Director(a):
Alonso, Cristina N.
Jurado:
Lazarowski, Alberto - Fundia, Ariela - Varela, Viviana
Institución otorgante:
Universidad de Buenos Aires.   Facultad de Farmacia y Bioquímica
Facultad de Ciencias Exactas y Naturales - Facultad de Medicina
Fecha de la defensa:
2015-04-15
Tipo de documento:
tesis de maestría - info:eu-repo/semantics/acceptedVersion
Grado alcanzado:
Magíster de la Universidad de Buenos Aires en Biología Molecular Médica 
Editor:
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
Formato:
application/pdf  |   kb.   |  69 p.
Idioma:
español
Area Temática:
Palabras clave:
NPM1  -  CEBPA  -  Leucemia  -  Pediatría  -  Pronóstico
Descripción:
Introducción: Las mutaciones de NPM1, CEBPA y FLT3 se encuentran en 25-n35% de las LMA de adultos. Estas mutaciones se correlacionan con el pronósticonde la enfermedad, especialmente en LMA con cariotipo normal (CN). Hay pocosninformes sobre la incidencia e importancia de estas mutaciones en LMA pediátricany no hay datos de Argentina.nObjetivo: Describir la incidencia de estas mutaciones y analizar el impacto clínicony pronóstico de las mutaciones en nuestra institución.nPacientes y Métodos: Se analizaron retrospectivamente muestras de 216 niñosncon LMA. La mediana de edad fue de 7,0 años, incluyendo 44 pacientesnmenores a un año. El 15% de los pacientes presentaron CN. La detección denmutaciones NPM1 y CEBPA fueron realizadas por Gene-Scanning; las mutacionesnFLT3-ITD y FLT3-TKD fueron estudiadas por RT-PCR y RFLP, respectivamente.nLos casos positivos se caracterizaron además por secuenciación.nResultados: La incidencia de las mutaciones estudiadas fueron: NPM1mut:4,2%,nCEBPAmut:1,9%, FLT3-ITD:10,2% y FLT3-TKD:7,9%. En LMA con CN fueron:nNPM1mut:24,2%,CEBPAmut:12,1%, FLT3-ITD:15,2% y FLT3-TKD:6,1%. La mediande edad fue:NPM1mut:13,4 años, CEBPAmut:11,6 años,FLT3-ITD:13,8 años y FLT3-nTKD: 8,0 años. NPM1 y CEBPA mostraron asociación significativa con CNn(p<0,00001, p=0,001, respectivamente), mientras que FLT3-ITDse asociónconPML/RARA (p<0,0001). Los subtipos FAB observados con mayor frecuencianfueron: NPM1mut:M2 (p=0,1322), CEBPAmut:M2 (p=0,0281), FLT3-ITD:M3n(p=0,0002) y FLT3-TKD:M5 (p=0,3258). Las edades de los pacientes connResumennPágina 2nNPM1mut, CEBPAmut y FLT3-ITD fueron significativamente mayores (p=0,0001,np=0,0368 y p<0,00001 respectivamente). FLT3-TKD fue la única mutaciónndetectada en 11,4% de los pacientes menores de 1 año.nLas probabilidades de sobrevida libre de eventos (pSLE) y error estándar (EE)nfueron: LMA Total:48,9(3,8)%, NPM1mut:75,0(15,3)%, CEBPAmut:75,0(21,7)%,nFLT3-ITD: 59,6(11,1)%, FLT3-TKD: 46,0(16,2)%y NPM1mut/CEBPAmut/FLT3-nITDneg:80,8(12,2)%(p=0,2002). Las pSLE (SE) de los pacientesnNPM1mut/CEBPAmut/FLT3-ITDneg con CN fue de 78,8(13,4)%(p=0,0593) y en elngrupo de riesgo alto fue de 80,8(12,3)% (p=0,0104).nConclusiones: Este es el primer reporte de las frecuencias de mutacionesnenNPM1, CEBPA y FLT3en LMA pediátrica en nuestro país. Las incidencias denNPM1mut y CEBPAmut fueron significativamente más altas en la LMA con cariotiponnormal. Nuestros datos confirman el pronóstico favorable de LMA con genotiposnNPM1mut/FLT3-ITDneg y/o CEBPAmut/FLT3-ITDneg, apoyando la postulación de estengrupo como un nuevo subtipo de LMA con mejor pronóstico.
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Abstract:
Background: Mutations of NPM1,CEBPA and FLT3 are found in 25 to 35% ofnadult-AML. These mutations correlate with outcome, especially in AML with normalnkaryotype. There are few reports concerning the incidence and significance ofnthese mutations in childhood-AML and there is no data from Argentina.nObjective: To describe the incidence of these mutations and to analyze the clinicalnand prognostic impact in the outcome in our setting.nMethods: Samples from 216 children treated with AML protocols werenretrospectively analyzed. The mean age at diagnosis was 6.8 years,nincluding 44 patients younger than 1 year of age.Fifteen percent/ Of them,n15%/presented a normal karyotype (NK). Detection of NPM1 and CEBPAnmutations was performed by Gene-scanning; FLT3-ITD and FLT3-TKD werenstudied by RT-PCR and RFLP respectively. Positive cases were furtherncharacterized by sequencing analysis.nResults: The incidences of the studied mutations were: NPM1mut: 4.2%,nCEBPAmut: 1.9%, FLT3-ITD: 10.2% and FLT3-TKD: 7.9%. Within the group of AMLnwith NK the incidences were: NPM1mut: 24.2%,CEBPAmut: 12.1%, FLT3-ITD: 15.2%nand FLT3-TKD: 6.1%. The mean age for each subgroup was: NPM1mut: 13.4 years,nCEBPAmut: 11.6 years, FLT3-ITD: 13.8 years and FLT3-TKD: 8.0 years. NPM1 andnCEBPAshowed significant association with NK (p<0.00001 and p=0.001,nrespectively), and FLT3-ITD with PML-RARA (p<0.0001).The most frequentlynobserved FAB subtypes were: NPM1mut: M2 (p=0.1322), CEBPAmut: M2n(p=0.0281), FLT3-ITD: M3 (p=0.0002) and FLT3-TKD: M5 (p=0.3258). The age ofnResumennPágina 4npatients with FLT3-ITDmut, NPM1mut and CEBPAmut were significantly highern(p=0.0001, p=0.0368 y p<0.00001respectively). FLT3-TKD was the only mutationndetected in 11.4% of patients younger than 1 year of age.nThe event-free survival probabilities (pEFS) and standard error (SE) were: TotalnAML: 48.9(3.8)%, NPM1mut: 75.0(15.3)%, CEBPAmut: 75.0(21.7)%, FLT3-ITD:n59.6(11.1)%, FLT3-TKD: 46.0(16.2)% y NPM1mut/CEBPAmut/FLT3-ITDneg:n80.8(12.2)%(p=0.2002). The pEFS (SE) of patients NPM1mut/CEBPAmut/FLT3-nITDneg with normal karyotype was 78.8(13.4)% (p=0.0593) and for the high riskngroup was 80.8(12.3)% (p=0.0104).nConclusions: This is the first report of the frequencies of NPM1, CEBPA and FLT3nmutations in childhood AML in our country. The incidences of NPM1mut andnCEBPAmut were significantly higher in AML with normal karyotype. Our datanconfirm the favorable prognosis of AML with NPM1mut/FLT3-ITDneg and/ornCEBPAmut/FLT3-ITDneg genotypes, supporting the notion that they should benconsidered as a new AML subset with better outcome.
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Calificación:
Sobresaliente (10 Diez puntos)
Dictamen:
El trabajo de tesis fue expuesto en forma concisa y muy clara. La redacción fue clara y con bibliografía actualizada. El trabajo permite avanzar en la caracterización de las leucemias mieloblásticas infantiles y ofrecer un servicio de uso clínico directo en la evaluación diagnóstica y pronóstico de la enfermedad. La presentación oral de la tesis fue excelente y la maestranda defendió con solvencia su trabajo y demostró un conocimiento acabado del tema.
Identificador(es):
http://repositoriouba.sisbi.uba.ar/gsdl/cgi-bin/library.cgi?a=d&c=masteruba&cl=CL1&d=HWA_1129
Filiación Institucional:
Fil: Rubio Longo, Patricia. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica; Argentina
Institución aportante:
Facultad de Farmacia y Bioquímica
Biblioteca cooperante:
Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica
Derechos:
info:eu-repo/semantics/openAccess
http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/2.5/ar/
Licencia de uso:
Licencia Creative Commons

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Cita bibliográfica:

Rubio Longo, Patricia (2015-04-15). Determinación de las mutaciones en los genes NPM1 y CEBPA en leucemia mieloblástica aguda pediátrica mediante PCR y genescanning  (tesis de maestría). Universidad de Buenos Aires.  Facultad de Farmacia y Bioquímica. [consultado:  ] Disponible en el Repositorio Digital Institucional de la Universidad de Buenos Aires:  <http://repositoriouba.sisbi.uba.ar/gsdl/cgi-bin/library.cgi?a=d&c=masteruba&cl=CL1&d=HWA_1129>