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Institución otorgante:
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales
Fecha:
1988
Tipo de documento: 
info:eu-repo/semantics/doctoralThesis
 
Formato:
application/pdf
Idioma:
spa
Descripción:
Se estudió la respuesta inmune humoral y celular en ratones inmunizados con la fracción flagelar (F), F adyuvada con Bordetella pertussis (F-Bp) y microsomal (Mc) de epimastigotes de Trypanosoma cruzi. La respuesta inmune se estudió antes y despues del desafio con 50 tripomastigotes sanguíneos de la cepa Tulahuen. La inmunización con F-Bp, pero no con F, Mc o Bp protegió a los ratones del desafio con el parásito en términos de parasitemia y mortalidad. Antes del desafío los ratones inmunizados con FBp presentaban mayor titulo de anticuerpos específicos que los inmunizados con F o Mc. Los niveles de anticuerpos 17 dpi fueron similares en los tres grupos, mientras que los animales no inmunizados mostraron niveles menores. Durante la infección temprana los animales no inmunizados no presentaron respuesta de hipersensibilidad retardada a antígenos del parasito ni respuesta proliferativa a ConA. Sin embargo, ratones inmunizados con F-Bp mostraron ambas respuestas antes y despues del desafio con T.cruzi. La reacción cutanea es transferida por celulas de bazo de ratones inmunizados con FBp. Los ratones inmunizados con Mc tuvieron la misma reactividd celular especifica e inespecifica que los infectados no inmunizados . Además la transferencia pasiva de celulas linfoides de ratones inmunizados con FBp pero no con F, confirió protección parcial al desafío con 50 parásitos Tulahuen. Por otro lado la transferencia de suero de animales inmunizados con F o FBp no protegió a los ratones del desafío con T.cruzi. Sin embargo los receptores de animales cronicamente infectados resultaron protegidos por la transferencia de suero o de celulas linfoides. La depleción de células B o adherentes del bazo de los cronicamente infectados no eliminó la capacidad de conferir protección. La depleción de distintas subpoblaciones de celulas T, tampoco eliminó la capacidad de transferir resistencia a la infección. Los resultados muestran diferencias entre la respuesta inmune humoral y celular animales protegidos y no protegidos, asi como la presencia de diferentes mecanismos protectivos en animales inmunizados y en los cronicamente infectados. Posteriormente se realizaron experiencias con el objeto de evaluar el papel de diferentes poblaciones linfocitarias en la resistencia a la infección con T.cruzi. Se inyectaron ratones BALB/c y C57B1/6 con anticuerpos monoclonales contra el determinante pan T, Thy1.2; contra el determinante L3T4 de celulas T inductoras o colaboradoras, contra un determinante alotípico presente en la superficie de celulas NK de C57B1/6, NK1.1;o con un antisuero policlonal de conejo contra celulas NK (anti asialo GM-1). El efecto de estos tratamientos in vivo fue confirmado en ensayos funcionales. Los ratones deplecionados de celulas T, Tcolaboradoras o NK presentaron mayor susceptibilidad a la infección que los respectivos controles. Además el tratamiento con anti L3T4 inihibió la formación de anticuerpos anti T. cruzi en los animales inmunizados con antígenos del parásito, es decir que la producción de anticuerpos anti T.cruzi es dependiente de células T colaboradoras. El tratamiento con interferón alfa beta, que estimula la actividad NK, aumenta la resistencia a la infección de los ratones tratados, lo que apoya el papel de celulas NK en la resistencia. Este efecto se logró por la administración de 2500 unidades un día antes, al día y un día después de la infección con 50 parasitos Tulahuen. Demostramos la presencia de celulas T Lyt1.2 positivas que durante la infección temprana producen IL-2, en forma dependiente de la dosis infectiva y sin el agregado de mitógenos o antígenos al medio de cultivo. La presencia de células productoras de IL-2 tuvo lugar con la misma cinética que una fuerte actividad proliferativa "espontanea". Se detectó la expresión del receptor de IL-E en el mismo periodo sobre la superficie de células T,Lyt2.2 negativas. Una notable disminución de la producción de IL-2 y la proliferación celular en respuesta a ConA fue observada entre la segunda y la cuarta semana post-infección. Demostramos que también la expresión de los receptores de IL-2 de alta y baja afinidad se encuentran deprimidas. Esta alterada expresión se confirmó en ensayos funcionales y no se debe a una alteración en la frecuencia de diferentes subpoblaciones linfocitarias, y puede explicar la incapacidad de respuesta de células a ConA aun en presencia de la linfoquina. Se observó que la administración de IL-2 recombinante in vivo, en diferentes vías, y cepas de ratones, adyuvada o no, no condujo a un aumento de resistencia en los animales tratados. La administración de rec-IL-1 tampoco disminuyó la susceptibilidad de los ratones. En contraste con estos datos, la administración de interferón gama recombinante resultó en un descenso de la parasitemia y la mortalidad de los animales tratados. Este efecto es dosis dependiente, y se pudo reproducir por la administración de una sola dosis 24 horas antes de la infección. Se ha demostrado además que celulas de bazo de animales infectados al 21 pi producen factor(es) solubles que inhiben la proliferación celular. Estos factores inhiben la proliferación de diferentes lineas celulares y presentan un peso molecular de 50 y 150 kD. Su producción no depende de la actividad de los productos de la vía de la ciclooxigenasa del ácido araquidónico. La presencia de indometacina en el cultivo tampoco tuvo efecto sobre la respuesta a ConA de células de bazo de ratones al 21 dpi.
Identificador:
http://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n2188_Rottenberg
Derechos:
info:eu-repo/semantics/openAccess
http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/2.5/ar/
Licencia de uso:
Licencia Creative Commons


Cita bibliográfica:

Rottenberg, Martín Enrique  (1988).     Tripanosoma cruzi : regulación de la respuesta inmune durante la infección en un modelo experimental murino.  (info:eu-repo/semantics/doctoralThesis).    Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales.    [consultado:  ] Disponible en el Repositorio Digital Institucional de la Universidad de Buenos Aires:  <http://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n2188_Rottenberg>