Factores involucrados en la interacción inicial de Brucella suis con el hospedador : rol de los autotransportadores triméricos

Institución otorgante:

Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales

Fecha:

2014

Tipo de documento: 

info:eu-repo/semantics/doctoralThesis
 

Formato:

application/pdf

Idioma:

spa

Temas:

BRUCELLA - AUTOTRANSPORTADOR - ADHESINA - VIRULENCIA - COMPLEMENTO - POLO NUEVO - MEMBRANA EXTERNA - BRUCELLA - AUTOTRANSPORTER - ADHESIN - VIRULENCE - COMPLEMENT - NEW POLE - OUTER MEMBRANE

Descripción:

El género Brucella comprende patógenos intracelulares facultativos que causan unazoonosis conocida como brucelosis. Esta zoonosis es una de las más dispersas alrededor del mundoy afecta a una amplia variedad de mamíferos, entre ellos muchos de importancia agropecuaria. Unaspecto fundamental en la virulencia de Brucella reside en su capacidad de invadir y replicar dentrode células fagocíticas y no fagocíticas. El objetivo del trabajo de tesis fue identificar y caracterizarmoléculas de B. suis asociadas a la adhesión y/o invasión a las células del hospedador. Mediante análisis bioinformáticos del genoma de B. suis 1330 se identificaron posiblesproteínas que potencialmente podrían cumplir una función en la adhesión y/o invasión. En estatesis se estudiaron tres de las proteínas candidatas (BtaE, BtaF y MapA). Diferentes análisis insilico indicaron que BtaE y BtaF pertenecen a la familia de los autotransportadores triméricos, loscuales median su propia translocación a través de la membrana externa. Enfoques mutacionales yheterólogos demostraron que BtaE y BtaF están involucradas en la adhesión a células nofagocíticas del hospedador y a componentes de la matriz extracelular. En particular, BtaE confirióadhesión a ácido hialurónico mientras que BtaF conferiría una adhesión promiscua a una ampliavariedad de componentes de la matriz extracelular del hospedador y participaría en la formación deun biofilm in vitro. La adhesina BtaF cumpliriría una función adicional ya que confirió a labacteria que la porta tolerancia a la actividad bactericida del complemento presente en el suero. Ambos autotransportadores fueron necesarios para que B. suis genere una completa virulencia enratones inoculados intragástricamente. Por otro lado, por inmunofluorescencia se pudo detectar a BtaE, BtaF y a la adhesina BmaC en un número reducido de células pero en todos los casos lasadhesinas se localizaron en el polo nuevo bacteriano generado luego de la división asimétrica de Brucella. Se propuso que en Brucella dicho polo estaría funcionalmente diferenciado para laadhesión. En cuanto a MapA, la cepa mutante defectiva en esta proteína fue menos eficiente en laadhesión a células no fagocíticas. Sin embargo, la mutante también presentó una sensibilidadnotable a diversos compuestos, como polimixina B, Triton X-100 y lisozima, sugiriendo que lamembrana externa se encuentra alterada. Proponemos que MapA estaría involucrada en la síntesisde algún componente de membrana, lo cual a su vez podría afectar directa o indirectamente laadhesión a componentes del hospedador y alterar la resistencia característica de Brucella al sistemainmune del hospedador. Estudios futuros permitirán dilucidar la función bioquímica de MapA en labiogénesis de la membrana de Brucella y su rol en la interacción de la bacteria con el hospedador.

Identificador:

https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n5501_Ruiz