Estudio bioquímico y estructural de la quinasa de proteínas CK2 del hongo Candida Albicans y su participación en la fosforilación del proteasoma 20S homólogo : Clonado de la subunidad regulatoria (beta) de la enzima

Institución otorgante:

Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales

Fecha:

1998

Tipo de documento: 

info:eu-repo/semantics/doctoralThesis
 

Formato:

application/pdf

Idioma:

spa

Temas:

CANDIDA ALBICANS - CK2 - SUBUNIDAD BETA - PROTEASOMA 20S

Descripción:

Se investigó la Ae de la CK2 a lo largo del crecimiento del hongo Candidaalbicans, observándose que esta era máxima al comienzo de la faselogaritmica de crecimiento. La CK2 de células levaduriformes del hongo sepurificó a aparente homogeneidad mediante un procedimiento que incluyó 4cromatografias. La enzima mostró las características propias de las CK2conocidas hasta el momento. En su forma nativa, presenta un PM aparentede 159 kDa. Esta compuesta por 4 polipéptidos diferentes; los polipéptidosde 39 y 37 kDa se identificaron como las subunidades catalíticas porexperimentos de fosforilación in situ e inmunoreconocimiento. Los de 44 y 36 kDa fueron identificados como 2 subunidades regulatorias diferentes porautofosforilación e inmunoreconocimiento. Se estudió la fosforílación del proteasoma 20S de C. albicans por la CK2homóloga, siendo esta totalmente dependiente de polilisina. Se identificó lasubunidad mayoritariamente fosforilada como el componente α7/C8, porinmunoreconocimiento y secuenciación de un fragmento tríptico. Losresultados de este trabajo indican la existencia de más de un sitio defosforilación en esta subunidad. Se logró el clonado del gen que codifica para la subunidad β de la CK2,obteniéndose un PM teórico para la proteína deducida de 33,7 kDa y unpunto isoeléctico de 4,53. En al secuencia se encuentran presentes ademásde mayoria de los aminoácidos conservados en el resto de las subunidadesregulatorias conocidas hasta el momento una inserción de 25 aminoácidos enla región central y una extensión hacia el extremo C-terminal.

Identificador:

https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n3014_Walz