4, debido a que fue en él donde se logró una mayor producción de proteínas totales. Posteriormente, se empleó un diseño de Plackett-Burman para determinar cuáles de los ocho componentes del caldo mencionado afectaban significativamente la producción de proteínas de la biomasa activa. Se obtuvo de ese estudio que el extracto de levadura es un componente importante del caldo BM, que influyó significativamente y positivamente en la producción de proteínas. La glucosa y el almidón (fuentes de C) demostraron respectivamente, un efecto negativo y positivo, aunque no significativo, sobre la producción de proteínas. Sabiendo que las proporciones de C:N en los medios de cultivo son importantes para el crecimiento normal de B. thuringiensis y la producción de proteínas Cry, y considerando que el análisis de Plackett-Burman sólo detecta efectos principales sin tener en cuenta interacciones, resultó de interés avanzar en el estudio de la interacción entre el extracto de levadura y el almidón soluble. Los dos componentes seleccionados fueron optimizados utilizando un diseño central compuesto rotatorio. Se logró mejorar el caldo BM con la información generada. Se obtuvo una producción de proteínas insecticidas de INTA Mo4-4 significativamente mayor respecto al medio original, lo que se tradujo en un aumento significativo de la toxicidad para A. diaperinus.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 127 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Rodriguez Peña, Marcelo Javier
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2014-09-11

Temas:   Ciencia de la vida   -  MARCKS   -  Pip2   -  Exotosis Acrosomal   -  Espermatozoides

Descripción: La exocitosis acrosomal (EA) es un proceso secretorio dependiente de Ca2+ fundamental para que el espermatozoide fecunde el ovocito. Durante este trabajo de tesis describimos la presencia y localización de MARCKS en espermatozoides humanos. En un modelo de espermatozoides permeabilizado, anticuerpos que reconocen diferentes dominios de MARCKS inhibieron la EA. A su vez se demostró que el dominio efector (ED) de MARCKS es capaz de inhibir la EA y que el estado de fosforilación del ED regula su participación durante la EA. Asimismo la adición de PIP2 o adenofostina, un potente agonista de los receptores de IP3 revirtió el efecto inhibitorio del ED de MARCKS sobre la EA, sugiriendo que MARCKS regula la disponibilidad de PIP2 durante la EA. Además se demostró que un péptido que posee la secuencia del ED de MARCKS es permeable a la membrana plasmática y es capaz de inhibir los movimientos de Ca2+ que ocurren durante la EA. En esta tesis demostramos que una vez que se estimula la EA se produce la fosforilación y translocación de MARCKS desde las membranas al citosol celular. Estos resultados nos permiten plantear que MARCKS es un componente importante en las vías de transducción de señales durante la exocitosis acrosomal.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 149 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Rincón Cruz, Giovanna
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2015-03-26

Temas:   Ciencia de la vida   -  qnrB   -  aac(6´)-Ib-cr   -  qepA   -  oqxAB   -  PMQR   -  Resistencia plasmídica a quinolonas   -  qnrB   -  aac(6´)-Ib-cr   -  qepA   -  oqxAB   -  PMQR   -  Plasmid-mediated quinolone resistance

Descripción: Si bien desde 1998 se conocieron los primeros marcadores de resistencia a quinolonas de codificación plasmídica (PMQR), y sumado a la elevada resistencia a quinolonas reportada, son escasos los estudios epidemiológicos acerca de los PMQR. Dentro de estos determinantes se describieron las proteínas tipo Qnr, la variante de la enzima acetiltransferasa (Aac(6´)-Ib-cr), y las bombas de eflujo (QepA y OqxAB). El objetivo de este estudio fue investigar la frecuencia de los determinantes de resistencia a quinolonas mediados por plásmidos (PMQR) en tres colecciones de Enterobacteriaceae resistentes a cefalosporinas de tercera generación (RCTG) aisladas de especímenes clínicos de Argentina (A), Perú (P) y Colombia (C). Se incluyó, además, otra colección de aislamientos de Colombia sensible a estos antibióticos. Los mecanismos más frecuentemente encontrados fueron aac(6´)-Ib-cr (A= 38,6 %, P= 55,5 %, C-resistente= 71,4 % y C-sensible= 18,7 %) y qnrB (A= 36,8 %, P= 25,9 %,C- resistente 52,4 % y C-sensible 3,1 %). Un aislamiento por país mostró el gen qepA, de los cuales dos fueron qepA1 y el tercero un nuevo alelo con 99 % de identidad con qepA1 y qepA2. Los genes oqxAB se encontraron en tres aislamientos de E. coli de Perú asociados a secuencias de inserción de la familia IS6 en plásmidos de 90 a 100 Kb. El trabajo muestra la importante asociación de la resistencia a fluoroquinolonas (y de las PMQR) en aislamientos RCTG, y su mayor prevalencia que en la colección sensible a oxiiminocefalosporinas. Este trabajo es la primera descripción de la prevalencia de genes de tipo PMQR en aislamiento RCTG en poblaciones de Argentina, Perú y Colombia, así como la primera descripción y caracterización de qepA y oqxAB en aislamientos clínicos de sus países de origen.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: unknown  (tamaño kb)  Pag. 192 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Modenutti, Carlos Pablo
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2015-12-17

Descripción: A pesar de los grandes avances que existen en el conocimiento del cáncer de mama, los principales tratamientos sistémicos que se utilizan para combatir la enfermedad avanzada son la hormonoterapia y la quimioterapia. Esta ultima estrategia, si bien es efectiva en la mayoría de los casos, suele ser nociva para el paciente. El Ácido Hialurónico (AH) esta compuesto por unidades repetidas de disacáridos de Dglucurónico y N-acetil-D-glucosamina, unidos mediante enlaces alternados B1-3 y B1-4. La mayoría de los procesos en los cuales el AH se encuentra involucrado están mediados por su principal receptor, CD44, una glicoproteína de membrana que se encuentra presente en muchos tipos celulares. Se ha demostrado que los oligosacáridos de Ácido Hialurónico (oAH) tienen la capacidad de inhibir la proliferación celular (e inclusive, en algunos casos, de inducir apoptosis) en diferentes modelos de patologías tumorales, como ser las lineas celulares de cáncer de colon, de distintos linfomas y de cáncer de mama. Ademas, cuando se administran en combinación con fármacos antitumorales de uso convencional como la Doxorrubicina en lineas celulares cultivadas in vitro, son capaces de actuar de forma sinérgica, permitiendo una reducción de la dosis del quimioterápico. Estas propiedades de los oAH, los posicionan como buenos candidatos para su administración conjunta con quimioterápicos en una terapia adyuvante. Pero los oAH presentan dos grandes desventajas. La primera, es que al ser un componente del organismo, su metabolismo se encuentra estrechamente regulado, a tal punto que su vida media en la circulación sanguínea es de apenas un par de minutos. El otro es su costo de producción elevado. Es por ello, que la búsqueda de compuestos con propiedades equivalentes a las de los oAH surge como una prometedora linea de investigación. Uno de los desafíos más grandes de la química medicinal es el empleo de oligosacáridos como medicamentos. Los avances en la comprensión funcional de las interacciones proteína-carbohidrato han permitido el desarrollo de una nueva clase de fármacos, conocidos como fármacos glicomiméticos. Estos compuestos bioactivos son capaces de imitar la función de los hidratos de carbono pero carecen de las propiedades no deseadas de los mismos (propiedades farmacocinéticas y farmacodinámicas insuficientes, baja actividad y permeabilidad a los tejidos, escasa estabilidad y vida media en suero). La visión detallada de las interacciones carbohidrato-proteína que se requiere para el diseño de esta clase de moléculas es provista en general por la cristalografía y la RMN. Pero no siempre se puede contar con este tipo de información experimental y es por ello que el empleo de simulaciones computacionales para obtener información estructural de biomoléculas en proyecto de desarrollo de fármacos es cada vez mas difundido en la actualidad. Las herramientas bioinformaticas que se emplean en la búsqueda y optimización de nuevos fármacos, fueron concebidas con una perspectiva utilitaria multipropósito, por lo que en algunos casos, los resultados obtenidos no son tan confiables. Es por ello que la adecuación de dichas herramientas a un sistema particular, es habitual dentro del proceso de descubrimiento de nuevos compuestos. Teniendo en cuenta estos antecedentes, nos propusimos como objetivo de identificar compuestos naturales capaces de actuar como glicomiméticos de oAH. Para ello, realizamos un análisis detallado de las propiedades moleculares de los oAH como así también de los principales características que determinan su interacción con CD44 mediante el empleo de simulaciones de Dinámica Molecular. Luego de una caracterización rigurosa, identificamos que el tipo de enlaces alternados (B1-3 y B1-4) y que la presencia del azúcar N-Acetilglucosamina eran de suma importancia. A partir de estos datos y luego de una búsqueda en bases de datos de compuestos naturales, identificamos dos polímeros que cumplían con la características de presentar enlaces alternados (Liquenina y Xilano) y uno compuesto exclusivamente por NAcetilglucosamina (Quitina). Una vez identificados los compuestos, procedimos a la construcción de los complejos correspondientes con CD44, con el fin de evaluar la afinidad relativa del receptor por cada uno de ellos. Debido a que las herramientas disponibles para la predicción de estructuras proteína-carbohidrato presentan un grado muy bajo de precisión y exactitud, se desarrollo un método alternativo al que se emplea habitualmente con el programa de docking Autodock (CADM), basado en la estructura del solvente en el sitio de reconocimiento para carbohidratos (CBS), al cual denominamos WSBDM. Utilizando el WSBDM, obtuvimos complejos entre CD44 y tetrasacáridos de cada uno de los compuestos seleccionados. Luego realizamos simulaciones de Dinámica Molecular con el fin de caracterizar la estabilidad de los oligosacáridos el CBS de CD44 y estimar la afinidad relativa por receptor a partir del calculo de energía libre de unión con un método de punto final (MMPB-SA). Los resultados indican que solo los oligosacáridos de Liquenina (oLi), tendrían una afinidad significativa por CD44. Por ultimo, decidimos evaluar in vitro la actividad de estos compuestos. Los resultados de los ensayos del efecto de los oligosacáridos, indican que solo los oLi serian capaces disminuir de forma significativa la proliferación celular, en concordancia con los resultados obtenidos in silico. Por otro lado, y mas interesante aun, cuando los oligosacáridos son administrados en combinación con Doxorrubicina, tanto los oligosacárido de Liquenina como los de Xilano, son capaces de potenciar la actividad del quimioterápico. Estos resultados indicarían que quizás estén ejerciendo su efecto por una vía independiente de CD44. Estos resultados in vitro constituyen solo una prueba de concepto de los hallazgos realizados in silico, pero constituyen un estimulo a futuras investigaciones en el tema.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 191 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Arza, Patricia
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2016-05-05

Temas:   Ciencia de la vida   -  Deshidratación   -  Corazón   -  Riñón   -  Óxido Nítrico   -  Caveolinas   -  Fisiología

Descripción: Los hallazgos obtenidos a lo largo del presente trabajo de tesis muestran que el sistema del NO, participa como modulador de los parámetros hemodinámicos, de la funcionalidad cardíaca y del balance renal de agua ante un estado hipovolémico inducido por restricción controlada de agua a largo plazo, según avanza la edad. Las modificaciones en la biodisponibilidad del óxido nítrico (NO) cardiaco y renal, y su interacción con las caveolinas, estarían compensando los cambios funcionales y estructurales asociados con la edad en estos órganos bajo estrés osmótico. En relación al impacto del NO renal sobre la reabsorción tubular de agua, se demuestra que se afecta la redistribución de los canales de agua tipo 2 (AQP2) en la médula renal. Esta respuesta es dependiente del avance de la edad, y al menos en parte, responsable de la menor capacidad de concentrar la orina durante la edad avanzada. Las presentes observaciones enfatizan el papel del sistema del NO cardíaco y renal durante un desequilibrio hidrosalino inducido por restricción de agua durante el proceso natural de envejecimiento.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 173 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Szpilbarg, Natalia
2016-03-04

Temas:   Ciencia de la vida   -  Acuaporinas   -  Placenta   -  Apoptosis   -  Hipoxia

Descripción: Numerosas evidencias sugieren que las acuaporinas (AQPs) intervendrían en el movimiento del agua a través de la membrana plasmática durante la apoptosis. Aunque la apoptosis de trofoblasto es un evento fisiológico, está exacerbada en procesos patológicos como la preeclampsia. La hipoxia intermitente seria un potente inductor de la apoptosis placentaria. Nuestro objetivo fue determinar el papel de AQPs placentarias en la apoptosis trofoblasto. Explantos de placentas normales se cultivaron en normoxia, hipoxia, e hipoxia/reoxigenación (H/R), y se evaluaron índices de apoptosis en presencia o ausencia de bloqueantes de AQPs. Se estudió la expresión de AQP3 y AQP4 en placentas preeclámpticas y en el modelo de explantos. Las expresiones AQP3 y AQP4 disminuyeron en placentas preeclámpticas y en explantos expuestos a H/R. El bloqueo de la actividad AQPs con HgCl2, redujo drásticamente la degradación del ADN, el número de núcleos apoptóticos, la expresión de Bax y la actividad de caspasa?3. Los mismos resultados se obtuvieron bloqueando la AQP3 con CuSO4 mientras que con TEA y floretina no se inhibió la apoptosis. Por lo tanto, las AQPs y, en particular, AQP3, participarían en la apoptosis de trofoblasto. Así, alteraciones en su expresión perturbarían el equilibrio de este proceso ordenado desencadenado la preeclampsia.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: unknown  (tamaño kb)  Pag. 154 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Leal Denis, María Florencia
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2015-03-16

Temas:   Ciencia de la vida   -  Eritrocitos   -  ATP   -  Receptores P

Descripción: Los eritrocitos humanos (RBC) liberan ATP frente a diferentes estímulos. In vitro, la exposición a diferentes agentes farmacológicos desencadena eventos intracelulares que activan la liberación de ATP. En esta tesis se analizaron los factores que controlan la evolución temporal de la concentración de ATP extracelular (ATPe). Las células fueron expuestas a dos estímulos que inducen liberación de ATP: 3V y mastoparán 7 (MST7). Ambos estímulos inducen aumentos de la concentración de cAMP. La exposición a 3V produjo un aumento de cAMP, que se tradujo en una liberación aguda de ATP. Cuando las células fueron tratadas con CBX (bloqueante de panexina 1), la liberación de ATP fue completamente bloqueada concluyendo que la salida de ATP ocurriría sólo a través de la panexina 1. La exposición a MST7 indujo pequeños aumentos de cAMP que llevaron a una gran salida de ATP. El CBX bloqueó parcialmente la liberación de ATP, sugiriendo la existencia de dos vías para la liberación del mismo. Además se estudió el papel del volumen y la adhesión celular en la cinética de ATPe. En las células no adheridas, MST7 no indujo respuesta mientras que en células adheridas, las concentraciones ATPe aumentaron y se observó un aumento de volumen celular.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 184 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Poklépovich Caride, Tomás Javier
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2015-03-25

Descripción: El ciliado Tetrahymena thermophila no sintetiza ni requiere esteroles para su crecimiento, aunque sintetiza tetrahymanol, a diferencia de otros ciliados que no lo hacen y son auxótrofos para esteroles. Algunos ciliados pueden incorporar esteroles y modificarlos. Se analizaron, a nivel bioinformático, las vías metabólicas de tetrahymanol y esteroles, revelando la presencia de la vía completa de síntesis de tetrahymanol en Tetrahymena, con enzimas provenientes de diferentes orígenes, pero incompleta en los otros ciliados analizados. Además, se investigó la respuesta, a nivel de la expresión génica, de T. thermophila a esteroles, mostrando una regulación de la vía metabólica de tetrahymanol y de esteroles. T. thermophila transforma a algunos esteroles a través de 4 actividades enzimáticas, C-5, C-7 y C-22 desaturaciones y C-24 des-etilación. C-5 esterol desaturasa (Des5Ap) es dependiente del sistema citocromo b5/ citocromo b5 reductasa, mientras que se desconoce el sistema dador de electrones de C-7 esterol desaturasa (Des7p). Se analizaron la funcionalidad y la conservación de los sistemas dadores de electrones de ambas, expresando Des5Ap en Saccharomyces cerevisiae y Des7p en células de Spodoptera frugiperda, revelando que ambas enzimas son funcionales a pesar de la distancia evolutiva y además que los sistemas dadores de electrones son conservados.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 141 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Angelani, Carla Romina
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2017-10-25

Descripción: ?98? y ?78? son dos variantes truncadas todo-ß de IFABP (proteína que une ácidos grasos de intestino de rata). Esta familia se constituye como un modelo estructural útil para estudiar los determinantes moleculares relacionados con la agregación de proteínas de la clase ß. Las variantes abreviadas revelan una plasticidad conformacional incrementada, una topología del tipo nativa y un plegado cooperativo. Este trabajo de tesis aborda el estudio de la conformación, estabilidad y la tendencia amiloidogénica de estas proteínas. Optamos por el 2,2,2 trifluoroetanol (TFE) como el agente disparador de la agregación, investigándose el mecanismo cinético y las características morfológicas de los agregados amiloides. Asimismo, evaluamos el impacto de bajas concentraciones de TFE (< 15 % v/v) -condición donde la proteína se mantiene soluble- sobre la conformación y la estabilidad de las proteínas mediante diversas técnicas biofísicas. Dichos estudios revelaron la coalescencia conformacional de las tres proteínas y permitieron refinar el modelo estructural planteado para las variantes abreviadas. Finalmente, con el fin de abordar los primeros eventos que conducen a la formación de núcleo de agregación, se estudiaron los cambios que ocurren inmediatamente después de la adición de 25 % v/v TFE. Se concluye que el cambio estructural alcanzado a 10 % v/v TFE mimetizaría aquel necesario para desencadenar la agregación.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 226 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Lompardía, Silvina Laura
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2014-12-19

Descripción: En el presente trabajo se determinó la implicancia del acido hialurónico (AH) en diversos mecanismos biológicos que favorecen la progresión tumoral. Para ello se utilizaron las líneas celulares humanas de leucemia mieloide crónica K562 y Kv562. Se demostró que el AH incrementó la proliferación de ambas células. En las células K562 su efecto estaría mediado por el receptor CD44 y la activación de las vías de PI3K/Akt y de MEK/ERK mientras que en las Kv562 dependería del receptor RHAMM y de PI3K/Akt. Los oligosacáridos del AH (oAH) inhibieron la proliferación de las células K562 a través de CD44 y la reducción de pAkt y pERK. El inhibidor de la síntesis de AH, 4MU, disminuyó la proliferación celular atenuando la señalización de PI3K/Akt e induciendo senescencia. Asimismo, en ambas líneas celulares el AH revirtió el efecto anti-proliferativo y senescente de Imatinib mientras que los oAH y la 4MU las sensibilizaron a la acción del inhibidor. Además, los oAH y la 4MU sensibilizaron a las células Kv562 al efecto senescente de la VCR mediante la inhibición de PI3K y de la Pgp. A partir de estos resultados puede concluirse que las células K562 y Kv562 sintetizan AH para impedir la inducción de senescencia y resistir a la quimioterapia. Además, los oAH y la 4MU sensibilizaron a las células al efecto de Imatinib y de VCR sugiriendo un posible uso como co-adjuvantes para el tratamiento de leucemias que resisten a la terapia convencional.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 179 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Martinez, Leandro Marcelo
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2015-03-18

Descripción: Este trabajo propone que el estudio del cáncer de mama basándonos solamente en las células tumorales es insuficiente ya que su microambiente debe ser considerado. Fue así que demostramos que el microambiente hematopoyético de médula ósea, en particular las células madre mesenquimales, de pacientes con cáncer de mama avanzado favorece la formación de un nicho pre?metastásico propicio para la futura evolución de la cascada metastásica ósea. Creemos que nuestros resultados podrían ser útiles en el diseño de innovadoras terapias que intenten prevenir o retrasar la aparición de metástasis óseas, así como en la identificación de nuevos indicadores de metástasis óseas en estas pacientes. Por otro lado, estudiamos el valor pronóstico del microambiente tumoral y de las células tumorales del tumor primario de pacientes con cáncer de mama temprano. Fue así que encontramos que la expresión alta de CD105 en las células estromales fusiformes CD34 (?), no asociadas a la vasculatura, así como la expresión alta de TRAIL?R3 y de CCR?2 en las células tumorales son claros parámetros de pronóstico desfavorable para estas pacientes, en particular predictores del desarrollo metastásico; entre otros hallazgos. Estas herramientas podrían ser incorporadas en la rutina clínico?patológica ya que son altamente accesibles, sencillas y no invasivas.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: unknown  (tamaño kb)  Pag. 227 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Lopez Mingorance, Fabiana Norma
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2015-10-09

Descripción: El síndrome metabólico(SM), definido según la ATP III, afecta a más del 20% de la población mundial. Se considera a la insulino resistencia (IR) el componente patogénico fundamental. Interviene un desbalance del Sistema Nervioso Autónomo, afectado por factores ambientales y cambios del estilo de vida. El páncreas, a través del eje endocrino-exocrino, actúa en el proceso digestivo de todos los nutrientes, y regula la homeostasis de la glucosa. Se estudió, en pacientes con SM, la importancia de la PTOG ampliada, como herramienta para su diagnostico y tratamiento. La alteración exocrina producida en la IR, a consecuencia de la interacción del eje endocrino-exocrino, se evaluó con la Prueba del Pancreolauryl. Se estudió en un modelo animal de SM, que la esplacnicectomia (interrupción del circuito vago-central-esplácnico) mejora la IR característica. Postulamos que la esplacnicectomia, corta un freno modulador del tono colinérgico hepático; incrementa la liberación del Hepatic Insulin Sensitizing Substance (HISS), potencial hormona que actúa sinergicamente con la insulina en músculo esquelético, corazón y riñones, aumentando la disponibilidad de glucosa en el tejido. Mejora la respuesta fisiopatológica del páncreas endocrino y exocrino. Puede llegar a ser una herramienta terapéutica útil para el tratamiento de estas patologías en humanos.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 102 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Miraglia, María Cruz
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2017-03-02

Descripción: La invasión del sistema nervioso central (SNC) por bacterias del género Brucella resulta en un desorden inflamatorio denominado neurobrucelosis. Evidencias clínicas demuestran que los pacientes que sufren de esta forma de la enfermedad presentan alteraciones funcionales de la barrera hematoencefálica (BHE). Sin embargo, los mecanismos patogénicos implicados en la activación de la BHE, causada por Brucella, no han sido investigados a nivel celular y molecular. En este trabajo investigamos el mecanismo a través del cual B. abortus transmigra a través de la BHE y accede al SNC; y ahondamos en cómo la respuesta inflamatoria desencadena frente a la bacteria repercute en la integridad de la misma. Presentamos evidencia in vitro sobre la capacidad de B. abortus de infectar, replicar y activar células endoteliales de microvasculatura cerebral utilizado como modelo la línea celular HBMEC. Además, logramos generar un modelo in vitro de transmigración bacteriana, a través del cual pudimos dilucidar que B. abortus atraviesa una monocapa de HBMEC utilizando un mecanismo de transmigración facilitada por monocitos infectados denominado ¨Caballo de Troya¨. La entrada de la bacteria se ve favorecida por la migración fisiológica de leucocitos infectados hacia el SNC. Desde allí, la bacteria tendría la capacidad de infectar células adyacentes, es decir, células gliales residentes del parénquima cerebral. Una vez que la bacteria infecta células gliales (astrocitos y microglía), se desencadena una respuesta inmunológica que comprende la secreción de citoquinas inflamatorias. En este trabajo, se estudió la implicancia de estos mediadores inflamatorios en la integridad de la BHE. Demostramos que la secreción de IL-1? por células de la glia cumplía un rol preponderante en la activación de las HBMEC. IL-1? indujo la secreción de la citoquina inflamatoria IL-6 y las quemoquinas, IL-8 y MCP-1 por parte de las HBMEC; y desencadenó un aumento en la expresión de la molécula de adhesión CD54 (ICAM-1). En el modelo in vitro pudimos determinar que la activación de las HBMEC resultó clave en la transmigración tanto de monocitos como neutrófilos. No solamente establecimos la importancia de esta citoquina en la activación de las HBMEC sino que pudimos dilucidar parte del proceso que lleva a la maduración proteolítica de esta citoquina por inflamasomas en las células gliales. Logramos correlacionar la funcionalidad de los inflamasomas AIM2 y NLRP3 con la secreción de IL-1? y la consecuente presencia de infiltrados neutrófilos en el parénquima cerebral en un modelo in vivo de infección. Por otra parte, los resultados de esta tesis demuestran que TNF-? no tuvo implicancia directa sobre la activación de la BHE. En este caso, la secreción de TNF-? se correlacionó a la secreción de MMP-9 por parte de astrocitos. Se indagó en el mecanismo por el cual se produce la secreción de esta enzima proteolítica pudiendo determinar que la activación de las vías de ERK y p38 de las MAPK serían fundamentales en este proceso dado que la inhibición farmacológica de ambas vías afectó la secreción de MMP-9. Finalmente, logramos darle relevancia clínica a estos hallazgos ya que pacientes con neurobrucelosis presentaron altos niveles de MMP-9 en el LCR. La relevancia patológica de la secreción de MMP-9 podría alterar la estructura de la BHE al degradar los componentes de la lámina basal afectando indirectamente a su integridad. Los resultados expuestos en esta tesis aportan conocimientos hasta el momento desconocidos sobre la estrategia de entrada de la bacteria al SNC y como desde allí desencadena una respuesta inmune que afecta la integridad de la BHE.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 142 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Pignataro, María Florencia
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2017-06-01

Temas:   Ciencia de la vida   -  PMCA   -  Lípidos   -  Actividad enzimática

Descripción: Las proteínas de membrana son esenciales para la regulación de la composición del medio celular, el potencial de membrana, el metabolismo y las vías de señalización. Por su ubicación son consideradas la puerta de ingreso a la célula y el blanco de muchas drogas, ya que más de la mitad de las moléculas terapéuticas pequeñas están dirigidas contra proteínas asociadas a la membrana. Sin embargo, existen escasas estructuras tridimensionales de dichas proteínas debido a las dificultades inherentes a su expresión, extracción, purificación y a la obtención de muestras abundantes y homogéneas que permitan su estudio cristalográfico. Dada su relevancia fisiopatológica y farmacológica, ha sido de especial interés desarrollar diferentes estrategias con el fin de obtener la información necesaria para resolver los distintos aspectos del complejo entramado entorno-estructura-función. La bomba de calcio de la membrana plasmática (PMCA) pertenece a la superfamilia de las P-ATPasas; está presente en la membrana plasmática de todas las células eucariotas y es uno de los sistemas que participa en la remoción del Ca2+ citosólico transportándolo hacia el medio extracelular. A diferencia de los intercambiadores Na+/Ca2+ (NCX) y Na+/Ca2+-K+ (NCKX), que también remueven el Ca2+ citosólico, la PMCA es un sistema de alta afinidad y baja capacidad de transporte de Ca2+. La PMCA es regulada por calmodulina, fosfolípidos ácidos y ácidos grasos insaturados. Además, los fosfolípidos neutros como la fosfatidilcolina son esenciales para la actividad de la enzima. En el presente trabajo de Tesis, estudiamos la dependencia de la actividad Ca2+-ATPasa de la PMCA con la fracción molar de fosfolípidos. Para tal fin, reconstituimos a la PMCA en micelas mixtas con diferentes proporciones de detergente/fosfatidilcolina y a su vez, diferentes largos de cadenas carbonadas de fosfatidilcolina. Los sistemas micelares mixtos se han utilizado ampliamente para el estudio de la interacción de las proteínas integrales de membrana con su entorno hidrofóbico. En particular, se ha aceptado el uso de este tipo de sistemas para el estudio de la PMCA ya que la misma preserva las características bioquímicas presentes en su entorno nativo. Hemos caracterizado la transición micela-vesícula de los diferentes sistemas de reconstitución utilizando para tal fin dos técnicas diferentes, la dispersión de luz estática (SLS) y la espectroscopía de correlación de fluorescencia (FCS). Además determinamos los niveles de intermediarios fosforilados de la PMCA que permitieron describir funcionalmente los efectos ejercidos no sólo por la fracción molar presente en la micela mixta sino también la acción de diferentes largos de cadena carbonada. Finalmente, realizamos simulaciones de dinámica molecular de un modelo de la PMCA insertado en bicapas de 1,2-dimiristoil-sn-glicero-3-fosfocolina (DMPC) o 1,2-dioleoil-sn-glicero-3-fosfocolina (DOPC) de manera de explorar el efecto del grosor hidrofóbico del dominio transmembrana de la PMCA sobre la actividad ATPasa. Mediante estas estrategias experimentales demostramos que los fosfolípidos neutros modulan la actividad Ca2+-ATPasa de la PMCA, modificando el número de recambio de la enzima en función de la composición de la micela mixta y de las características de las moléculas de fosfatidilcolina. Los cambios biofísicos asociados con la transición micela-vesícula incrementan el tiempo de permanencia de la enzima en el intermediario fosforilado, siendo este paso el responsable de la disminución de la actividad enzimática. Las simulaciones de dinámica molecular permitieron demostrar que cuando la PMCA se encuentra inserta en bicapas de DOPC, existen residuos cargados incluidos en el centro hidrofóbico de dichas bicapas. De manera complementaria, en las bicapas de DMPC los requerimientos de la superficie proteica se satisfacen evitando el costo termodinámico de exponer residuos cargados en zonas hidrofóbicas. De acuerdo a los datos experimentales, sugerimos que el grosor hidrofóbico óptimo para la PMCA es cercano a 24 Å, en concordancia con la máxima actividad hallada en presencia de este fosfolípido de 14 átomos de carbono de su cadena hidrofóbica. Para estudiar la modulación de la PMCA por ácidos grasos insaturados, se desarrolló un análogo fotoactivable de ácido oleico (AS86). Esta molécula se une covalentemente a la PMCA y es desplazable por ácido oleico. En la presente tesis hemos sintetizado, purificado y caracterizado dicho análogo y comprobamos que el AS86 se comporta de manera análoga al ácido oleico, cuando interactúa medianteunión no-covalente, incrementando la actividad Ca2+-ATPasa de la PMCA en el rango de concentraciones en las que actúa el ácido oleico. En este mismo sentido, pudimos demostrar que el AS86 es capaz de interaccionar directamente con PMCA e inducir un cambio conformacional tal que sus segmentos transmembrana se encuentran menos expuestos al entorno lipídico. Esta última característica es compartida por todos los activadores de la PMCA estudiados, incluyendo el ácido oleico. Estas evidencias demuestran la gran similitud entre la sonda fotoactivable AS86 y el ácido oleico. A partir de allí, desarrollamos una estrategia experimental que involucra la fotomarcación de la PMCA con AS86 y un posterior análisis por espectrometría de masa de los fragmentos para hallar los posibles sitios de interacción de la enzima con los ácidos grasos insaturados. La estrategia adoptada se basó en unir covalentemente el AS86 a la PMCA, realizar la digestión del aducto con V8 proteasa, separar por SDS-PAGE los fragmentos y posteriormente digerir in-gel con tripsina y luego analizar los péptidos resultantes por espectrometría de masa. Los resultados aquí mostrados constituyen la primera evidencia de un análisis mediante MALDI TOF-TOF de fragmentos trípticos de la PMCA purificada de eritrocitos humanos. Proponemos una región para la interacción del AS86 con la PMCA (E812ASDIILTDDNFTSIVKAVMW832) que podría ser parte de un dominio donde interactúan varias moléculas de ácidos grasos para el transporte de calcio. En conclusión, en el presente trabajo hemos estudiado la regulación del transporte de calcio por fosfolípidos neutros y por ácidos grasos insaturados mediante el desarrollo de diferentes estrategias experimentales. Además hemos modelado la acción de estos lípidos sobre la estructura y la función de la PMCA.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 178 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Di Salvo, Luciana Paula
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2015-03-27

Descripción: Los microorganismos del suelo cumplen un rol preponderante en los procesos ecosistémicos, estando afectados por las diferentes estrategias de manejo de cultivos aplicadas en la producción agrícola. Los efectos de la aplicación de fertilizantes e inoculantes formulados con bacterias promotoras del crecimiento vegetal en condiciones de campo sobre las comunidades microbianas nativas no son completamente conocidos. El objetivo general de este trabajo fue generar conocimiento sobre la ecología microbiana rizosférica y sobre las variables agronómicas de los cultivos de trigo y maíz cuando se aplican fertilizaciones químicas e inoculantes experimentales de Azospirillum brasilense en condiciones de campo. Para ello se llevaron a cabo experimentos independientes entre sí, en diferentes establecimientos productivos de la provincia de Buenos Aires y campañas agrícolas. Se determinaron parámetros agronómicos y microbiológicos. Los resultados obtenidos en este trabajo constituyen un aporte significativo al conocimiento científico, con el objetivo de mejorar la respuesta a la inoculación en interacción con la fertilización, y para la caracterización del riesgo ambiental de ambas prácticas agronómicas. La información obtenida en el marco del presente tiene implicancias tanto académicas como productivas y ambientales, y resulta directamente transferible a asesores y productores agropecuarios, bajo el actual paradigma de una producción agrícola más sustentable.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 191 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Pino, Marylú
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2015-12-23

Descripción: Se abordó el estudio bioquímico y molecular de Inquilinus limosus con muestras del ámbito hospitalario. Se observó la presencia de un clon con dos variantes de expresión en un paciente con fibrosis quística, crónicamente colonizado (2006-2013), con distinto nivel de producción de biofilm in vitro. Altas concentraciones de colistín y tobramicina promovieron la formación de un biofilm in vitro con alta viabilidad remanente. La combinación antimicrobiana IMI+CIP (0,25 y 1 ?g/ml) presentó sinergia antimicrobiana a 6 h de iniciado el ensayo para determinar la velocidad de muerte de I. limosus planctónico, sin recrecimiento a las 48h. Se describieron dos serino-ß-lactamasas tipo AmpC cromosómicas, INQ-1 e INQ-2, con diferentes afinidades por ß-lactámicos, sin genes reguladores y poco afectados por los inactivadores clásicos de serino-ß-lactamasas. La secuenciación genómica del 99,8 % de I. limosus MP06 permitió detectar la presencia de determinantes génicos de bombas de eflujo de resistencia a múltiples drogas (familia RND y superfamilia ABC) e hipotetizar su rol patogénico al encontrar determinantes génicos vinculados a la evasión del sistema inmune adaptativo y a la sobrevida intracelular. Este trabajo permitió caracterizar a I. limosus como patógeno oportunista emergente con estrategias que le permiten colonizar/infectar de forma recalcitrante al tratamiento antimicrobiano.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 286 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Guil, María Julia
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2017-03-27

Descripción: La hipertensión arterial (HTA) es una patología de muy elevada incidencia a nivel mundial que se relaciona con muertes por eventos cardiovasculares. Un modelo de estudio consiste es el DOCA-Sal, que presenta incrementos en las endotelinas plasmáticas y centrales, así como en la actividad del sistema simpático. Recientemente demostramos que las ETs actuarían como neuromoduladores de neuronas catecolaminérgicas a nivel de los bulbos olfatorios (BO), hipotálamo anterior (HA), importante centro simpatoinhibitorio, e hipotálamo posterior (HP), conocida área simpatoexcitatoria. Hipotetizamos entonces que el sistema endotelinérgico endógeno central está involucrado en la hipertensión arterial del modelo DOCA-sal modulando la actividad catecolaminérgica. Para esto administramos centralmente un antagonista del receptor ET-A o un agonista ET-B, en animales normotensos e hipertensos, durante una hora luego de la cual fueron sacrificados. Observamos que ambas drogas disminuyeron la presión arterial, principalmente en hipertensos. Por otra parte, ambas drogas en animales hipertensos mostraron disminuir la actividad de la Tirosina Hidroxilasa (TH), enzima limitante en la biosíntesis catecolaminérgica, a nivel de los BOs y del HP. Resultados acordes se hallaron en la fosforilación, expresión proteica y de mensajero de la misma. Así, evidenciamos principalmente la importancia del sistema endotelinérgico endógeno central en el mantenimiento de la PA de ratas DOCA-Sal.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 235 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Ledesma, Martín Manuel
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2016-11-29

Temas:   Ciencia de la vida   -  Serología   -  Camélidos sudamericanos   -  Llama   -  Guanacos   -  Alpacas   -  Vicuñas

Descripción: Los camélidos sudamericanos son un grupo de especies de interés ganadera milenaria, que durante los últimos años 20 años han recobrado relevancia comercial. No obstante el interés creciente en su cría y comercialización, existe un notorio déficit en el conocimiento básico acerca de cuestiones sanitarias, y en la disponibilidad de herramientas para el diagnóstico, seguimiento y relevamiento sanitario. Para contribuir al desarrollo de estas herramientas y para avanzar sobre el conocimiento del estatus sanitario de los camélidos sudamericanos, durante el trabajo de esta tesis doctoral se estudió la presencia de anticuerpos reactivos en muestras de suero de camélidos de diferentes regiones de Argentina, frente a distintos agentes microbianos que pudieran eventualmente causar alguna patología, vinculando estos resultados con los estudios microbiológicos directos correspondientes. Para abordar esta problemática, se eligieron microorganismos de relevancia sanitaria comprobada, microorganismos reportados en camélidos de otras partes del mundo y patógenos no descriptos para estas especies animales. La presencia de anticuerpos reactivos contra antígenos derivados de estos microorganismos se estudió por las técnicas de ELISA, Western Blot y técnicas derivadas. A su vez se estudió la presencia de los microorganismos por métodos de detección directos, que variaron según el microorganismo de interés. También se estudió la respuesta inmunoserológica artificial frente a la vacunación antirrábica con tres generaciones de vacunas, y se compararon los resultados de los ensayos serológicos desarrollados en esta tesis, con aquellos de una prueba de seroneutralización de la capacidad infectiva del virus vivo en ratones, a los efectos de predecir el estado de protección de un modo indirecto. En el marco de esta serie de experimentos, se definió la mejor estrategia de vacunación para las llamas, y de esta manera se arribó a una estrategia definida y probada de inmunoprofilaxis antirrábica. De la combinación de los estudios de prevalencia de anticuerpos, y de los protocolos de vacunación experimental, se derivaron las virtudes y los eventuales límites que puede ofrecer el análisis serológico de anticuerpos cuando se lo quiere emplear para predecir la exposición microbiana, o la respuesta protectora luego de la vacunación. Considerando las particularidades del sistema inmune de CS y los requisitos de los reactivos utilizados en ensayos serológicos, fue necesario desarrollar tecnologías de inmunodetección de isotipos de Ig de CS, así como también fue necesaria la adaptación de distintos protocolos de trabajo originalmente descriptos para otras especies. Por su parte, las tecnologías desarrolladas permitieron caracterizar las respuestas inmunes en términos de los isotipos de Ig de respuesta, lo que permite hacer contribuciones sustantivas al conocimiento inmunobiológico básico de la especie.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 209 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Asade, Daniel J.
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2017-12-21

Temas:   Ciencia de la vida   -  Siríaco   -  Arameo   -  Árabe   -  Farmacopea   -  Farmacia   -  Medicina

Descripción: Esta tesis de doctorado titulada "La literatura farmacéutica siríaca y árabe. Comparación de El Libro de las medicinas (siríaco) con recetas en la literatura farmacéutica árabe", identifica los paralelos literarios existentes entre dieciséis medicamentos idénticos o similares (en cuanto al nombre propio, indicaciones clínicas, composición cuali-cuantitativa, posología y vía de administración, farmacotecnia, conservación y referencias citadas) de los textos árabes medievales, y los del texto siríaco-arameo de un manuscrito medieval editado por Budge (1913), llamado El Libro de las medicinas. Además, indaga su origen en la medicina clásica de lengua griega y latín, y en la medicina antigua de Egipto y Mesopotamia. Todos estos medicamentos, simples o compuestos, fueron identificados por su taxonomía constitutiva. Mediante el análisis filológico de los medicamentos simples, demostramos en varios casos los préstamos del siríaco al árabe, o al menos su nombre vulgar anterior al período árabe islámico; de modo que, sumado a los paralelos literarios mencionados anteriormente, nos permitió demostrar que los cristianos de lengua siríaca-aramea fueron, al menos en los casos considerados, traductores de la medicina clásica más tempranos que los árabes musulmanes, como sostienen los académicos en estudios siríacos, bizantinos y árabes; y los especialistas en Historia de la Ciencia.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 202 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Marziali, Leandro Nazareno
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2016-04-26

Descripción: En el sistema nervioso central (SNC) la Transferrina (Tf) y las Hormonas Tiroideas (HTs) favorecen la maduración de los oligodendrocitos (OLGs) y la mielinización. Resultados de nuestro laboratorio sugirieron que la Tf y las HTs, regularían en forma conjunta dichos procesos debido a que las HTs modulan la expresión de la Tf mientras que esta última tendría efecto sobre la expresión del receptor ? de las HTs (TR?). Para dilucidar este potencial mecanismo de interacción realizamos experimentos in vivo en los que evaluamos la influencia combinada de la Tf y las HTs sobre la mielinización así como sobre los receptores de las HTs (TRs). Posteriormente utilizamos células progenitoras neurales (CPNs) y analizamos la acción de ambos factores en forma conjunta o individualmente sobre la maduración oligodendroglial. Nuestros resultados in vivo, sugirieron que tanto la apoTransferrina (aTf) como las HTs ejercían efectos positivos individuales sobre la mielinización. Asimismo, las HTs regularon la expresión de la Tf durante las primeras dos semanas de vida y existó una interacción entre ambos factores a nivel de los TRs debido a que las HTs regularon la expresión del TR? mientras que la Tf reguló la expresión del TR?. Los experimentos in vitro revelaron que el silenciamiento de la expresión de la Tf condujo a una disminución de la maduración oligodendroglial. Bajo estas condiciones se observó una pérdida parcial de la capacidad de las HTs de favorecer la maduración oligodendroglial conjuntamente con la disminución de la expresión del TR?, efecto que se revierte por la adición de apoTf. La inhibición farmacológica del TR? también condujo a la disminución de la maduración oligodendroglial y además bloqueó parcialmente la capacidad de la aTf de promover la diferenciación de los OLGs. El tratamiento de las CPNs con HTs indujo la expresión del TR? y el incremento prematuro de la expresión de la Tf el cual es abolido por la inhibición del TR?. Estos hallazgos indicaron que las acciones combinadas de la Tf y las HTs son necesarias para que ocurran una adecuada maduración oligodendroglial y mielinización. Estos efectos serían consecuencia de la interacción entre los efectos de la Tf y las HTs que asegurarían la progresión del plan de maduración de los OLGs. En concordancia con la anterior hipótesis, nuestros resultados demostraron que las HTs son capaces de regular la expresión de la Tf, la que a su vez ejerció efectos positivos sobre la maduración oligodendroglial y aumentó la expresión del TR? conformando un circuito de retroalimentación, que sumado a los efectos de las HTs mediados por el TR? aseguraron que ocurra una adecuada maduración oligodendroglial.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 153 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Cacciagiú, Leonardo Damián
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2016-05-05

Descripción: Los pacientes con enfermedad renal crónica (ERC) en hemodiálisis presentan una tasa de mortalidad cardiovascular marcadamente elevada, entre 10 y 20 veces superior a la de la población general. Su cuadro cardiometabólico suele presentar situaciones paradójicas que no explican la incrementada incidencia de eventos cardiovasculares. Mediante un diseño observacional, descriptivo y transversal se evaluaron parámetros circulantes correspondientes al perfil lipídico-lipoproteico, cuadro pro-inflamatorio y constituyentes de pared arterial, y además se llevaron a cabo de tres ensayos experimentales in vitro para evaluar funcionalidad de lipoproteínas y explicar alteraciones de citoquinas. Se incluyeron pacientes con ERC en hemodiálisis (n=120) y controles sanos (n=56). Se observó una hipertrigliceridemia moderada reflejada en la acumulación de remanentes lipoproteicos, muy poco estudiado previamente en esta condición. Las VLDL fueron pequeñas y ricas en colesterol, y presentaron menor afinidad con la enzima que la degrada. La acumulación de las lipoproteínas ricas en triglicéridos se atribuye al déficit del catabolismo. La disminución de col-LDL es paradójica y constituye un marcado riesgo de eventos cardiovasculares, respondiendo a curvas de relación de forma-U. LDL presentó alteraciones cualitativas que incrementan su aterogenicidad. HDL fue disfuncional con menor capacidad anti-oxidante sobre LDL, asociado a menor actividad de paraoxonasa, además de alteraciones en su composición. La inflamación subclínica quedó evidenciada por el marcado incremento de interleuquina-6 y PCR-us, promovidos en parte por las lipoproteínas aterogénicas. Adiponectina presentó, paradójicamente, valores más elevados, que no cumplirían su rol anti-inflamatorio. Este aumento se debería a una disminución de su eliminación renal, ya que no se observó incremento de su expresión en ratas con insuficiencia renal. Los factores relacionados con la pared arterial, demostraron en ERC, alteración de la función arterial evidenciado por aumento de endotelina-1, actividad de fosfolipasa A2 con acción pro-oxidante e incremento de metaloproteasa-2 y -9, relacionado a un proceso activo de remodelamiento y vulnerabilidad de las placas ateromatosas. La interrelación de estos parámetros cardiometabólicos, varios de ellos estudiados por primera vez, permiten deducir una secuencia de pasos que explican la ateroesclerosis acelerada en la ERC en hemodiálisis.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 123 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Corominas, Ana Irene
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2017-11-24

Temas:     -  Marcadores bioquímicos   -  Ácido úrico   -  Hipertensión   -  Embarazo

Descripción: Aunque se conoce que existe una asociación entre los niveles elevados de ácido úrico y preeclampsia, el debate sobre su aplicación clínica aún está abierto. Nuestro objetivo fue describir el comportamiento del ácido úrico sérico en la mujer embarazada y su eventual rol como predictor precoz de las patologías hipertensivas gestacionales con el fin de contribuir al cuidado del embarazo y el parto. En un estudio retrospectivo realizado en el Hospital Nacional ?Dr. Prof. Alejandro Posadas?, encontramos que en la primera mitad de la gestación los niveles de ácido úrico fueron similares en embarazadas normotensas y en aquellas que desarrollaron preeclampsia. Sin embargo, a partir de la semana 20, el ácido úrico aumenta 1,5 veces en gestantes preeclámpticas, sin cambios en la uremia y creatininemia, descartándose así el compromiso renal. En un abordaje prospectivo, encontramos que la razón de uricemias (después de las 20 semanas de gestación/ antes de las 20 semanas de gestación) presenta un alto valor predictivo negativo si es que el resultado es negativo (<1,5) y alta sensibilidad si el mismo da positivo. Nuestros hallazgos sugieren que el ácido úrico es una molécula candidata para el monitoreo de riesgo de este grupo de patologías.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 159 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Furmento, Verónica Alejandra
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2015-03-19

Descripción: Con el propósito de dilucidar las acciones biológicas desencadenadas por la interacción G-CSF:G-CSFR en células trofoblásticas y determinar las vías de transducción de señales que median esas funciones, se utilizó una línea de trofoblastos (Swan 71) derivados de una placenta humana del primer trimestre. Luego de detectar la presencia de receptores para G-CSF en estas células, se determinó que la citoquina no resultó un estímulo proliferativo ni promovió la sobrevida de las células Swan 71. Sin embargo, el G-CSF incrementó los niveles de expresión de la metaloproteinasa-2 (MMP-2), del factor de crecimiento del endotelio vascular (VEGF), de la integrina ?1, y favoreció la aparición de un fenotipo migratorio. Por otra parte, se comprobó que el G-CSF activó las cascadas de transducción de señales de MAPKs ERK1/2 y p38, de PI3K/Akt y de NF-?B/I?B. Mediante el uso de inhibidores farmacológicos específicos y de mutantes dominantes negativas se determinó que esas vías median algunos de los efectos del G-CSF en las células Swan 71. Además, se observó que las vías MAPK ERK1/2 y PI3K/Akt contribuyen a la activación del factor nuclear ?B, y que PI3K participa como un estímulo ?upstream? en la fosforilación de las MAPKs ERK1/2 y p38. En su conjunto, los resultados obtenidos no sólo permitieron dilucidar el mecanismo de acción del G-CSF en células trofoblásticas, sino también, refuerzan la hipótesis de que el G-CSF, a través de la promoción de la adquisición de un fenotipo trofoblástico migratorio, estaría participando, junto con otros factores de la interfase materno-fetal, en la implantación embrionaria y en el desarrollo placentario.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: unknown  (tamaño kb)  Pag. 168 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Sánchez Villamil, Juana Patricia
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2015-10-08

Temas:   Ciencia de la vida   -  Tiorredoxina   -  Sepsis   -  Corazón   -  Ratas

Descripción: Teniendo en cuenta que la disfunción miocárdica por sepsis es un proceso patológico asociado al estrés oxidativo y nitrosativo, nos propusimos determinar el efecto protector de Trx1 durante la progresión de la enfermedad. Para esto, a ratones con sobreexpresión específica de Trx1 en corazón (Tg-trx1) y sus wildtype (WT) se les realizó ligadura-doble punción cecal o laparotomía. Después de 6, 18 y 24 hs, se evaluó actividad de enzimas antioxidantes y de cadena respiratoria mitocondrial por espectrofotometría; procesos de dinámica y biogénesis mitocondrial por RT-qPCR. Morfología y autofagia por microscopía electrónica y contractilidad cardiaca por técnica de Langendorff. Se observó que Trx1 incrementa la sobrevida. En la sepsis temprana atenúa la caída en la reserva contráctil y en sepsis tardía mantiene un menor nivel oxidativo celular, retrasando el agotamiento de la capacidad antioxidante mitocondrial y la pérdida de la actividad del complejo I mitocondrial. También reduce el porcentaje de mitocondrias con alteraciones morfológicas, la alteración en la dinámica mitocondrial y activa significativamente la biogénesis mitocondrial y la autofagia.Se concluye que Trx1 prolonga la protección redox en la disfunción miocárdica por sepsis, preservando la reserva contráctil, limitando el daño mitocondrial y activando mecanismos de recuperación mitocondrial, incrementando así la sobrevida.
...ver más

Tipo de documento: tesis doctoral  | Formato: PDF  (tamaño kb)  Pag. 144 p.

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ver registro completo  | Descargar texto  |  Cita bibliográfica | 


Arriola Benítez, Paula Constanza
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
2017-03-13

Descripción: La brucelosis es una zoonosis de distribución mundial causada por bacterias del género Brucella. La afección hepática es una manifestación frecuente en los pacientes con brucelosis; sin embargo, los mecanismos implicados en el daño hepático no han sido dilucidados. El objetivo general del presente trabajo fue determinar cuáles son los mecanismos implicados en el daño hepático y en la modulación de la respuesta inmune desarrollada en el hígado frente a la infección por Brucella abortus. Los resultados obtenidos demostraron que B. abortus es capaz de invadir y multiplicarse en las células hepáticas estrelladas humanas (LX-2) y que las activa e induce la adquisición de un fenotipo fibrogénico, caracterizado por la deposición de colágeno y la inhibición de la actividad de la metaloproteasa de matri