Las células madre pluripotentes son propagadas en un medio de cultivo novedoso que preserva sus propiedades fundamentales y aumenta su proliferación, asociada a la presencia de una isoforma de fibronectina que incluye el exón EDA

Institución otorgante:

Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales

Fecha:

2013-03-19

Tipo de documento: 

info:eu-repo/semantics/doctoralThesis
 

Formato:

application/pdf

Idioma:

spa

Temas:

CELULAS MADRE EMBRIONARIAS - CELULAS MADRE PLURIPOTENTES INDUCIDAS - AUTO-RENOVACION - PLURIPOTENCIA - PROLIFERACION - MEDIO CONDICIONADO - FIBRONECTINA - EMBRYONIC STEM CELLS - INDUCED PLURIPOTENT STEM CELLS - SELF-RENEWAL - PLURIPOTENCY - PROLIFERATION - CONDITIONED MEDIUM - FIBRONECTIN

Descripción:

Las células madre (CM) pluripotentes, entre ellas, las CM embrionarias (CME) y CMpluripotentes inducidas (CMPI) son capaces de propagarse indefinidamente en cultivo y dediferenciarse a todos los tipos celulares del organismo. Encontramos un medio de cultivoque permite su propagación, preservando sus propiedades básicas, evaluadas por análisis deexpresión de marcadores y diferenciación in vitro e in vivo; y aumentando paralelamente suproliferación. Este medio es condicionado por una línea celular de granulosa bovina,mitogénico sobre otros tipos celulares, adjudicándose dicho efecto a la fibronectina (FN) queincluye el exón EDA (FN+EDA). En este contexto, decidimos analizar si esta isoforma de FN aumenta la proliferación de las CME. Estudiamos los niveles de proliferación de las CME en presencia de EDA exógeno, mediante dos estrategias. Utilizamos medioscondicionados por líneas de fibroblastos embrionarios de ratón genéticamente modificadas,que secretan sólo FN+EDA, FN sin EDA o ambas isoformas. Por otra parte, evaluamos elefecto de un péptido correspondiente a una porción de FN que incluye o no dicho exón. Entodos los casos, observamos que la presencia de este dominio produjo un aumento en laproliferación en CME de ratón y humanas, evaluada por MTT, cristal violeta y ensayos desanado de herida. Esperamos que nuestros hallazgos contribuyan al conocimiento de losmecanismos moleculares involucrados en la proliferación de CM y a la optimización de suscondiciones de cultivo.

Identificador:

https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n5287_Losino