Director(a):
Schwarzbaum, Pablo Julio
Co-Director(a):
Espelt, María Victoria
Jurado:
Rossi, Rolando - Ford, Paula - Herlax, Vanesa
Institución otorgante:
Universidad de Buenos Aires.   Facultad de Farmacia y Bioquímica
Fecha de la defensa:
2015-03-16
Tipo de documento:
tesis doctoral - info:eu-repo/semantics/acceptedVersion
Grado alcanzado:
Doctora de Universidad de Buenos Aires en Fisiología
Editor:
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
Formato:
application/pdf  |   kb.   |  184 p.
Idioma:
español
Area Temática:
Palabras clave:
Descripción:
Los eritrocitos humanos (RBC) liberan ATP frente a diferentes estímulos. In vitro, la exposición a diferentes agentes farmacológicos desencadena eventos intracelulares que activan la liberación de ATP. En esta tesis se analizaron los factores que controlan la evolución temporal de la concentración de ATP extracelular (ATPe). Las células fueron expuestas a dos estímulos que inducen liberación de ATP: 3V y mastoparán 7 (MST7). Ambos estímulos inducen aumentos de la concentración de cAMP. La exposición a 3V produjo un aumento de cAMP, que se tradujo en una liberación aguda de ATP. Cuando las células fueron tratadas con CBX (bloqueante de panexina 1), la liberación de ATP fue completamente bloqueada concluyendo que la salida de ATP ocurriría sólo a través de la panexina 1. La exposición a MST7 indujo pequeños aumentos de cAMP que llevaron a una gran salida de ATP. El CBX bloqueó parcialmente la liberación de ATP, sugiriendo la existencia de dos vías para la liberación del mismo. Además se estudió el papel del volumen y la adhesión celular en la cinética de ATPe. En las células no adheridas, MST7 no indujo respuesta mientras que en células adheridas, las concentraciones ATPe aumentaron y se observó un aumento de volumen celular.
Descripción completa
Abstract:
Human erythrocytes (RBCs) release ATP in different stimuli. In vitro, exposure to different pharmacological agents triggers intracellular events that activate ATP release. In this thesis factors controlling the temporal evolution of extracellular ATP (ATPe) concentration were analyzed. Cells were exposed to two ATP release stimuli: 3V and the peptide mastoparán 7 (MST7). Both stimuli induce increases of cAMP, the main second messenger. Main results: Under 3V exposure there is an increase of cAMP, which translated into an acute, transient release of ATP. When cells were pre-exposed to CBX (pannexin 1 inhibitor), ATP release induced by 3V was completely blocked.Thus under 3V stimulation, RBCs exhibit a single ATP conduit mediated by pannexin 1. Under MST7 exposure, small cAMP increases correlated with a strong ATP release. CBX induced a partial blockage of ATP release, suggesting the existence of two conduits for ATP release. In addition to cAMP, the potential role of cell volume and cell adhesion on ATPe kinetics was studied. In non-adhered cells, MST7 neither trigger ATP release nor affected cell volume. On the other hand, in cells adhered to coverslips, and exposed to MST7, ATPe concentrations strongly increased and a volume increased was observed.
Complete abstract
Calificación:
Sobresaliente (10 Diez puntos)
Dictamen:
La tesis es un aporte novedoso y relevante al conocimiento del papel del ATP extracelular en la regulación del volumen y la transducción de señales en eritrocitos. Está escrita en forma clara y amena, y aporta información detallada de los métodos aplicados. Se destaca la utilización de técnicas muy variadas, bioquímicas, biofísicas y de biología celular y molecular, aplicadas de manera pertinente. Una riqueza adicional es el análisis de los datos a través de un modelo matemático, que permite explicar el comportamiento experimental y generar predicciones que pueden ponerse a prueba. La exposición oral fue clara y ordenada, jerarquizando los resultados más relevantes. La postulante mostró un conocimiento profundo del tema de la tesis, y contestó, con solvencia todas las preguntas y comentarios al trabajo formuladas por el jurado.
Identificador(es):
http://repositoriouba.sisbi.uba.ar/gsdl/cgi-bin/library.cgi?a=d&c=posgrauba&cl=CL1&d=HWA_819
Filiación Institucional:
Fil: Leal Denis, María Florencia. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica; Argentina
Institución aportante:
Facultad de Farmacia y Bioquímica
Biblioteca cooperante:
Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica
Derechos:
info:eu-repo/semantics/openAccess
http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/2.5/ar/
Licencia de uso:
Licencia Creative Commons

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Cita bibliográfica:

Leal Denis, María Florencia (2015-03-16). Homeostasis de ATP extracelular en eritrocitos: interregulación y consecuencias funcionales  (tesis doctoral). Universidad de Buenos Aires.  Facultad de Farmacia y Bioquímica. [consultado:  ] Disponible en el Repositorio Digital Institucional de la Universidad de Buenos Aires:  <http://repositoriouba.sisbi.uba.ar/gsdl/cgi-bin/library.cgi?a=d&c=posgrauba&cl=CL1&d=HWA_819>