Estudio de los mecanismos que regulan la activación de linfocitos Tyd inducida por diferentes agonistas : caracterización del rol inmunomodulador de los neutrófilos

En esta Tesis se evaluó la activación de células Tyd empleando anticuerpos anti-CD3, fosfoantígenos y cristales de urato monosódico (MSU). Además, se investigó el rol inmunomodulador de los neutrófilos sobre células Tyd. Observamos que la expresión de CD69 y la producción de IFN-y y TNF-a inducida por anticuerpos anti-CD3 fueron potenciadas por neutrófilos. La inhibición de serin proteasas previno la potenciación de la activación de células Tyd y la adición de elastasa, catepsina G y proteinasa3 acélulas Tyd incrementó su activación. El efecto de las serin proteasas sobre las células Tyd fue mediadopor el receptor activado por proteasas, PAR1. Además, se demostró que los cristales de MSU activaron a las células Tyd aumentando la expresión de CD25 y CD69, y la producción de IFN-y y TNF-a. El efecto estimulador de los cristales de MSU fue dependiente de Spleen tyrosinekinase Syk, ya que el tratamiento de las células con el inhibidor GS-9973 disminuyó su activación; asímismo la estimulación de las células con cristales de MSU gatilló la fosforilaciónde Syk.Por otro lado, se observó que los neutrófilosinhibieron la activación de células Tyd inducida por cristales de MSU.

In this study, we evaluated the activation of human blood yd T cells stimulated by anti-CD3 antibodies, phosphoantigens and monosodium urate crystals (MSU). Also we investigated the role of neutrophils during the activation of yd T cells. We found that the up-regulation of CD69 expression, and the production of IFN-y and TNF-a induced by anti-CD3 antibodies were potentiated by neutrophils. The inhibition of serine proteases prevented the potentiation of yd T cell activation induced by neutrophils. Moreover, the addition of elastase, cathepsin G and proteinase 3 to yd T cell culture increased their stimulation. We demonstrated that the effect of serine proteases on yd T cells was mediated through the proteases-activated receptor, PAR1. On the other hand, this work demonstrated that MSU crystals activated yd T cells by increasing the expression of CD25 and CD69, and the production of IFN-y and TNF-a. The stimulatory effect of MSU crystals was dependent on Spleen tyrosine kinase Syk, since the treatment of cells with the inhibitor GS-9973 decreased the stimulation of yd T cells. Moreover, the treatment of cells with MSU crystals triggered the phosphorylation of Syk. Also we observed that neutrophils exerted an inhibitory effect on yd T cells activated by MSU crystals.