Director(a):
Rawe, Vanesa
Jurado:
Mendeluk, Gabriela - Cohen, Débora - Palaoro, Luis
Institución otorgante:
Universidad de Buenos Aires.   Facultad de Farmacia y Bioquímica
Facultad de Ciencias Exactas y Naturales - Facultad de Medicina
Fecha de la defensa:
2016-04-22
Tipo de documento:
tesis de maestría - info:eu-repo/semantics/acceptedVersion
Grado alcanzado:
Magíster de la Universidad de Buenos Aires en Biología Molecular Médica 
Editor:
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
Formato:
application/pdf  |   kb.   |  61 p.
Idioma:
español
Area Temática:
Descripción:
Existen numerosas evidencias que la criopreservación de espermatozoides en humanos altera parámetros básicos de su fisiología natural, además de esto puede existir un daño que compromete su integridad nuclear. Esto implica una disminución de la viabilidad y a la vez de su capacidad para fecundar pudiendo limitar su uso en técnicas reproductivas. El presente estudio busca evaluar si ocurre daño en el núcleo espermático luego de la criopreservación de las células sexuales provenientes de hombres que no consultan por infertilidad. Se utilizaron 44 muestras provenientes de hombres sanos y menores de 40 años, candidatos al programa de donación de esperma de un banco de semen en la República Argentina. Se realizó un espermograma básico inicial para cada muestra y se midió la compactación nuclear mediante AA y CMA3. Posteriormente se someten las muestras a congelación lenta en nitrógeno líquido y luego son descongeladas para su posterior evaluación. El impacto en la integridad nuclear fue medido mediante TUNEL para evidenciar fragmentación del ADN en tres momentos distintos: antes de la congelación, posterior a la descongelación y posterior a la descongelación sometiendo la muestra a un gradiente de selección. Los datos evidenciaron una distribución normal y se evaluaron mediante el programa estadístico SPSS. Los resultados obtenidos evidencian que la criopreservación tiene un efecto deletéreo y significativo en la integridad nuclear de espermatozoides de hombres jóvenes y sanos, destacando a su vez la importancia de una selección espermática posterior a la técnica para disminuir el porcentaje de espermatozoides que han sufrido el impacto a nivel estructural y molecular.
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Abstract:
There is evidence that human sperm cryopreservation altered its natural physiological parameters, however it may induce damage to nuclear integrity. This would result in a decrease of viability and fertilizing ability of sperm samples that would be subsequently used in reproduction techniques. This study aims to assess whether damage occurs in sperm nucleus of men that don´t consult for infertility and their sperm have being exposed to cryopreservation. 44 samples from healthy men under 40 years old that are candidates for a sperm donation program of a sperm bank at the Argentine Republic were used. A basic sperm analysis was performed for each sample and chromatin packaging was assessed with CMA3 and Aniline blue. Samples are subsequently frozen at slow rates in liquid nitrogen and got thawed for further analysis. Nuclear integrity was assessed using TUNEL test, showing evidence of DNA fragmentation at three phases: before freezing, after thawing and after thawing and selected by a sperm separation gradient. Data shows normal distribution and was performed using SPSS software. Results from the current investigation show that cryopreservation induce a deleterious and significant effect at nuclear sperm integrity of healthy and young men, we emphasize on the importance of a sperm selection method after freezing/thawing techniques to reduce the percentage of sperm with structural and molecular injury rates.
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Calificación:
Aprobado
Dictamen:
El trabajo, luego de la corrección, presenta bibliografía actualizada y fue desarrollado en la versión impresa en forma satisfactoria. La presentación oral de la tesis fue buena. La estrategia experimental fue pertinente para los objetivos planteados. Los resultados son los esperados para la técnica de criopreservación pero las conclusiones no se ajustan estrictamente a los resultados obtenidos.
Identificador(es):
http://repositoriouba.sisbi.uba.ar/gsdl/cgi-bin/library.cgi?a=d&c=masteruba&cl=CL1&d=HWA_1678
Filiación Institucional:
Fil: Medina Méndez, Esteban Darío. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Buenos Aires, Argentina
Institución aportante:
Facultad de Farmacia y Bioquímica
Biblioteca cooperante:
Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica
Derechos:
info:eu-repo/semantics/openAccess
http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/2.5/ar/
Licencia de uso:
Licencia Creative Commons

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Cita bibliográfica:

Medina Méndez, Esteban Darío (2016-04-22). Evaluación del daño nuclear en espermatozoides humanos sometidos a criopreservación  (tesis de maestría). Universidad de Buenos Aires.  Facultad de Farmacia y Bioquímica. [consultado:  ] Disponible en el Repositorio Digital Institucional de la Universidad de Buenos Aires:  <http://repositoriouba.sisbi.uba.ar/gsdl/cgi-bin/library.cgi?a=d&c=masteruba&cl=CL1&d=HWA_1678>