Effect of Trolox addition as antioxidant in refrigeration medium in porcine spermatozoa

El objetivo del presente estudio fue analizar el efecto de la adición de Trolox al medio de refrigeración de semen porcino a través de pruebas funcionales, pudiendo así incrementar el conocimiento respecto a los parámetros de calidad y condiciones de refrigeración empleados para optimizar dicho proceso. Un pool de muestras de semen porcino fue diluido en medio Modena modificado, suplementando una parte con 200 µM de Trolox, y posteriormente refrigerado a 17 °C. Al día 1, 2 y 5 de refrigeración se evaluó la motilidad espermática, viabilidad e integridad acrosomal, estado de pre-capacitación, integridad en la función de membrana plasmática y potencial de membrana mitocondrial. En conclusión, la adición de Trolox 200 µM a muestras seminales en la especie porcina produjo un aumento significativo en el porcentaje de gametas con funcionalidad de membrana plasmática conservada en el día 1 y 5 en comparación con las muestras no tratadas. También se observó un incremento en la motilidad progresiva evaluada por microscopía óptica al día 1 en muestras tratadas con respecto a las no tratadas. No se observaron diferencias significativas en la vitalidad, potencial de membrana mitocondrial y patrones de pre-capacitación entre muestras tratadas y no tratadas a lo largo de ese tiempo de refrigeración.

The aim of this study was to analyze the effect of Trolox addition to semen diluents on porcine sperm refrigeration evaluated by functional tests in order to predict their potential fertilization capacity and to increase the knowledge regarding their quality parameters and refrigeration conditions to optimize porcine sperm conservation. A 200 µM Trolox concentration was added to a pool of boar semen samples diluted in Modena modified medium and stored at 17 °C. At days 1, 2 and 5 postrefrigeration, sperm motility, viability and acrosome integrity, pre-capacitation state, plasma membrane function and mitochondrial membrane potential were evaluated. In conclusion, the addition of 200 µM Trolox to seminal samples in the porcine species produced a significant increase in the preservation of plasma membrane functionality at day 1 and 5 compared with untreated samples. An increase in progressive motility evaluated by light microscopy was also observed on day 1 in treated samples compared to untreated samples. No significant differences were observed in vitality, mitochondrial membrane potential and pre-capacitation patterns between treated and untreated samples throughout the refrigeration time.