2019noviembre
Muñiz, Javier Andrés
2019-11-01

Temas:   Ciencias de la vida   -  Cafeína   -  Cocaína   -  Cerebro   -  Ratón   -  Dopamina

Descripción: Un desafío importante para la investigación es comprender las diferencias neuroadaptativas entre el uso controlado de drogas y la pérdida del control. La cafeína es la droga psicoactiva más popular y también es un adulterante que se encuentra en muchas drogas de abuso. Nuestros resultados muestran que la ingesta de cafeína y cocaína produce sensibilización locomotora y aumento de la astrogliosis en el estriado, corteza prefrontal y motora del ratón después de un tratamiento crónico además de cambios en la expresión génica de receptores de distintos sistemas de neurotransmisión. A nivel de órganos periféricos, los resultados de esta Tesis proporcionan evidencia de hepatotoxicidad y cambios en la expresión de la enzima productora de dopamina y sus receptores, en testículo. Mediante la prueba de condicionamiento de preferencia de lugar (CPP), la combinación de las drogas indujo un cambio de preferencia y un aumento en la locomoción en comparación con la cocaína solamente. El análisis de expresión génica luego de la prueba de CPP reveló un aumento específico en el grupo que recibió la combinación de drogas en genes de expresión temprana en el cerebro, sugiriendo cambios adaptativos inducidos por el contexto asociado a las drogas específico de la combinación cocaína-cafeína.
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Tipo de documento: tesis doctoral | Formato: PDF (tamaño kb.)

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

octubre
Díaz Nebreda, Antonela
2019-10-29

Descripción: La histamina ejerce múltiples acciones mediante sus receptores específicos: rH1-rH4, pertenecientes a la superfamilia de receptores acoplados a proteínas G. Los rH1 y rH2 se coexpresan en muchos tipos celulares y cumplen funciones en la respuesta alérgica inmediata, inflamación, secreción ácida gástrica, neuromodulación y en procesos de proliferación y diferenciación celular. Sus ligandos son ampliamente utilizados para el tratamiento de alergias y acidez gástrica, existiendo un amplio interés en su reposicionamiento para otras patologías. El objetivo de esta tesis consiste en profundizar los mecanismos de regulación cruzada entre rH1 y rH2 inducida por sus ligandos, con el fin de ampliar los conceptos establecidos y aportar nuevas bases para la utilización racional de los ligandos histaminérgicos. Inicialmente, determinamos la participación de GRK2 a través del dominio quinasa en la desensibilización cruzada inducida por agonistas. Asimismo, determinamos que dicha regulación cruzada afecta también la respuesta a los antihistamínicos H1 y H2. Por otro lado, pusimos en evidencia la capacidad de los antihistamínicos de inducir la internalización cruzada de los receptores, responsable de la desensibilización cruzada de los mismos. Nuestros resultados aportan nuevos conceptos con respecto a los mecanismos de señalización de rH1 y rH2, importantes a la hora del tratamiento farmacológico con sus ligandos.
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Tipo de documento: tesis doctoral | Formato: PDF (tamaño kb.)

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septiembre
Agudelo, Ignacio Jorge
2019-09-06

Descripción: Baccharis spicata (Lam.) Baill (Asteraceae) es empleada como sustituyente de especies medicinales del mismo género conocidas como ?carquejas?, aunque la evidencia científica disponible en la actualidad es escasa en cuanto a sus parámetros de eficacia, seguridad y calidad. El objetivo de este trabajo fue conocer la proporción de B. spicata presente en muestras comerciales de ?carqueja?, conocer el momento óptimo de cosecha para obtener el mayor contenido de metabolitos polifenólicos posible, caracterizar los metabolitos polifenólicos principales y conocer la seguridad toxicogenética y la actividad farmacológica en modelos de patologías hepáticas. Se encontró que B. spicata sustituye a las especies oficiales de ?carqueja? en más de la mitad de las muestras obtenidas en comercios y que el mayor contenido de polifenoles se encuentra en la hoja recolectada en la primavera, la cual contiene ácido 5-cafeoilquínico, ácido 3,5- dicafeoilquínico y rutina como componentes principales. Respecto de las actividades biológicas, la infusión de hojas no indujo daño significativo al material genético determinado en ensayos en células bacterianas y eucariotas. Además, se observó que inhibe la replicación del virus de la hepatitis B en células HepG2.2.15 y que produce un aumento del flujo biliar al ser administrado por vía oral en animales sanos.
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julio
Piñero, Gonzalo Miguel
2019-07-19

Descripción: La degeneración walleriana es un proceso caracterizado por la degeneración axonal y la desmielinización, que puede ser utilizado como un modelo de lesión extremadamente útil y sencillo para comprender la fisiopatología de enfermedades neurodegenerativas, inflamatorias y traumáticas del sistema nervioso periférico. La lesión induce la fragmentación del axón distal y, como consecuencia de la pérdida de contacto entre las neuronas y las células de Schwann (CS), se inicia la degradación de la mielina. Adicionalmente, las CS proliferan y adquieren un fenotipo activado, desencadenando la respuesta inflamatoria local. En conjunto con los fibroblastos, promueven el arribo de macrófagos hematógenos. Transcurridas 72 horas, los macrófagos se convierten en la población leucocitaria dominante y son quienes completan la remoción de los restos celulares y de mielina, permitiendo entonces la regeneración axonal y la consecuente remielinización. Las células mononucleares de médula ósea (CMMO) incluyen diferentes poblaciones celulares entre las que se encuentran representantes de los linajes monocítico y linfocitario y los precursores endoteliales. Pese a ser una fracción heterogénea contienen una población minoritaria de células multipotentes (células madre mesenquimales), son de fácil obtención y tienen un alto potencial de diferenciación a varios linajes celulares bajo ciertas condiciones del entorno. Es por ello que se han propuesto como estrategia terapéutica en diversas patologías como soporte de la regeneración. Con el objeto de evaluar los efectos benéficos de las CMMO sobre la recuperación estructural y funcional del sistema nervioso periférico, en nuestro laboratorio se utilizaron dos modelos de degeneración walleriana, uno irreversible como la ligación y otro reversible como la compresión del nervio ciático. En ambos modelos experimentales se demostró la migración espontánea de las CMMO endógenas o post trasplante a la zona desmielinizada del nervio ciático, y sus efectos positivos sobre la regeneración axonal y la remielinización. Asimismo, las CMMO demostraron tener efecto analgésico al evitar el desarrollo del dolor neuropático característico de la lesión y promover la recuperación del nervio en términos funcionales. En el presente trabajo se propuso analizar el comportamiento de las CMMO en etapas tempranas y tardías de la lesión, y de este modo ahondar en los mecanismos involucrados en el citado efecto benéfico. Para ello se recurrió al aislamiento de CMMO de ratas genéticamente modificadas para la expresión de la proteína fluorescente verde bajo un promotor constitutivo. Inicialmente se realizó una caracterización de las poblaciones celulares contenidas en las CMMO, y posteriormente se validó la utilización de CMMO aisladas de los animales transgénicos, en términos de su capacidad de migrar, incorporarse al tejido dañado y promover la regeneración axonal, remielinización y recuperación funcional. La expresión de GFP permitió hallar las células trasplantadas por vía sistémica, hasta 60 días luego de la lesión. Algunas de ellas demostraron ser capaces de expresar marcadores ausentes antes del trasplante, es decir, cambios fenotípicos compatibles con un proceso de transdiferenciación a CS. Habiendo observado que una proporción significativamente grande de células abandona el tejido luego de dos a tres semanas de producida la lesión, se propuso dilucidar si la terapia celular tenía un efecto modulador sobre la primera fase, es decir, la respuesta inflamatoria. Para ello, se debió validar el modelo experimental en ratones. Una vez comprobada la reproducibilidad del mismo, se recurrió a la técnica de qPCR para evaluar cambios en la expresión de los ARNm de las principales citoquinas y enzimas involucradas. Posteriormente, a través de citometría de flujo multiparamétrica, se Resumen Resumen 13 analizó el fenotipo de los macrófagos en la zona distal a la lesión. En conjunto, los resultados mostraron que las células de médula ósea disminuyen la expresión de ciertos marcadores proinflamatorios y anticipan la expresión de marcadores antiinflamatorios. La búsqueda de nuevas estrategias farmacológicas que aceleren la recuperación del nervio lesionado, y su aplicación en terapias combinadas, también es parte de los intereses de nuestro grupo. Por ello, se inició un estudio focalizado en los efectos del litio en CS aisladas, y en sistemas de co-cultivos con neuronas embrionarias. Se evaluaron los cambios morfológicos, la supervivencia, proliferación y diferenciación de las CS. Los resultados mostraron que el litio per se no fue capaz de promover la proliferación y diferenciación de las CS en cultivo y, cuando se administró junto con señales inductivas de dichos procesos, también evitó el reingreso en el ciclo celular y la expresión de marcadores específicos de CS diferenciadas. La acción antagónica del litio demostró ser reversible y específica. En ensayos de co-cultivo, impidió la formación de mielina sin afectar la capacidad de las CS para interactuar con los axones o sintetizar los componentes de la lámina basal. Llamativamente, el tratamiento con litio no indujo la degradación de la mielina preformada o la desdiferenciación de las CS. La capacidad del litio para impedir la transición hacia un fenotipo mielinizante, proporcionó una forma única de interferir farmacológicamente con el inicio de la mielinización. Considerando la reversibilidad de la acción y su reconocida capacidad inductora de los procesos autofágicos, se iniciaron estudios para evaluar su efectividad in vivo, y así maximizar la eficiencia de la reparación del tejido nervioso y la remielinización de las CMMO. Hasta el momento, la administración oral de litio, combinada o no con el trasplante por vía sistémica de CMMO, no demostró tener efectos benéficos notorios sobre la recuperación estructural y funcional del nervio dañado.
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Cadena, María Vanesa
2019-07-05

Temas:   Ciencias de la vida   -  Neuroinflamación   -  Astrocitos   -  IsquemIa cerebral   -  Inmunidad innata   -  DAMP   -  PAMP

Descripción: Las células de la glía, específicamente astrocitos y microgliocitos, han demostrado tener un papel central en la respuesta inmune innata luego de la injuria aguda cerebral. En particular los astrocitos pueden sufrir una polarización proinflamatoria al fenotipo A1 que produce neurodegeneración y este proceso depende de la actividad de receptores tipo Toll. TREM-2 es un receptor de la inmunidad innata que es regulador negativo de la actividad proinflamatoria mediada por receptores tipo Toll. En este trabajo estudiamos la participación de TREM-2 en la modulación de la conversión astroglial hacia el fenotipo proinflamatorio que induce neurodegeneración. Pudimos establecer que TREM-2 aumenta su expresión en astrocitos y microglía luego de inducida la isquemia cerebral in vivo o bien luego de una exposición a OGD in vitro. Activadores de la señalización de TLR-4 también inducen la expresión de TREM-2 en células gliales; y DAP12 está presente en estas células para poder señalizar. Utilizando distintos paradigmas de ganancia y pérdida de función, demostramos un rol anti-inflamatorio para TREM-2 en células gliales, de acuerdo con la función propuesta para TREM-2 en otros tipos de células inmuno-competentes. Proponemos que TREM-2 participa en la modulación de la conversión glial al fenotipo proinflamatorio-neurodegenerativo mediante la reducción de la actividad de la vía de NF-?B, lo cual podría ser explorado para el desarrollo de estrategias de reducción endógena de la neuroinflamación luego de la isquemia cerebral. Nuestros resultados también evidenciaron que la cooperación entre los astrocitos y la microglía parece ser crucial para la respuesta inmune innata en el daño agudo cerebral.
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junio
Cerezo, Julieta
2019-06-25

Descripción: En la presente tesis, se desarrolló una plataforma integrada para la producción y purificación eficiente y de bajo costo de antígenos recombinantes de aplicación en kits de diagnóstico. Se evaluó la expresión de los dominios III de los cuatro serotipos y consenso de la proteína E del virus del dengue fusionados a la Hidrofobina I de Trichoderma reesei, utilizando diferentes sistemas de expresión. Entre los sistemas de expresión evaluados, las proteínas recombinantes fueron expresadas mediante el sistema de baculovirus en células de insecto y en larvas de la especie Rachiplusia nu. En la levadura Pichia pastoris se expresaron las proteínas recombinantes, salvo la proteína del dominio III serotipo 2. Las proteínas recombinantes fueron purificadas mediante sistemas de dos fases acuosas (ATPS) utilizando Tritón X-114 al 2%. El sistema de ATPS fue aplicado satisfactoriamente para la remoción de producto in situ del cultivo de Pichia pastoris. Los antígenos fueron utilizados para el desarrollo de un kit diagnóstico para la detección de inmunoglobulinas IgG anti-dengue en el suero de pacientes. La inmunogenicidad de los antígenos recombinantes se estudió en ratones, como modelo animal. La tesis, presenta avances y sienta bases para continuar la investigación de estrategias integradas para la obtención de antígenos con aplicación en kits diagnósticos y potenciales antígenos vacunales para dengue y otras enfermedades infecciosas.
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mayo
Ferragut, Fátima Eneida del Valle
2019-05-30

Descripción: Galectina-8 (Gal-8) es una lectina que reconoce ?-galactósidos, que al ser secretada funciona como una proteína de matriz extracelular. Previamente, nuestro grupo de investigación demostró que ALCAM (CD166) es un ligando de Gal-8. En esta tesis, postulamos que las uniones heterofílicas Gal-8 - ALCAM en la superficie de las células tumorales mamarias humanas triple negativas MDA-MB-231 favorecen la adhesión y migración celular. Nuestro objetivo se focalizó en estudiar roles tumorigénicos de Gal-8 y ALCAM en modelos ?in vitro? e ?in vivo?. En tejido mamario humano, Gal-8 y ALCAM resultaron co-expresadas, y ALCAM aumentó en el citoplasma con la progresión tumoral. La interacción Gal-8 - ALCAM en la superficie celular favoreció la adhesión y migración. El silenciamiento de Gal-8 o de ALCAM disminuyó la adhesión intercelular. ALCAM exhibió efectos de inhibición de la apoptosis, facilitando la formación de colonias y esferoides. El silenciamiento dual de Gal-8 y ALCAM retrasó el crecimiento tumoral en un modelo murino tumoral triple negativo. Estudios del perfil de N-glicosilación de ALCAM mostraron abundantes estructuras permisivas para unir Gal-8. A su vez, la sialilación celular y de ALCAM inhibieron la adhesión a Gal-8. Concluyendo, hemos demostrado roles importantes del eje Gal-8/ALCAM en la progresión del carcinoma mamario triple negativo.
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Paván, Carlos Humberto
2019-05-10

Descripción: El receptor nicotínico es un receptor ionotrópico de la superfamilia de canales iónicos gatillados por ligando, ampliamente distribuido en la naturaleza. En los mamíferos el subtipo neuronal está presente en las sinapsis colinérgicas del sistema nervioso central y del periférico mientras que el subtipo muscular se encuentra en la placa neuromuscular. Las alteraciones del receptor nicotínico ocasionan una amplia variedad de patologías: miastenia gravis, enfermedad de Alzheimer, epilepsia, etc. Actualmente no se dispone de drogas con propiedades de modulación alostérica sobre este receptor útiles en tratamientos farmacológicos. El presente trabajo estudia su interacción con un ligando que tiene propiedades de modulador alostérico para el receptor nicotínico, denominado AC4-ASA; para ello, se utilizó la estrategia de marcación por fotoafinidad seguida de espectrometría de masas; complementariamente, se modeló su interacción mediante docking molecular. Se encontró que el AC4-ASA se une a un sitio en la interfase ?/?, a dos en la ?/? y a otros dos sitios sobre ?, de modo que el ligando posee más de un sitio de interacción y se confirma su capacidad de unión al sitio ortostérico. Del análisis de los sitios de unión se propone un mecanismo de modulación de la afinidad por la nicotina.
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Reca, Alejandra
2019-05-03

Temas:   Ciencias de la vida   -  Citotrofoblasto   -  AQP   -  Cav-1   -  Aquaporinas   -  Caveolina   -  Placenta

Descripción: La placenta humana es un tejido normal; sin embargo, las células del citotrofoblasto extravelloso (CEV) comparten varias características con las células tumorales. Adicionalmente, las acuaporinas (AQPs) y Cav-1 modulan la migración e invasión durante el desarrollo tumoral y se encuentran alteradas en patologías del embarazo. HIPÓTESIS: Las AQPs y Cav-1 participan en la migración e invasión del trofoblasto duranteel desarrollode la placentay alteraciones en su funcionalidad conducen a desórdenes gestacionales caracterizados por una placentación defectuosa. MATERIALES Y MÉTODOS: Líneas celulares: Swan 71 (CEV) y EA.hy926 (endotelial). Ensayos de migración e invasión celular: cicatrización de herida, invasión sobre insertos pretratados con matriz extracelular y zimografía. Angiogénesis: ensayo de tubulogénesis. RESULTADOS: El silenciamiento de AQP3 mediado por siRNA y la disrupción de caveolas mediada por metil-?-ciclodextrina redujeron la migración del CEV. La invasión celular solo disminuyó significativamente luego del bloqueo simultaneo de todas las isoformas de AQPs, acompañada de una actividad reducida de MMP-2. La disrupción de caveolasaumentó significativamente la angiogénesis del CEV y de células endoteliales. DISCUSIÓN: Una expresión anómala de AQPs, en particular de AQP3, y una reducción del número de caveolas/Cav-1 originarían alteraciones durante la formación temprana de la placenta y podrían estar asociadas a distintas patologías, como la preeclampsia o la restricción del crecimiento intrauterino.
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abril
Fernández, Andrea Giselle
2019-04-04

Temas:   Ciencias de la vida   -  Brucella   -  Trofoblastos   -  Aborto   -  Fagositos

Descripción: Brucella spp. produce aborto en diferentes huéspedes, y aunque los mecanismos fisiopatológicos involucrados se desconocen, es sabido que los trofoblastos son blanco de la infección con esta bacteria y que se rodean de infiltrado inflamatorio. Con el objetivo de caracterizar la respuesta inmune placentaria y evaluar el rol que cumplen trofoblastos, macrófagos, neutrófilos y células endometriales durante la infección, se infectaron células humanas y caninas con B. abortus y B. canis, respectivamente. Así, demostramos que Brucella spp. es capaz de replicar en células trofoblásticas generando una respuesta proinflamatoria mediada por IL-8/CXCL8, IL-6, MCP-1/CCL2 y/o RANTES/CCL5, la cual es potenciada por IL-1? y TNF-? secretados por fagocitos infectados. El aumento de quimioquinas favorecería el infiltrado inflamatorio, y la interacción entre las células placentarias y los fagocitos, todos ellos susceptibles a la infección con Brucella spp., potencia el aumento de citoquinas proinflamatorias y metaloproteinasas (MMP-2 y MMP-9) con la capacidad de generar daño placentario mediante apoptosis del trofoblasto y debilitamiento de las membranas fetales. Globalmente, estos mecanismos podrían provocar la pérdida de la tolerancia en la interfase materno-fetal y el desencadenamiento del aborto en huéspedes preñados infectados con Brucella spp.
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marzo
Rial, Marcela Silvina
2019-03-26

Descripción: Estudiamos el efecto de bajas dosis de BNZ en diferentes modelos de ratones con infección crónica por Trypanosoma cruzi Nicaragua, con dos esquemas de administración de BNZ, continua e intermitente y combinado con ALO. El objetivo fue reducir la dosis total de droga administrada sin perder la eficacia. Observamos reducción de la parasitemia por qPCR, la serología por ELISA y del daño miocárdico por histopatología y electrocardiografía. Además, evaluamos el efecto de nuevas nanoformulaciones de BNZ que no fueron tóxicas para las células ni generaron hemolisis, lograron lisar tripomastigotes, inhibieron el crecimiento de amastigotes intracelulares y produjeron ROS en células Vero. En ratones con infección aguda y crónica las BNZ-nps lograron un 100% de sobrevida, redujeron la carga parasitaria a niveles indetectables y disminuyeron significativamente los niveles de anticuerpos específicos para T. cruzi. Los electrocardiogramas mostraron la normalización de las alteraciones de conducción, los niveles de inflamación del tejido cardíaco se redujeron y se inhibió la progresión de la fibrosis. Por lo tanto, el tratamiento intermitente podría considerarse un esquema con menor acumulación de droga e igualmente efectivo sobre la patología cardiaca, y las BNZ-nps podrían reducir la frecuencia de administración y los efectos no deseados evidenciados en pacientes.
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Ogonowski, Natalia Soledad
2019-03-21

Descripción: Mostramos en ratas de diferentes edades que las hormonas tiroideas (HT) modularían la actividad marcapasos mediante el sistema del óxido nítrico (NO) auricular, dicha regulación se llevaría a cabo mediante la vía del Akt sólo a edades perinatales. El hipertiroidismo incrementó la producción de NO ventricular, independiente de la vía Akt. Este incremento se acompañó de un remodelado cardíaco que fue diferente dependiendo del género y la edad. Por otro lado, las acciones de las HT sobre la actividad de la mtNOS dependen de la edad en la cual el desorden tiroide se instaura. Los cambios en la biodisponibilidad del NO mitocondrial modificarían la producción de ATP, y en consecuencia la actividad marcapasos y la función contráctil del miocardio. Estas acciones no estarían mediadas por la vía del Akt. Durante el estado hipovolémico, la hipotensión inmediata observada tempranamente fue independiente del sistema del NO y del estado tiroideo, pero dependiente de la edad. En la fase más tardía post-hemorragia el NO podría modular la presión arterial. La biodisponibilidad de NO indujo una activación dinámica y heterogénea de las isoformas de la NOS, independiente del estado tiroideo y de la edad.
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Barbero, Gastón Alexis
2019-03-20

Temas:   Ciencias de la vida   -  Melanoma   -  Wnt5a   -  NF-kB   -  Citoquinas   -  Cross-talk   -  Melanoma   -  Wnt5a   -  NF-kB   -  Cytokines   -  Cross-talk

Descripción: El ligando Wnt5a se encuentra sobre-expresado en melanoma y posee un rol en la motilidad, invasión y metástasis de estas células. Nuestros resultados indican que Wnt5a activa la vía de NF-kB, promoviendo la fosforilación y traslocación nuclear de p65, la fosforilación del complejo IKK y la degradación de IkBa. Este proceso es dependiente de ROR1 y Dvl2, miembros de la vía Wnt, y de TRAF2 y NIK, componentes de la vía NF-kB. Esta respuesta requiere de Akt y su inhibición impide la activación de p65. No obstante, en la línea SK-Mel 28, Akt es dispensable y la respuesta es mediada por PKCo y GSK3b. También demostramos que mediante un circuito autócrino Wnt5a regula la expresión y actividad basal de NF-kB. Finalmente, Wnt5a aumenta la actividad transcripcional de NF-kB y promueve la liberación de citoquinas pro-inflamatorias. En suma, demostramos un nuevo rol de Wnt5a en cáncer, que gracias a la activación de NF-kB, promueve la síntesis de citoquinas inflamatorias y contribuiría a crear el entorno inflamatorio e inmunosupresor que permite a las células de melanoma evadir la respuesta inmune del paciente en el microambiente tumoral. Estos resultados refuerzan la caracterización de Wnt5a como un nuevo y promisorio blanco terapéutico en melanoma.
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Rasente, Rita Yanina
2019-03-19

Descripción: La ateroesclerosis es una enfermedad inflamatoria crónica compleja producida por la interacción entre múltiples factores genéticos y distintos estímulos externos. El programa de activación y disfunción del endotelio vascular es una de las principales conexiones entre la exposición a los factores de riesgo y el desarrollo de la ateroesclerosis. Las modificaciones cualitativas y cuantitativas de los componentes de la matriz extracelular vascular (MECv) son una manifestación temprana de la activación endotelial. Particularmente, han sido descriptas modificaciones en el patrón de sulfatación y elongación de las cadenas de los glicosaminoglicanos condroitín sulfato y dermatán sulfato, en la aterogénesis. Los complejos de polielectrolitos (PECs) que incluyan glicosaminoglicanos en su formulación podrían utilizarse para diagnosticar y tratar la enfermedad vascular. Los resultados obtenidos en esta tesis muestran que el dermatán sulfato de bajo peso molecular (LMMDS) modula los eventos tempranos de la angiogénesis, estimulando la proliferación celular, el remodelado de la MECv y la migración celular, en un microambiente no inflamatorio. Además, esta tesis demuestra que la gelificación ionotrópica entre los polímeros LMMDS y quitosano permite obtener PECs nanométricos estables. Este sistema ofrece una combinación única de características biológicas, tales como la unión a las células endoteliales en cultivo y la consecuente modulación de las etapas tempranas de la angiogénesis. Los PECs con LMMDS constituyen una novedosa plataforma hacia la implementación de nuevas estrategias de prevención, diagnóstico y tratamiento de un gran número de enfermedades cardiovasculares.
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Sánchez Fernández, Candelaria
2019-03-18

Temas:   Ciencia de la vida   -  Virus Papiloma   -  Primates no humanos   -  Filogenia   -  PVs   -  Platirrinos   -  Nordeste

Descripción: El objetivo de esta Tesis fue estudiar la ocurrencia de infección de Virus Papiloma (PVs) en primates no humanos (Platirrinos) del nordeste argentino y proponer los posibles escenarios implicados en la evolución y dispersión de estos virus en el linaje de los primates. Resultados: Se identificaron dos nuevos PVs del Género-Gamma en las especies A. caraya y S. nigritus (denominados AcPV1 y SnPV1 respectivamente). El origen y emergencia de estos PVs se estimó 32.395.860 años y ofrece un marco temporal factible para la radiación adaptativa en los Platirrinos. Sin embargo, la hipótesis de coespeciación fue cuestionada, fundamentalmente debido a la falta de congruencia entre las topologías de los árboles hospedador/huésped. En particular, el análisis de reconciliación filogenética indicó que los eventos de duplicación y la duplicación con cambio de hospedador fueron los eventos más frecuentes (46.5% y 34.8% respectivamente) mientras que los procesos de coespeciación y pérdida o extinción del virus en un linaje fueron menos frecuentes (alrededor del 10% cada uno). Este estudio representa el primer reporte de infección por PVs en platirrinos de Argentina, amplía el rango de huéspedes descripto para estos virus y propone nuevos escenarios para evaluar el origen y emergencia viral.
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Sanabria, Daiana Jimena
2019-03-15

Descripción: La población de la provincia de Misiones es resultado de un proceso de miscegenación que involucró indígenas de la familia lingüística Tupí Guaraní, conquistadores españoles del siglo XVI e Inmigrantes de diversos lugares de Europa (SXX); además su posición geográfica también ha favorecido la migración fronteriza, tanto de Brasil como de Paraguay. Actualmente, las comunidades Guaraníes se concentran en pequeños asentamientos asociados al remanente de selva, mientras que la población mestiza habita regiones urbanas y rurales. Esta situación supone un escenario único para estudios de Antropología y Epidemiología. El ADN mitocondrial es un marcador genético ampliamente utilizado para la determinar la ancestralidad de las poblaciones en estudios de Antropología Molecular. La secuenciación de la región hipervariable del ADNmt ha permitido clasificar al mismo en 3 grandes linajes de origen asiático-americano, europeo y africano. El estudio de su frecuencia, distribución y evolución ha permitido comprender los patrones migratorios y el poblamiento antiguo y contemporáneo. Además, los virus JCV y HPV también han sido propuestos como modelos adecuados para estudios de Antropología, reconociéndose genotipos africanos, europeos, asiáticos y amerindios. El estudio del origen y dispersión de los virus que infectan a las poblaciones humanas resulta útil para comprender la historia demográfica de los mismos como así también la historia evolutiva de las poblaciones hospedadoras. Por lo tanto, el objetivo de este estudio fue realizar un aporte desde la genética a la historia del poblamiento de Misiones, mediante el análisis de un marcador genético humano y dos marcadores genéticos virales. Con este fin se realizó la caracterización genética de la población a través del ADN mitocondrial, como así también la determinación de las variantes circulantes de HPV-16 y de JCV presentes en población urbana de Misiones. Se realizaron muestreos en 3 zonas geográficas de la provincia (sur, centro y norte). Los análisis moleculares se realizaron sobre el ADN total extraído a partir de estas muestras. Los linajes mitocondriales fueron determinados por amplificación de la región HV-I del ADNmt con posterior secuenciación. La caracterización genética del Poliomavirus JC, estuvo determinada por la amplificación del gen VP1 (proteína mayor de la cápside) y posterior análisis filogenético con secuencias disponibles en Genbank para determinar el origen geográfico de los tipos circulantes en la provincia de Misiones. Respecto a la caracterización de variantes circulantes de HPV-16, la misma se realizó a través de la amplificación y secuenciación del gen L1 (proteína mayor de la cápside);posteriormente se realizó un análisis con la herramienta online Blast para asignar la variante geográfica correspondiente a cada secuencia. Además, se llevaron a cabo análisis estadísticos de estructura genética poblacional mediante análisis de varianza molecular, análisis bayesianos para datar el Ancestro Común Más Reciente de cada set de datos, sus reconstrucciones demográficas y finalmente un análisis de Redes para evidenciar procesos demográficos asociados a cada marcador en la población. La historia del poblamiento de la provincia de Misiones se ve reflejada en los patrones genéticos arrojados por el ADNmt. Los 3 grandes linajes: asiático-americano, europeo y africano, están presentes en el pool génico de su población actual. Además, los marcadores genéticos virales también reflejaron los procesos demográficos propios de la provincia. En un contexto histórico, HPV-16 podría interpretarse como una fuerte irrupción del virus durante la colonización española (Siglo XVI) y/o la inmigración europea del Siglo XIX-XX. Por otra parte, la coexistencia de variantes introducidas y autóctonas de JCV en la población, refleja el perfil tri-híbrido de los procesos de poblamiento de Misiones, incluyendo nativos americanos (Guaraníes), inmigrantes europeos y migrantes fronterizos de Paraguay y Brasil. Estos resultados aportan nuevas perspectivas sobre el origen y composición genética de la población de Misiones, y las corrientes migratorias implicadas en el establecimiento de su población actual.
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Perdicaro, Diahann Jeanette
2019-03-13

Temas:   Ciencia de la vida   -  Polifenoles   -  Adipogénesis   -  Angiogénesis   -  Uva   -  Fruta

Descripción: La obesidad se asocia con hipertrofia de los adipocitos, adipogénesis interrumpida e inflamación crónica de bajo grado. El aumento de la adiposidad principalmente de tipo visceral está asociado al desarrollo y progresión de las complicaciones metabólicas y vasculares. La alteración en la diferenciación normal de los adipocitos se atribuye al reclutamiento de macrófagos y liberación aumentada de citoquinas pro-inflamatorias en el tejido adiposo (TA). Los polifenoles son compuestos bioactivos de orígen vegetal que han demostrado poseer potenciales efectos benéficos en la salud, entre ellos efectos anti-inflamatorio. Nuestra hipótesis plantea que la intervención con polifenoles provenientes del orujo de uva (GP) atenúa alteraciones metabólicas y vasculares asociadas al síndrome metabólico (SM), y la adiposidad e inflamación del TA, en parte estimulando su expansión. Se observó que el GP, mitigó alteraciones metabólicas y previno la incidencia y severidad de arritmias en un modelo experimental de SM. Por otro lado, el extracto de orujo y el flavonoide quercetina estimularon la expresión de proteínas involucradas en la adipogénesis y angiogénesis del TA asociado a una disminución de la inflamación. Nuestros resultados resaltan la utilización de compuestos bioactivos del GP para la prevención/atenuación de patologías asociadas al aumento de adiposidad.
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Tipo de documento: tesis doctoral | Formato: PDF (tamaño kb.)

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Martin, Ayelen
2019-03-12

Descripción: El objetivo del presente trabajo de tesis fue caracterizar el papel del sistema de los IGFs en diferentes etapas del proceso tumoral en dos modelos de importancia en pediatría: el feocromocitoma, relacionado con enfermedad endócrina familiar y los gliomas, que son los tumores sólidos más frecuentes en los niños. Nuestros resultados in vitro e in vivo demuestran que en etapas tempranas del establecimiento tumoral la deficiencia del IGF-1R en células del microambiente tumoral determina la disminución de factores solubles y componentes de la matriz extracelular importantes para la supervivencia del feocromocitoma. Utilizando muestras de pacientes, demostramos una mayor expresión de IGF-1 en gliomas de alto grado, remarcando la importancia del circuito IGF1R/IGF1 en estos tumores. La caracterización in vitro de la localización diferencial del IGF-1R demostró que su localización nuclear podría contribuir a un fenotipo más agresivo de las células de glioblastoma incrementando su motilidad y metabolismo. Esto se manifestó in vivo en la aparición más temprana de tumores de crecimiento más rápido. Finalmente, la realización de un trabajo de tesis de estas características permitió la articulación entre grupos de investigación básica y clínica, consolidando de esta forma el objetivo de investigación básica traslacional.
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Tipo de documento: tesis doctoral | Formato: PDF (tamaño kb.)

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Caldirola, María Soledad
2019-03-11

Descripción: Las inmunodeficiencias primarias (IDP) son enfermedades congénitas de presentación clínica heterogénea y representan trastornos hereditarios causados por mutaciones que afectan el desarrollo y/o función de diversos compartimentos del sistema inmune, que predisponen a los pacientes a infecciones, autoinmunidad, alergia y cáncer. Al día de la fecha se han descripto más de 300 genes responsables de diversas IDP. En las IDP con disregulación inmune, los mecanismos normales para mantener la homeostasis de la respuesta inmune fallan y conducen a una respuesta inapropiada (por falta o exceso), acompañada de daño a las células del huésped. En este trabajo de Tesis de Doctorado se realizó la caracterización fenotípica y funcional de subpoblaciones de células mononucleares de sangre periférica de pacientes con mutaciones en CD25, STAT5b, STAT1 y STAT3 que cursan con síndromes disregulatorios. Este estudio nos ha permitido revelar el rol crítico del eje IL-2/CD25/STAT5b en la maduración de las células NK y en la regulación de la respuesta mediadad por anticuerpos a través de efectos sobre células T helper foliculares (Tfh) y su consiguiente impacto sobre la diferenciación de los linfocitos B (LB) con cambio de isotipo y células plasmáticas, lo que impacta en la disregulación del centro germinal (CG) y síntesis de autoanticuerpos. Por ello, STAT5b juega también un papel crucial en la respuesta inmune humoral y el mantenimiento de la tolerancia del sistema inmune. En resumen, empleando muestras de sangre periférica de pacientes con IDP hemos elucidado nuevos circuitos regulatorios en el sistema inmune humano, confirmando el hecho de que estos pacientes constituyen ?modelos naturales? que brindan una excelente oportunidad para elucidar mecanismos todavía desconocidos del sistema inmune humano.
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Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

Thomas, Laura
2019-03-08

Descripción: Galectina-3 (Gal-3), una proteína de unión a ?-galactósidos perteneciente a la familia de las lectinas, favorece la diferenciación de los oligodendrocitos (OLG), células formadoras de mielina en el sistema nervioso central, y la mielinización, a través de mecanismos aún no elucidados. En la presente tesis doctoral optimizamos la obtención y purificación de una Gal-3 recombinante funcional, con la cual demostramos que OLG tratados con rGal-3 muestran una diferenciación acelerada, evidenciada por un aumento de las células maduras en detrimento de las inmaduras y una dinámica acelerada del citoesqueleto a través de los cambios característicos en la polimerización de actina. Dichos cambios fueron consecuencia de la influencia de rGal-3 sobre las vías de señalización de Akt/mTOR, Erk 1/2 y ?-catenina. Además, nuestros estudios lograron identificar la ventana temporal de acción de rGal-3, resultando los OPC y los pre-OLG su blanco principal de acción para promover la diferenciación oligodendroglial. Seguidamente, nuestros resultados nos permitieron reconocer una variedad de moléculas a las cuales rGal-3 se une para ejercer su acción pro-diferenciante. Por último, la evaluación de la calidad de la mielina nos permitió determinar que los OLG diferenciados en presencia de rGal-3 son capaces de envainar correctamente tanto fibras sintéticas como a axones.
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Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica

febrero
Duette, Gabriel
2019-02-28

Temas:   Ciencias de la vida   -  VIH-1   -  HIF-1a   -  Linfocitos T CD4+   -  Vesículas   -  Extracelulares   -  Inflamación

Descripción: La activación inmune crónica y la inflamación son características de la infección por VIH-1 y una de las principales causas de eventos graves no relacionados con el SIDA en personas infectadas bajo tratamiento antirretroviral (TAR). En este trabajo de tesis, presentamos evidencias de que el ADN citosólico (ADNc) producido durante el ciclo de replicación del VIH-1 en células T CD4+ infectadas aumenta la actividad del Factor Inducible por Hipoxia 1 alfa (HIF-1?) que, a su vez, promueve la replicación viral. Además, demostramos que la inducción de HIF-1? promueve la liberación de vesículas extracelulares (VE) proinflamatorias. Estas VE fomentan la inflamación al inducir la secreción de interferón-? por parte de linfocitos T CD4+ y de IL-6 e IL-1? por macrófagos a través de una vía dependiente de HIF-1?. Cabe resaltar que las VE obtenidas del plasma de individuos infectados con VIH-1 también inducen la actividad de HIF-1? e inflamación en macrófagos. En conclusión, este estudio demuestra que HIF-1? juega un papel crucial en la patogénesis del VIH-1 al promover la replicación viral y la liberación de VE que orquestan respuestas inflamatorias mediadas por linfocitos y macrófagos.
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Tipo de documento: tesis doctoral | Formato: unknown (tamaño kb.)

Aporte: Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica