Mecanismos involucrados en la reabsorción de bicarbonato en el túbulo contorneado proximal de ratas seniles

Institución otorgante:

Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales

Fecha:

2007

Tipo de documento: 

info:eu-repo/semantics/doctoralThesis
 

Formato:

application/pdf

Idioma:

spa

Temas:

ENVEJECIMIENTO - RIÑON - ACIDIFICACION PROXIMAL - INTERCAMBIADOR NA+/H+ - NHE3 - NHE8 - V-H+ATPASA - AMPC - PTH - AGING - KIDNEY - PROXIMAL ACIDIFICATION - NA+/H+ EXCHANGER - NHE3 - NHE8 - V-H+ATPASE - CAMP - PTH

Descripción:

El objetivo del presente trabajo fue evaluar los posibles mecanismos involucrados en la disminución de la capacidad de acidificación tubular proximal en ratas seniles. Mediante experimentos de micropuntura determinamos la contribución del flujo de bicarbonato (JHCO3-) sensible a EIPA (inhibidor del intercambiador Na+/H+) y a bafilomicina (inhibidor de la V-H+ATPasa) en túbulo contorneado proximal (TCP) de ratas adultas jóvenes (3 meses) y seniles (18-20 meses). Por Western blot evaluamos, en vesículas de membrana luminal de TCP de animales adultos jóvenes y seniles, la abundancia de las isoformas NHE3 y NHE8 del intercambiador Na+/H+ y de la V-H+ATPasa. Realizamos experimentos de RT-PCR en homogenatos de corteza renal de ambos grupos experimentales para evaluar la expresión del ARNm de NHE3, NHE8 y H+ATPasa. Determinamos la concentración plasmática de la hormona paratiroidea (PTH) y la cantidad de AMPc presente en corteza renal de ambos grupos experimentales. Las ratas seniles poseen un JHCO3- 30% menor que los animales adultos jóvenes. En ratas jóvenes, EIPA reduce JHCO3- un 60% y bafilomicina un 30%, mientras que en animales seniles EIPA reduce JHCO3- aproximadamente un 60% y bafilomicina un 50%. La abundancia de la proteína y la expresión del ARNm de NHE3 y de la V-H+ATPasa fueron similares entre ambos grupos experimentales, en tanto que la cantidad de proteína y de ARNm de NHE8 fue menor en los animales seniles que en los adultos jóvenes. La concentración de PTH se encuentra aumentada en los animales seniles. Si bien la concentración de AMPc observada en la corteza renal de animales adultos jóvenes no fue significativamente diferente, en los animales seniles mostró una tendencia a aumentar. Estos resultados sugieren que el intercambiador Na+/H+ está afectado en la reabsorción de bicarbonato en el TCP de ratas seniles y que la isoforma, sensible a EIPA, responsable de la reducción del flujo de bicarbonato en estos animales es NHE8. Sin embargo, no podemos descartar mecanismos de regulación de la actividad de la V-H+ATPasa o de la isoforma NHE3 no relacionados con la transcripción o traducción de estas proteínas. Una de las alternativas para la regulación del intercambiador Na+/H+ sería la inhibición de la PTH sobre su actividad por medio de un mecanismo alternativo al mediado por AMPc.

Identificador:

https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n4161_Fiori